全 文 ：·研究简报· 北方园艺 2009(12):112～ 113
第一作者简介:郝爱平(1979-),女 ,硕士 ,讲师 ,现从事植物分子生
物学教学与科研工作。 E-mail:swxhap@126.com。
收稿日期:2009-06-20
非 洲 红 茄 组 培 快 繁 技 术 研 究
郝 爱平 , 魏继 承 , 国 会艳
(牡丹江师范学院生物系 ,黑龙江牡丹江 157012)
摘 要:以非洲红茄的叶片为外植体 ,MS作为基本培养基 ,添加不同比例的植物生长调节
剂 ,进行了离体培养。结果表明:叶片愈伤组织诱导的最适培养基为 MS+BA 2.5 mg/L+IAA
0.5 mg/L;芽继代和增殖最适培养基为 MS+BA 0.5 mg/L。将不定芽接种于 MS培养基10 d可
产生根系 ,壮苗后移栽成活率可达100%。
关键词:非洲红茄;愈伤组织;叶片
中图分类号:S 681.903.6 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2009)12-0112-02
非洲红茄(Solana integri lolium Poir)是观赏茄中的
一个品种 ,又名平茄、赤茄 ,茄科茄属 ,原产非洲 ,1 a生草
本。一般株高 30 ～ 40 cm ,叶脉上有刺 、花序腋生 ,有花
3～ 8朵。花冠白色或淡紫色 ,浆果绿色变橙色或猩红
色 ,扁圆形 ,嫩果浅绿色 ,老果红色 ,是优良的切花材料 ,
具有较高的观赏价值和经济价值。非洲红茄主要采用
播种繁殖 ,由于种皮坚硬 ,育苗时间长 ,又因温度差异在
北方寒冷地区难以大面积种植 ,这严重影响了非洲红茄
的工厂化育苗和新品种的选育 ,而应用植物组培快繁技
术可以缩短培养时间 ,满足市场需要。近年来一些学者
对茄子组织培养进行了研究[ 1-4] ,但对于观赏茄的组织
培养研究很少[ 5] ,这些工作存在着研究不够系统和植株
再生频率不高的问题。而高效率的外植体再生体系是
采用基因工程改良作物的前提。以非洲红茄叶片为外
植体 ,旨在建立一套可供遗传转化研究的愈伤组织高效
再生体系 ,为今后观赏茄的新品种选育和转基因研究提
供理论依据。
1 材料与方法
1.1 无菌苗的获得
将种子在接种前用清水浸泡 24 h ,在超净工作台上
用75%酒精浸泡 30 s ,边泡边摇 ,用无菌水冲洗后放入
0.2%的升汞溶液中 ,消毒 4 ～ 5 min;然后用无菌水冲洗
4～ 5次 ,每次冲洗1 min ,用灭菌的吸水纸吸干种子表面
的水分后接种于不加激素的 MS 培养基上;7 d后种子
萌发 ,大约2周后长成无菌苗。试验所用的培养基均含
有蔗糖 20 g ,琼脂粉 5.0 ～ 5.1 g ,pH 6.0 ,均高压灭菌
121℃, 20 min ,培养温度 25 ～ 27℃,光照 12 h/d ,照度
0.053 ～ 0.088 mmol·m-2 ·s-1 ,湿度 40%～ 50%。
1.2 愈伤组织的诱导
在超净工作台上切下无菌苗叶片 ,切成 1 cm3小块 ,
分别接种于4种不同激素配比浓度的愈伤组织诱导培
养基中(表 1),诱导培养基以 MS 为基本培养基。不同
激素浓度培养基各做10瓶 ,每瓶接种3 ～ 4个外植体 ,诱
导 20 d后观察结果。
表 1 不同激素浓度培养基种类
培养基种类 激素组合/mg·L-1
A BA 2.5+IAA 0.5
B BA 5.0+IAA 0.5
C BA 4.0+IAA 1.0
D BA 2.0+IAA 1.0
1.3 愈伤组织的分化
将上述培养基中诱导得到的胚性愈伤组织切成大
小一致约为 0.5 cm3的小块 ,转接至 3种分化培养基中
(表 2),诱导 20 d后观察结果。
表 2 不同激素浓度愈伤组织分化培养基种类
培养基种类 激素组合/mg·L-1
A BA 2.5+IAA 0.5
E MS+BA 0.5
F MS+GA 2.0+BA 0.5
1.4 再生植株的壮苗生根
愈伤组织分化出的不定芽长到 1 ～ 2 cm后 ,继续转
至新鲜分化培养基中 ,一般情况下 ,刚分化出的不定芽
长势较弱 ,须首先将其连同基部的小块愈伤组织一并转
入分化培养基中进行继代培养 ,通过继代培养即可达到
壮苗 、繁殖的双重目的。当不定芽长到4～ 5 cm后 ,转至
不含激素的MS培养基上 ,10 d左右即可生根。
2 结果与分析
2.1 不同激素浓度培养基对愈伤组织诱导的影响
由表 3可看出 ,在 A和 C培养基中的叶片经过20 d
诱导后 ,叶片膨胀 ,边缘长出绿色愈伤组织并有芽点出
现(图1)。B和D培养基中的叶片发黄 ,愈伤组织体积
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北方园艺 2009(12):112 ～ 113 ·研究简报 ·
小 ,无芽点。这说明A和C培养基适合非洲红茄愈伤组
织诱导。但在 C培养基中非洲红茄叶片出现须根 ,白色
愈伤组织且疏松 ,这可能由于 IAA浓度较高引起。因此
A培养基适合非洲红茄叶片愈伤组织诱导。
表 3 叶片在不同激素浓度培养基中的
愈伤组织诱导率
培养基类型 外植体个数/个 诱导率/ % 愈伤组织形态
A 32 93.8 致密 ,绿色 ,无须根 ,有芽点
B 30 20.0 松散 ,黄色,无芽点
C 30 90.0 松散 ,浅绿 ,有须根 ,全芽点
D 30 33.3 松散 ,黄色,无芽点
2.2 叶片愈伤组织在不同培养基中分化情况
将 A和C中得到的长有愈伤组织和芽点的叶片分
别放入接种于 3种分化培养基中 ,经过 12 d观察后发
现 ,在原有A培养基中芽点没有伸长 ,愈伤组织褐化 ,说
明 A培养基只适合愈伤组织诱导 ,不适合芽伸长 ,这可
能由于 A培养基中激素浓度过高导致。F 培养基中发
现加入赤霉素也不适合愈伤组织分化 ,只有将 BA浓度
降到 0.5 mg/L 时发现芽点伸长 ,长成完整植株(图 2)。
因此 E培养基适合于愈伤组织分化。
图1 叶片诱导的胚性愈伤组织 图 2 愈伤组织分化情况 图3 再生植株的生根培养 图4 再生植株的移栽
2.3 生根与移栽
将愈伤组织分化出的不定芽接种于 MS培养基中
培养一段时间后生根(图 3)。当生根苗高4 ～ 5 cm 、根健
壮时 ,打开培养瓶口练苗 3 d。然后小心取出植株 ,用清
水洗净根部 ,尽可能避免伤害幼根 ,然后移栽到装有富
含腐殖质 、疏松肥沃 、保水透气的灭菌沙壤土中。移栽
后的小苗要注意保温保湿 ,放在温室中阳光较充足的地
方 ,经过 10 d左右长出新根和新枝叶(图 4)。
3 结论
在该试验中选用叶片作为外植体的尝试获得了成
功。对非洲红茄来说 ,诱导叶片愈伤组织的最适培养基
为MS+BA 2.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L;愈伤组织分化
最适培养基为MS+BA 0.5 mg/L。
参考文献
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Study on Tissue Culture Technology of Solana integrilolium Poir
HAO Ai-ping , WEI Ji-cheng , GUO Hui-yan
(Department of Biology , Mudanjiang Normal Colleg e, Mudanjiang ,Heilongjiang 157012 , China)
Abstract:The experiment took Solana integrilolium Poir leaves and stems as explants , which was based on the MS nu-
t rient medium , added different concentration plant grow th regulator carried on the rapid reproduction in vitro.The ex-
perimental results indicated that the best nut rient medium for leves callus inductiom was MS+BA 2.5 mg/ L+IAA
0.5 mg/L.The bud subculture of multiplication the most suitable nutrient medium was MS+BA 0.5 mg/L.The adven-
titious buds grew roots after 10 d in the MS medium.The survive rate after transplant reached 100%.
Keywords:Solana integrilolium Poir;Callus;Leaves
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