全 文 :China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 43 中国药房 2010年第21卷第43期
信息;同时各活性组分群中的主要成分与小儿金宁口服液解
热、抗炎、抗病毒等药效之间的谱效相关性研究也在进行,其
研究结果近期将整理成文进一步报道。
参考文献
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材,2001,24(4):235.
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[ 5 ] 周本宏,吴 ,王慧媛,等.石榴皮药材HPLC指纹图
谱研究[J].中国药房,2008,19(30):2 351.
(收稿日期:2010-06-11 修回日期:2010-08-16)
紫外分光光度法测定大蝎子草药材中总黄酮的含量Δ
刘文炜 1,2*,沈祥春 1#,陶 玲 1,高玉琼 2(1.贵阳医学院,贵阳市 550004;2.贵州省生物技术研究开发基地,贵阳
市 550002)
中图分类号 R284.1;R927.2 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2010)43-4088-02
摘 要 目的:建立大蝎子草总黄酮含量测定方法。方法:采用紫外分光光度法,以芹菜素为标准品,检测波长为268 nm。结果:
芹菜素检测浓度在 1.984~11.904 μg·mL-1范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.999 9);平均加样回收率为 96.15%,RSD=
1.98%(n=6)。结论:本方法稳定、准确、可靠,可用于大蝎子草总黄酮的含量测定。
关键词 大蝎子草;芹菜素;总黄酮;紫外分光光度法;含量测定
Determination of Total Flavonoids from Girardinia diversifolia by UV Spectrophotometry
LIU Wen-wei,SHEN Xiang-chun,TAO Ling(Guiyang Medical University,Guiyang 550004,China)
LIU Wen-wei,GAO Yu-qiong(Guizhou Institute of Biotechnology Research and Development,Guiyang
550002,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To establish the determination method for total flavonoids from Girardinia diversifolia. METHODS:
The contents of total flavonoids were determined by UV spectrophotometry at detection wavelength of 268 nm with apigenin as stan-
dard substance. RESULTS:The linear range of apigenin were 1.984~11.904 μ g·mL-1(r=0.999 9)with average recovery of
96.15%(RSD=1.98%,n=6). CONCLUSION:The method is accurate,reliable and stable and it can be used for the content deter-
mination of total flavonoids from G. diversifolia.
KEY WORDS Girardinia diversifolia;Apigenin;Total flavonoids;UV spectrophotometry;Content determination
Δ贵州省科学技术基金项目(黔科合 J字[2008]2162号);贵州省
优秀科技教育人才省长专项资金项目(黔省专合字(2006)55号)
*助理研究员,执业药师,硕士研究生。研究方向:植物化学成分
及生物活性。电话:0851-5713626。E-mail:khliuwenwei@163.com
# 通讯作者:教授。研究方向:中药、民族药活性。电话:
0851-5713626
活麻药用历史悠久,在《楚彝本草》、《滇药录》、《藏本草》
等均有记载,主要用于治疗中风不语、咳嗽多痰、风湿疼痛、跌
打损伤、骨折等[1]。活麻作为治疗药物以红禾麻药名被收录在
2003年版《贵州省中药材、民族药材质量标准》中,该标准收载
的活麻原植物为荨麻科珠牙艾麻 Laportea bulbifera(Sieb. et
Zucc.)Wedd.的新鲜或干燥全草[2]。笔者经过广泛调查,发现
贵州少数民族地区以荨麻科大蝎子草属植物大蝎子草
Girardinia diversifolia(Link)Friis的全草或根作为活麻药材广
泛使用。而目前对大蝎子草的研究主要集中于其植物生态
学、药效学及临床等方面[3],对其质量研究内容较少,迄今未见
相关报道。为提高大蝎子草质量的可控性,本研究特对大蝎
子草中总黄酮的含量进行测定,以为建立大蝎子草的质量控
制标准提供依据[4~7]。
1 仪器与材料
TU-1800型紫外-可见分光光度仪(北京普析通用仪器有
限责任公司);AL204型万分之一电子天平(瑞士梅特勒-托利
多公司);AUW120D型十万分之一电子天平(岛津国际贸易
(上海)有限公司)。
芹菜素标准品(成都普思生物科技有限公司,含量>
98%);水为重蒸水,95%乙醇为分析纯。大蝎子草药材采集
于贵州花溪,经贵阳医学院生药学与药用植物学教研室龙庆
德副教授鉴定为蝎子草属植物大蝎子草G. diversifolia(Link)
Friis的地上部分,标本保存于贵阳医学院药学院。
2 方法与结果
2.1 标准品溶液的制备
精密称取芹菜素标准品 10 mg,置 25 mL量瓶中,加 95%
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中国药房 2010年第21卷第43期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 43
乙醇溶解并定容,摇匀,即得。
2.2 供试品溶液的制备
取大蝎子草药材粉末(过 60目筛)1 g,精密称定,精密加
入60%乙醇50 mL,称重,加热回流1 h,再称重,用60%乙醇补
足失重,摇匀,滤过,精密吸取滤液 2 mL,置于 50 mL量瓶中,
加95%乙醇至刻度,摇匀,即得。
2.3 测定波长的选择
以95%乙醇为空白对照,在200~400 nm波长范围内分别
对标准品和供试品进行紫外光谱扫描,结果二者均在 268 nm
波长附近有最大吸收,因此选择 268 nm为测定波长。色谱见
图1。
2.4 标准曲线的制备
精密吸取芹菜素标准品溶液适量,加 95%乙醇配制成每
1 mL分别含 1.984、3.968、5.952、7.936、9.920、11.904 μg的溶
液,于268 nm波长处测定吸光度。以浓度(C)为横坐标,吸光度
(A)为纵坐标,制备标准曲线,得回归方程为 A=0.065 35C+
0.000 06(r=0.999 9)。结果表明,芹菜素检测浓度在 1.984~
11.904 μg·mL-1范围内与吸光度呈良好线性关系。
2.5 重复性试验
取同一批大蝎子草药材共 6份,分别照“2.2”项下方法制
备供试品溶液,于 268 nm波长处测定吸光度,代入回归方程,
计算总黄酮含量。结果,RSD=1.46%,表明方法重复性良好。
2.6 稳定性试验
取重复性样品1,分别于30、60、90、120、150、180 min测定
其吸光度,计算相对标准偏差。结果,RSD=0.31%,表明供试
品溶液在180 min内基本稳定。
2.7 回收率试验
取已知含量的大蝎子草粉末0.5 g,共6份,精密称定,按标
准品加入量与所取供试品含量之比为 1 ∶ 1的比例加入芹菜素
标准品,按“2.2”项下方法制备供试品溶液,分别测定吸光度,
计算回收率,结果见表1。
2.8 样品含量测定
取不同批次的大蝎子草药材,分别按“2.2”项下方法制备
供试品溶液,按上述方法测定,计算总黄酮含量(n=3)。结
果,3批样品含量分别为 5.933 0、4.356 1、7.894 5 mg·g-1,RSD
分别为1.62%、1.41%、1.53%。
3 讨论
试验曾采用芦丁作为总黄酮测定的标准品,但在显色前与
显色后分别对标准品及供试品进行紫外扫描,没有发现共有的
最大吸收峰,故采用荨麻科植物中重要的黄酮类成分——芹菜
素作为总黄酮含测的标准品。
在提取溶剂的选择中,分别采用50%、60%、70%、95%乙
醇加热回流提取,结果60%乙醇提取含量相对较高,且叶绿素
提取率较低,故采用60%乙醇作为提取溶剂。
在提取方法的选择上,分别采用超声、加热回流、冷浸法
进行提取,结果显示加热回流提取含量相对较高,故采用加热
回流提取法。
在提取时间的选择上,分别提取了 30、45、60、75、90、120
min,结果显示样品提取 60 min后含量均一,故采用加热回流
60 min。
综上,本方法稳定、准确、可靠,可用于大蝎子草总黄酮的
含量测定。
参考文献
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2007,18(9):673.
(收稿日期:2010-07-16 修回日期:2010-09-09)
Abs
2.000
1.497
0.995
0.492
-0.010
200.00 250.00 300.00 350.00 nm
A
Abs
2.000
1.513
1.025
0.538
0.050
200.00 250.00 300.00 350.00 nm
B
图1 紫外扫描图
A.芹菜素标准品;B.大蝎子草供试品
Fig 1 UV scanning spectrum
A. apigenin standard;B. G. diversifolia sample
表1 加样回收率试验结果(n=6)
Tab 1 Results of recovery test(n=6)
编号
1
2
3
4
5
6
称样量/g
0.502 3
0.506 3
0.517 4
0.506 2
0.513 9
0.513 3
样品含量/mg
2.980 1
3.003 9
3.069 7
3.003 3
3.049 0
3.045 4
加样量/mg
2.976 0
2.976 0
2.976 0
2.976 0
2.976 0
2.976 0
测得量/mg
5.832 3
5.863 1
5.995 2
5.807 4
5.847 0
5.974 3
回收率/%
95.84
96.08
98.30
94.22
94.02
98.42
x/%
96.15
RSD/%
1.98
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