全 文 ：藏药材止泻木子质量标准研究
孙绪丁１，权富家２，任松鹏１，赵延霞１
（１．山东阿如拉药物研究开发有限公司，山东 济南２５０１０１；２．金诃藏药股份有限公司，青海 西宁８１０００３）
摘　要：目的：研究制定藏药材止泻木子的质量标准。方法：采用薄层色谱（ＴＬＣ）法定性鉴别止泻木子；
采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定锥丝碱含量，采用 Ｗａｔｅｒｓ　Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）色谱柱，柱温
为２５℃，甲醇－０．００５ｍｏｌ／Ｌ庚烷磺酸钠（６５∶３５，Ｖ／Ｖ），流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长为２１５ｎｍ。结
果：ＴＬＣ方法专属性强，特征斑点清晰；ＨＰＬＣ法测定大黄中锥丝碱含量的线性范围为０．１１６～
１．１６０ｍｇ／ｍＬ（ｒ＝０．９９９　４，ｎ＝５），平均加样回收率为９７．４３％，ＲＳＤ为１．１１％（ｎ＝６）。结论：建立藏药
材止泻木子的定性、定量分析方法简便易行，重现性好，准确度高，可有效控制药材质量。
关键词：止泻木子；薄层色谱法；高效液相色谱法；质量标准
中图分类号：Ｒ２５８　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１５）０８－００２０－０２
ＤＯＩ：１０．１１９５４／ｙｔｃｔｙｙ．２０１５０８０１０
收稿日期：２０１４－１２－２８
基金项目：济南市科技局“基于神经功能重建型中风后遗症中药新药的研发”（２０１３０１９）
作者简介：孙绪丁（１９８７－），男，山东阿如拉药物研究开发有限公司经理，研究方向为药品分析。
　　 近年来，随着藏药制剂的推广，止泻木子用量逐年增
大，现阶段质量标准难以满足药材质量控制要求，给临床安
全用药带来隐患。止泻木子为夹竹桃科植物止泻木（Ｈｏｌ－
ａｒｒｈｅｎａ　ａｎｔｉｄｙｓｅｎｔｅｒｉｃａ　Ｗａｌ．ｅｘ　Ａ．ＤＣ．）的干燥种子，果期
采集果实，取种子晒干。止泻木子具有清热、利胆、止泻的
作用，用于治疗赤巴病、肝胆病、胃肠热病、腹泻、痢疾等疾
病，用于十味黑冰片丸、十三味榜嘎散、复方酸藤消痔胶囊
等多个藏药制剂，应用较为广泛。藏药部颁标准中 ＷＳ３－
ＢＣ－００１４－９５号，无任何质量控制内容，不足以控制止泻木子
的质量，且文献未发现任何有关止泻木子的质量控制方法。
本研究建立薄层色谱鉴别和液相含量测定方法，稳定性、重
复性较好，且方法简便易行，专属性强，精密度、回收率较
高，为止泻木子质量标准的建立提供参考。现具体报道如
下。
１　仪器与试药
１．１　仪器
Ｌ－２１００型日立高效液相色谱仪（包括日立Ｌ－２１００泵，
日立Ｌ－２４００紫外检测器）；色谱柱：Ｗａｔｅｒｓ　Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×
４．６ｍｍ，５μｍ）。
岛津ＡＵＷ２２０Ｄ电子天平，ＫＱ－３００Ｂ超声波清洗器（昆
山市超声仪器有限公司）。
１．２　试药
止泻木子对照药材（批号：２０１１０５０１）、锥丝碱对照品
（批号：００００３７１１－０４８）；止泻木子（金诃藏药股份有限公司提
供，批号分别：２０１２０１０１、２０１２０１０２、２０１２０１０３）；薄层硅胶Ｇ
板（青岛海洋化工分厂）。
甲醇为色谱纯，超纯水，其他试剂均为分析纯。
２　方法与结果
２．１　ＴＬＣ鉴别
取本品２ｇ，加１％盐酸５０ｍＬ，超声处理１ｈ，过滤，滤液
加氨水调节ｐＨ至９～１０，用二氯甲烷萃取滤液３次，每次
２０ｍＬ，合并萃取液，蒸干（４０℃以下），加甲醇２ｍＬ溶解，过
滤，取续滤液作为供试品溶液。取止泻木子对照药材２ｇ，同
法制备对照品溶液，取锥丝碱对照品适量，加甲醇制备
０．１ｍｇ／ｍＬ锥丝碱对照品溶液。按薄层色谱法实验，吸取上
述溶液各５μＬ，分别点于硅胶Ｇ薄层板，以甲苯－乙酸乙酯
－二乙胺（６．５∶２．５∶１）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以
改良碘化铋钾试液，加热至显色清晰。在与对照品相应位
置上，供试品色谱显相同的荧光斑点。
图１　ＴＬＣ鉴别色谱
注：１．对照品溶液；２．对照药材溶液；３～５．三批供试品溶液，批号分别
为２０１２０１０１、２０１２０１０２、２０１２０１０３
２．２　ＨＰＬＣ法测定含量
２．２．１　波长选择　 取锥丝碱对照品溶液，于１９０～４００ｎｍ
波长范围内进行扫描，发现样品为末端紫外吸收，可选择
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２０５～２２０ｎｍ为检测波长。同时，考虑流动相为甲醇，其截
至波长为２０５ｎｍ，由于样品吸收峰不能过小，选定２１５ｎｍ为
检测波长。
２．２．２　色谱条件　 色谱柱：Ｗａｔｅｒｓ　Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×４．６
ｍｍ，５μｍ），流动相为甲醇－０．００５ｍｏｌ／Ｌ庚烷磺酸钠（６５∶
３５），检测波长为２１５ｎｍ，柱温为２５℃，流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ，
进样量为１０μＬ。
２．２．３　对照品溶液制备　 取锥丝碱对照品适量，精密称
量，加甲醇制备０．１ｍｇ／ｍＬ锥丝碱对照品溶液。
２．２．４　供试品溶液制备　 取本品粉末１ｇ，精密称量，置
具塞锥形瓶，精密加入甲醇５０ｍＬ，密塞，称定重量，超声处
理（功率为１２０Ｗ，频率为４０ｋＨｚ）３０ｍｉｎ，放冷，再称定重量，
加甲醇补充减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
２．２．５　系统适用性试验与阴性干扰试验　 在“２．２．２”项
色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各
１０μＬ，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，供试品色
谱中锥丝碱峰与其相邻色谱峰分离度均大于１．５，可用于止
泻木子含量的测定。见图２。
图２　ＨＰＬＣ色谱
２．２．６　线性关系考察　 精密量取锥丝碱对照品贮备液
溶液（锥丝碱含量为１．１６ｍｇ／ｍＬ）１．０、３．０、５．０、８．０、
１０．０ｍＬ，分别置１０ｍＬ容量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，精密
进样１０μＬ。以峰面积（Ａ）对溶液浓度（Ｃ）进行线性回归，得
回归方程：Ｙ＝３０８．２Ｘ－８．１３６，Ｒ＝０．９９９　４。结果表明：锥
丝碱在０．１１６～１．１６０ｍｇ／ｍＬ范围内，色谱峰峰面积（Ａ）与
对照品浓度（Ｃ）线性关系良好。
２．２．７　精密度试验　 精密吸取锥丝碱对照品溶液１０μＬ，
注入液相色谱仪，各连续测定６次，记录峰面积并计算相对
标准偏差，ＲＳＤ％＝０．１５２％（ｎ＝６）。结果表明，仪器精密
度良好。
２．２．８　稳定性试验　 精密吸取供试品溶液１０μＬ，分别于
０、４、８、１２、２４ｈ注入液相色谱仪，记录峰面积并计算峰面积
相对标准偏差，ＲＳＤ％＝０．１８９％（ｎ＝５）。结果表明，供试
品溶液中锥丝碱在２４ｈ内测定结果稳定。
２．２．９　重复性试验　 取同一批止泻木子样品（批号：
２０１２０１０１）６份，制备供试品溶液，精密吸取１０μＬ，注入液相
色谱仪进行测定，计算得出样品中锥丝碱含量为０．４６％，相
对标准偏差ＲＳＤ％＝０．５７９％（ｎ＝６）。结果表明，该分析方
法重复性良好。
２．２．１０　加样回收率试验　 精密称取已知含量的同一批
样品（批号：２０１２０１０１，含量为０．４６％）０．５ｇ，共６份，分别置
于具塞锥形瓶中，均精密加入２５ｍＬ锥丝碱对照品溶液（含
量为１．１６ｍｇ／ｍＬ）和甲醇２５ｍＬ，按“２．２．４”项方法制备供
试品溶液，按“２．２．２”项色谱条件进行测定，分别精密吸取
对照品溶液、供试品溶液各１０μＬ，注入液相色谱仪测定，以
外标法方程计算含量，并计算回收率。结果显示：供试品中
锥丝碱平均加样回收率为９７．４３％，ＲＳＤ为１．１１％（ｎ＝６），
该方法测定结果准确。
２．２．１１　样品含量测定　 按“２．２．４”项所述方法制备的
三批 供 试 品 溶 液 （批 号 分 别 为 ２０１２０１０１、２０１２０１０２、
２０１２０１０３，每批３份）。按“２．２．２”项色谱条件进行含量测
定，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各１０μＬ，注入液
相色谱仪，测定，根据外标法方程分别计算供试品中锥丝碱
的含量。见表１。
表１　止泻木子含量测定结果 （ｎ＝３）
批号 锥丝碱含量（％） 平均含量（％）
０．４６
２０１２０１０１　 ０．４５　 ０．４６
０．４６
０．４２
２０１２０１０２　 ０．４２　 ０．４２
０．４１
０．５１
２０１２０１０３　 ０．５２　 ０．５１
０．５０
３　讨论
随着藏药材止泻木子相关制剂十味黑冰片丸、十三味
榜嘎散、复方酸藤消痔胶囊的普及，其临床用量越来越大。
但目前尚无质量控制相关研究，制剂使用存在一定的安全
隐患，本文通过鉴别止泻木子中生物碱及测定锥丝碱含量
建立其质量控制标准。
本研究，除上述展开剂外，也可选择正己烷－乙酸乙酯
－甲醇－二乙胺（１０∶８∶２∶１）进行展开，效果相当。测定
锥丝碱含量研究中，使用简单流动相如甲醇－水、乙腈－水
或简单盐类均不能较好地分离止泻木子中锥丝碱，研究发
现离子流动相对后续效果改善明显，除庚烷磺酸钠洗脱外，
使用０．１％三氟乙酸也可达到良好的分析效果。
参考文献：
［１］　ＳＨＩＶＡＬＩ　ＧＡＲＧ，Ｋ　Ｋ　ＢＨＵＴＡＮＩ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ
ｏｆ　ｋｕｔａｊａｒｉｓｔａ　ａｙｕｒｖｅｄｉｃ　ｐｏｌｙｈｅｒｂａｌ　ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ．ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉ－
ｃａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍ　Ａｎａｌ，２００８（１９）：３２３－３２８．
［２］　阿古拉，乌兰巴特尔．敖勒盖热－１３味散质量标准研究［Ｊ］．中
国民族医药杂志，２０１３（８）：５３－５５．
［３］　吴香杰，金昌．蒙工止泻木的生药鉴定［Ｊ］．中国民族民间医
药杂志，２００１（２）：１１１－１１２．
（责任编辑：李岚春）
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