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海南山苦茶中游离氨基酸的分析



全 文 :海南山苦茶中游离氨基酸的分析
郭 玲 林连波 刘明生
(海南医学院 植物化学研究室 海口市 571101)
  摘 要 对海南山苦茶(Mallotus furetianus)叶中游离氨基酸进行了测定。结果表明 , 其含量总游离氨基酸为 0.
2%,人体必需氨基酸占总游离氨基酸为 18.7%, 脯氨酸含量特高 , 占总游离氨基酸达 57%。
  关键词 海南山苦茶;游离氨基酸;测定
  山苦茶 Mallotus furetianus 系大戟科野桐属植
物 ,海南盛产[ 1] 。民间广用作解油腻 、助消化的保健
饮料 。药理研究表明 ,该植物具有消炎 、止痛 、利胆
消食之功效[ 2、3] 。为了系统研究海南山苦茶的化学
成分及其与药效间的关系 ,我们对其进行了游离氨
基酸的鉴定和含量测定。
1 仪器与材料
美国惠普 HP -1050型高效液相色谱仪:HP -
1050型四元梯度泵 ,自动进样器 , HP -1046A 型荧
光检测器 ,HPLC-2D色谱工作站 。
海南山苦茶叶 ,2001年 1月采自海南省万宁市
东山岭。经海南师范学院钟义教授鉴定 。
2 方法与结果
2.1 样品处理
海南山苦茶叶 ,晾干 ,粉碎 。取 1.5g 样品于烧
瓶中 , 加入 0.1mol.L-1HCl 10ml 和甲醇 40ml , 于
80℃水浴上回流 30min。过滤 ,收集滤液 ,残渣再用
同样的方法回流提取一次 ,过滤。合并两次提取液 ,
水浴蒸干 ,残渣用 0.1mol.L-1HCl 20ml溶解(超声波
处理),离心 ,取上清液 ,0.45um滤膜超滤 ,滤液用于
分析 。
2.2 色谱条件
色谱柱:HP Hypersil ODS 5um 125* 4mm
流动相 A:8.0mmol.L-1磷酸盐缓冲液(pH7.2),
含0.3%四氢呋喃。
流动相 B:8.0mmol.L-1磷酸盐缓冲液(pH7.2):
甲醇:已腈为 10:7:3。
流量:1.0ml/min
柱前自动衍生程序:设置自动进样器程序为依
次吸取 1ul OPA试剂 ,5ul pH10.4的0.1mol.L-1硼酸
盐缓冲溶液和 1ul样品 ,并设定每次吸取不同的溶
液前用蒸馏水洗涤针头 ,然后在线混合 5次 ,等待
1.5分钟 ,进样 。
梯度洗脱程序:0min , 0%B;25min , 100%A;
35min ,100%B;35.1min ,100%B;45min ,100%A。
检测程序:荧光检测器波长;Ex =340nm.Em=
450nm
2.3 分析方法与结果
OPA-PMOC柱前衍生反相高效液相色谱法 ,峰
面积外标法定量。分析结果见表 1。
表 1 海南山苦茶中游离氨基酸的种类和含量(%)
名 称 含量 名 称 含量
天冬氨酸(Asp) 0.002 酪氨酸(Tyr) 0.001
谷氨酸(Glu) 0.008 *缬氨酸(Val) 0.004
天冬酰胺(Asn) 0.013 *蛋氨酸(Met) 0.003
丝氨酸(Ser) 0.002 *色氨酸(Trp) 0.003
谷氨酰胺(Gln) 0.014 *苯丙氨酸(Phe) 0.003
甘氨酸(Gly) 0.001 *异亮氨酸(Ile) 0.006
*苏氨酸(Thr)+ *亮氨酸(Lou) 0.001
*组氨酸(His) 0.007 *赖氨酸(Lys) <0.002
丙氨酸(Ala) 0.012 脯氨酸(Pro) 0.114
*精氨酸(Arg) 0.009 游离氨基酸总量 0.203
  注:*者为人体必需氨基酸
3 讨 论
本实验结果表明 ,该植物叶中总游离氨基酸含
量为 0.2%,人体必需氨基酸占总游离氨基酸为 18.
7%,脯氨酸含量最高 ,占总游离氨基酸达 57%。
氨基酸是合成蛋白质 ,维持氮平衡 ,构成体内各
66                     中国野生植物资源               第 20卷第 6 期
国家自然科学基金项目资助课题(No.30060088)
种酶 、抗体及某些激素的原料 , 并且能调节生理机
能 ,供给热能 ,促进生长发育 ,补充代谢消耗。此外 ,
还可以维持毛细血管的正常渗透压 。
一些主要氨基酸的药效据报道有:赖氨酸是合
成核蛋白 、血红蛋白及促进大脑神经细胞再生的重
要氨基酸 ,对营养不良 、乙型肝炎 、支气管炎等有一
定的辅助疗效;蛋氨酸是合成表皮中蛋白质及胰岛
素所必需的氨基酸 ,有预防脂肪肝的作用;色氨酸是
大脑合成血清素及松果体合成褪黑素的原料;苏氨
酸在体内能促进磷脂合成和脂肪酸氧化 ,具有抗脂
肪肝疗效 ,其铁盐有抗贫血作用;异亮氨酸 、亮氨酸 、
缬氨酸对组织蛋白质合成与分解有调节作用 ,可以
防治肝 、肾功能衰竭 ,亮氨酸还有刺激胰岛素的分泌
功能;组氨酸有抗溃疡 、促进细胞再生作用 ,用于贫
血及风湿病的辅助治疗 ,在体内经脱羧生成组胺 ,具
有降低血压 ,扩张血管 ,促进胃液分泌等作用;精氨
酸能促进生长激素 、催乳素 、胰岛素 、胰高血糖素的
释放 ,能促进创伤愈合;脯氨酸具有抗高血压作用 ,
而乙酰羟基脯氨酸有用作抗风湿药和用于外伤治
疗;甘氨酸可治疗重症肌无力等营养失调症[ 4] 。
综上表明 ,海南山苦茶中人体必需氨基酸的存
在 ,对该植物的药效活性有明显的促进作用 ,是该植
物的有效成分之一 。
参 考 文 献
[ 1]  中国科学院华南植物研究所编.海南植物志.第二卷.北京:科
学出版社 , 1965.156
[ 2]  华运群.山苦茶的利胆作用和毒性.中国药理学通报 , 1992 , 8
(5):334
[ 3]  林海.山苦茶的抗菌和抗病毒作用研究.中国药科大学学报 ,
1993 ,24(3):235
[ 4]  蒋滢主编.氨基酸的应用.北京:世界图书出版公司 , 1996.160
~ 163
(上接第 71 页)
表 2 牛蒡幼苗无机元素含量* 单位:mg/ kg
Zr锆 Al铝 Mg镁 Ca钙 P磷 Fe铁 Mn 锰 Cu 铜 Zn锌 B硼 Sr锶
- 430.0 2540.0 197.9 2985.0 1560.4 3.95 47.0 170.0 3.8 19.0
Ti钛 Ba钡 Ni镍 Cr铬 Co钴 Cd镉 Pb铅 Be铍 V钒 Y钇
9.87 248.5 1.1 1.1 - 0.11 5.88 - - -
  *钠 、钾元素未测。
  由表 2可以看出 ,牛蒡幼苗中测出 16种无机元
素 ,其中 ,镁 、磷 、铁的含量均较高 ,镁的含量达到
2540.0mg/kg ,磷的含量达到 2985.0mg/kg ,比大众喜
爱的野菜柳蒿芽(2492.0mg/kg)还要高 。尤其是 铁
的含量是一般栽培种和野生蔬菜都不能比的 ,达到
了1560.4mg/kg ,而柳蒿芽为 553.4mg/kg ,荚果蕨菜
仅为 489.0mg/kg 。仅此而言 ,食用牛蒡苗就有值得
汲取的营养成分 ,对人体发育有着明显的好处 。再
者 ,锌的含量也是较高的 ,为 170.2mg/kg ,而柳蒿芽
为116.9mg/kg ,荚果蕨菜为 120.6mg/kg ,更高于辽
东 木 43.20mg/kg 及蒲公英的 44.2mg/kg 。锌元素
在加快儿童智力和促进食欲上的作用已引起人们充
分的重视。另外 ,从表中我们还可知道重金属铅 、
镉 、钇的含量很低或没有 。
4 结 论
(1)牛蒡幼苗确是一种值得开发利用的山野菜 ,
其味道微甜 ,比较适口 ,营养价值较高 。我国广泛的
野生资源为繁荣市场 、发展绿色食品提供广阔的空
间 。
(2)牛蒡作为药材已被人们熟识 ,作为根菜也有
民间加工和出口贸易。但种植面积一直不大 ,而在
韩国 、台湾及日本栽培较为普遍 ,我国仅限于沿海地
区有栽培的 ,东北地区民间有零星栽培 。它的药用
价值 、根加工食用价值已被重视的同时 ,幼苗的食用
价值已被肯定 。结合幼苗的食用 ,其栽培面积还将
扩大 ,发展前景更好 ,为提高人民的健康水平 ,创取
外汇具有积极的意义。
67海南山苦茶中游离氨基酸的分析*