全 文 ：Abstract of the study on four Uygur medicines＇ effect on common viruses
associated with respiratory infections in vitro
Li － jiqiang1 Wang － huaizhen2 Mamat ali·Tursun2 Li － li2 Liu － ni3 Zhang － fengxue3
( 1． Second Affiliated Hospital，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510120;
2． Tropical Medicine Institute，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510405;
3． First people＇s hospital of Kashgar，Xijiang 844000)
［Abstract］Objective:to observe the inhibition of four Uygur medicines on lesions caused by viruses associated with respiratory in-
fections．Methods:Respective inoculations with A(H1N1)virus strain FM，respiratory syncytial virus strain long，adenovirus type
3，and rhinovirus type R14 in MDCK，A549，and HEL cells． Apply the method of cytopathic effects (CPE) ，and observe the
effects of four Uygur compounds，namely Zupa syrup，Xipayi mouth rinse，Zukamu granules，and Gantongdan，on four common vi-
ruses associated with respiratory infections in vitro． Results:being non － toxic and 50mg /ml in concentration，Shimi Gantongdan
completely inhibited A(H1N1)virus strain FM． Being non － toxic and by 1:200 dilution，Xipayi mouth rinse completely inhibited
lesions caused by adenovirus type 3． Being non － toxic，by 1:30 dilution，and 15． 94mg /ml in concentration，Zupa syrup and Zuka-
mu granules completely inhibited respiratory syncytial virus． Conclusion:The Uygur medicines studied in this paper have antiviral
effects，and their function mechanisms should be explored in depth． It will provide some experimental basis for the treatment of viral
respiratory infectious diseases with Uygur medicines．
［Key words］Compound Zupa Syrup;Xipayi Mouth Rinse;Zukamu Granules;Gantongdan;virus associated with respiratory infec-
tions;in vitro
△基金项目:内蒙古自治区自然科学基金项目(2010BS1202) ;内
蒙古医学院科学技术研究项目博士启动基金(NY2010BQ007)
通讯作者:王晓琴，中药学博士，教授，E － mail:wangxiao-
qin760519@ yahoo． com． cn
传统药物黄花列当提取物清除 DPPH的活性研究△
许国青1 王晓琴2* 崔佳颖2 李万强2
( 1．内蒙古自治区卫生干部教育培训中心，内蒙古 呼和浩特 010031; 2． 内蒙古医学院药学院，内蒙古 呼和浩特 010110)
摘 要:目的:研究黄花列当 70%乙醇粗提物和不同萃取部位清除 DPPH自由基的活性。方法:黄花列当药材干燥粉碎后，
以 70%乙醇回流提取得到粗提物( hh4) ，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别得到乙酸乙酯部位( hh1) 、正丁醇部位( hh2)
和水部位( hh3) 。用清除 DPPH自由基法测试 4 个提取部位的抗氧化活性。结果:IC50 值( mg·μmL －1 ) 从小到大依次为:
Vc( 0． 0718) ＜ hh1( 0． 0997) ＜ hh2( 0． 1284) ＜ hh4( 0． 1732) ＜ hh3( 0． 4538) 。结果表明黄花列当各提取部位都具有不同程
度的抗氧化活性，其中乙酸乙酯部位清除 DPPH活性最强。结论:黄花列当具有一定的清除自由基、抗氧化的活性。
关键词:传统药物; 黄花列当;清除 DPPH自由基
中图分类号:R291． 2 文献标识码:A 文章编号:1006 － 6810(2012)09 － 0040 － 03
黄花列当(Orobanche pycnostachya Hance)为列当科
(Orobanche)列当属植物，为多年生、二年生或一年生寄生
草本，主要寄生于蒿属植物的根上［1］。全草入药，具有补
肾助阳、强筋骨的功能，用于治疗腰膝冷痛、阳痿、遗精，蒙
医药还用于治疗碳疽，民间常做肉苁蓉的代用品［2］。
本文首次研究了黄花列当 70%乙醇粗提物和不同萃
取部位对［DPPH·］自由基的清除作用。自由基包括活性
氧类，存在于体内外，是生物体正常代谢中形成的，影响
着各种生理活性。生物体内过量的氧自由基会导致一系列
疾病，如血管粥样硬化、高血压、糖尿病、癌症、帕金森病及
老年痴呆症等。所以能消除活性氧的抗氧化剂受到了人们
更多的关注。一些蒙医药药治病的机理也被认为与其抗氧
04 中国民族医药杂志 2012 年 9 月第 9 期
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2012.09.032
化活性有密切关系。
DPPH(1，1 － Diphenyl － 2 － picrylhydrazyl radical)通常
被用来检测抗氧化剂的抗氧化活性［3 － 6］。［DPPH·］是一
种稳定的有机自由基，它的稳定性主要来自共振稳定作用
及 3 个苯环的空间障碍，而使夹在其中氮原子上的不成对
电子不能发挥其应有的电子成对作用。［DPPH·］在
517nm 波长处有强吸收峰，溶液呈紫色，其浓度与吸光度呈
线性关系。当在溶液中有自由基清除剂存在时，清除剂提
供的质子会和［DPPH·］结合形成［DPPH· － H］或发生替
代，使［DPPH·］自由基数量减少，从而使溶液颜色由紫色
变为黄色，表现为在 517nm处的吸光度不断减小。借此可
以用来表征某种物质对自由基的清除能力。一般用 IC50
值来评价此物质抗氧化活性的大小。IC50 值越小，表示该
物质清除［DPPH·］性越强。本实验研究了黄花列当对
［DPPH·］自由基的清除作用，为其进一步深入研究利用
提供了一定的理论基础。
1 材料与仪器
1． 1 材料与试剂:黄花列当药材于 2010 年 3 月购自内蒙
古自治区中蒙医院蒙药房;自由基 DPPH(Sigma Aldrich 公
司生产) ;抗坏血酸(天津市科盟化工工贸有限公司) ;所用
溶剂均为分析纯。
1． 2 仪器与设备:OSB － 2100 型旋转蒸发仪(东京理化) ;
KQ3200DE型数控超声波清洗器〔昆山市超声仪器有限公
司) ;TU － 1901 双光束紫外可见分光光度计(北京普析通
用仪器有限责任公司) ;DGG －9070B型电热恒温鼓风干燥
箱;电子天平(YP5001N) ;分析天平(梅特勒 － 托利多
AL204) ;冻干机(基因有限公司)。
2 实验方法
2． 1 提取部位制备:干燥的黄花列当 4 kg 粉碎，70%乙醇
回流提取 2 次，合并药液，回收乙醇，得到 70%乙醇总提物
(hh4) ，浸膏加入适量水混悬，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃
取，回收溶剂，挥干，得乙酸乙酯部位(hh1)浸膏 146． 9g、正
丁醇部位(hh2)浸膏 185． 5g 和水(hh3)部位 420． 8g。4 部
位样品均取部分冷冻干燥，备用。
2． 2 溶液配制
2． 2． 1 ［DPPH·］溶液的配制:精确称取 DPPH 粉末 2． 0
mg，用乙醇溶解，定容，配成 0． 01mg·mL －1的 DPPH 无水
乙醇溶液，置于冰箱内在 4℃下避光保存，待用。
2． 2． 2 对照品 Vc 的配制:精确称取 Vc 粉末 2． 5mg，用乙
醇溶解后转移至 50ml 容量瓶内，定容，摇匀得质量浓度为
0． 05 mg·mL －1的 Vc对照品溶液;依次稀释为 0． 01 mg·
mL －1、0． 02 mg·mL －1、0． 03 mg·mL －1、0． 04 mg·mL －1、
0． 05 mg·mL －1的溶液;置于冰箱内在 4℃下避光保存，待
用。
2． 2． 3 样品溶液的配制:精密称取约 2． 5mg 的 hh1、hh2、
hh3 和 hh4 冻干粉末，分别用乙醇溶解后，配成 0． 05mg·
μmL －1的溶液;依次稀释为 0． 01mg·μmL －1、0． 02mg·
μmL －1、0． 03mg· μmL －1、0． 04mg· μmL －1、0． 05mg·
μmL －1的溶液;置于冰箱内在 4℃下保存，待用。
2． 3 清除［DPPH·］自由基能力的测定
2． 3． 1 对照品 Vc的测定:吸取无水乙醇 0． 1mL 与 4． 9mL
的［DPPH·］溶液(0． 01mgμmL －1)在试管中混合，摇匀后
迅速倒入石英吸收池中，以无水乙醇作空白，立即用紫外可
见分光光度计在 517nm处测定吸光度，此时的数据为 Aj。
依次吸取质量浓度为 0． 01 mg·mL －1、0． 02mg·
μmL －1、0． 03mg· μmL －1、0． 04mg· μmL －1 和 0． 05mg·
μmL －1的Vc对照品溶液0． 1ml分别与4． 9ml［DPPH·］溶液
(0． 01mg·μmL －1)在试管中混合，摇匀后迅速倒入石英吸
收池中。以 0． 1mLVc对照品溶液和 4． 9mL无水乙醇的混和
后作空白，立刻用紫外可见分光光度计在 517nm 处测定吸
光度，第 0、1、2、3、4、5min分别测一次吸光度(若每分钟吸光
度值改变不超过 0． 003个单位则停止测量) ，之后每隔 5min
测一次吸光度，直到 30min时结束，此时的数据为 Ai。
2． 3． 2 样品的测定:分别依次吸取质量浓度为 0． 01mg·
μmL －1、0． 02mg· μmL －1、0． 03mg· μmL －1、0． 04mg·
μmL －1和 0． 05mg·μmL －1的 hh1、hh2、hh3、hh4 样品溶液按
上述方法与 DPPH反应，并测定 Ai。
2． 3． 3 计算清除率:按公式计算对照品和各样品对［DPPH
·］自由基的清除率(I)。
I = ［1 － (Ai /Aj) ］× 100%
3 结果与讨论
以清除率(%)为纵坐标，样品溶液的质量浓度
(mgμmL －1)为横坐标，绘制标准曲线，根据标准曲线计算
IC50 (mgμmL －1)值。结果见图 1 和表 1。
图 1 弯管列当各提取部位对 DPPH·的清除能力
表 1 黄花列当各提取部位对 DPPH·的清除作用
组分 回归方程 RR2
IC50 值
(mg·omL －1)
对照品 Vc y = 714． 68x﹣ 1． 3172 0． 9999 0． 0718
乙酸乙酯部位 (hh1) y = 483． 9x﹢ 1． 765 0． 9971 0． 0997
正丁醇部位 (hh2) y = 393． 51x﹣ 0． 5097 0． 9990 0． 1284
水部位 (hh3) y = 100． 01x﹢ 4． 6189 0． 9587 0． 4538
70%乙醇总提物 (hh4)y = 289． 44x﹣ 0． 129 0． 9961 0． 1732
142012 年 9 月第 9 期 中国民族医药杂志
由图 1、表 1 可知，黄花列当 4 个组分对 DPPH·的清
除能力随各组分浓度的增大而增强。从回归方程得各组分
的 IC50 值(mgμmL －1)从小到大依次为:对照品 Vc (0．
0718) ＜乙酸乙酯部位(0． 0997) ＜正丁醇部位(0． 1284)
＜ 70%乙醇总提物(0． 1732) ＜水部位(0． 4538)。
以维生素 C作为对照品，结合［DPPH·］法评价黄花
列当提取物的抗氧化活性。实验结果表明黄花列当各萃取
组分都具有不同程度的抗氧化活性，其中乙酸乙酯部位的
清除［DPPH·］自由基活性最强，正丁醇部位也有较好的
清除［DPPH·］自由基活性，水部位的清除［DPPH·］自由
基能力较弱。这个结果初步证实传统药物黄花列当具有很
强的抗氧化活性，应用前景十分广阔，为蒙医临床提供了有
力证据。
参考文献
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北京:科学出版社，1990，69: 113 － 114．
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志，2008，15( 增) : 32 － 34．
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10 种中药清除 DPPH 能力考察［J］． 中国中药杂志，
2009，34( 13) : 1695 － 1700．
2012 年 7 月 30 日收稿
DPPH Free Radical Scavenging Activities of
Extracts from Orobanche pycnostachya
XU Guo － qin1 WANG Xiao － qin2＊ CUI Jia － ying2 LI Wan － qiang2
( 1． Inner Mongolia Health Cadre Education Training Center，Hohhot 010031 China;
2． Department of Pharmacy，Inner Mongolia Medical College，Hohhot 010110 China)
［Abstract］Objective:DPPH free radical scavenging activities of extracts from Orobanche pycnostachya were investigated． Meth-
ods:The dried and powdered plants of O． pycnostachya were extracted with 70% ethanol under reflux． The 70% ethanol extracts
was extracted successively with ethyl acetate and n － butanol． Abstract:The antioxidant activities of the 70% ethanol extract(hh4)
and the three fractions of ethyl acetate(hh1) ，n － butanol(hh2) ，and water(hh3)were tested using assays of the scavenging effects
on DPPH． Results:The IC50 values in DPPH test with the orders，Vc(0． 0718)＜ hh1(0． 0997)＜ hh2(0． 1284)＜ hh4(0． 1732)
＜ hh3(0． 4538)． The study showed that the ethyl acetate fraction has the strongest scavenging activity to DPPH free radicals． Con-
clusion:The extracts from O． pycnostachya showed some anti － oxidant，free radical scavenging activity．
［Key words］Orobanche pycnostachya;DPPH free radical scavenging activities
(上接 26 页)工作，进行系统研究难度极大。由于土家族只
有语言没有文字，在译成汉字汉语时难免准确无误;由于没
有土家文字，多数传承只是口耳相传，毒气病基础性的理论
都散在各流派名老土家医中，难于收集齐全而有遗漏;土家
医毒气病涉及临床各科，每个土家医在内、儿、妇、外、五官、
皮肤各科各有侧重，少数几个土家医都难于阐述完全，故土
家医毒气病学的形成是历代土家医集体智慧的结晶。
土家医毒气病学只是土家医学组成的一部分，它是土
家医药学的核心内容，由于本人水平有限，本项研究只起到
抛砖引玉作用，愿有志于土家医学研究的学者、土家医有识
之士、名老土家医给予斧正。
本项研究得到田华咏研究员、马伯元主任医师的指导，
得到田禹顺名老土家医的症名、药名、方名、土家语语译，张
远忠主任中医师对药物来源的审校，许许多多土家医提供
临床经验和药师提供药物，在此表示深深的谢意!
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