全 文 : 收稿日期:2006-10-15
作者简介:郭静谊(1983-),女 , 硕士生 ,从事资源植物学研究。
通讯作者:马 淼(1970-),男 , 副教授 ,博士 , 从事植物解剖及资源植物生态学研究。 e-mail:mamiaogg @126.com。
第 25卷 第 1期
2007年 2月
石河子大学学报(自然科学版)
Journal of Shihezi University(Natural Science) Vol.25 No.1Feb.2007
文章编号:1007-7383(2007)01-0009-03
不同产地大叶白麻叶片槲皮素与总黄酮含量的比较
郭静谊1 , 马 淼1, 2
(1 石河子大学生命科学学院 , 新疆石河子 832003;2 新疆特种植物药资源重点实验室 , 新疆石河子 832003)
摘要:大叶白麻是一种重要的中草药 ,其叶片槲皮素等黄酮类物质具有多重生理活性 ,在日本和我国新疆地区广为
利用 ,但对其有效成分空间差异的研究却鲜有报道 , 因此该资源的利用过程中存在一定的盲目性。本研究采集不
同产地处于花期的野生大叶白麻叶片 ,利用紫外可见分光光度法测定总黄酮含量 , 利用高效液相色谱法测定槲皮
素的含量。实验结果表明不同种群的大叶白麻叶片中槲皮素与总黄酮的含量均呈现显著的地理差异 , 槲皮素与总
黄酮含量最高的为新疆库尔勒种群 ,含量最低者为新疆阿克苏种群。建议在资源植物大叶白麻的开发与利用时 ,
既要考虑种群的数量优势 ,也应重视其种群间客观存在的品质差异。
关键词:大叶白麻;槲皮素;黄酮;空间差异
中图分类号:R284.0 文献标识码:A
大叶白麻(Poacynum pictum(Schrenk)Baill)是夹
竹桃科白麻属植物 ,由于叶中富含槲皮素等黄酮类
化合物 ,因此长期以来倍受学术界和商家的重视 ,在
我国和日本被作为传统药材[ 1] 。槲皮素是植物体内
的一种重要的黄酮类化合物[ 2 , 3] , 具有清除自由
基[ 4] ,降压[ 5] ,抑制肿瘤细胞增殖[ 6] ,以及保肝 、消
炎 、利湿等多种功效[ 7] 。其叶片可作茶泡水 ,是深受
当地居民喜爱的保健饮品[ 8] 。
植物次生代谢产物的合成既受遗传因素的制
约 ,同时也会受到环境条件的影响 。因此 ,不同地理
种群材料在次生代谢产物含量上有可能存在较大差
异[ 9] 。然而 ,在大叶白麻的采收 、加工及利用过程
中 ,人们一直未考虑其活性成分含量及药效的差异 ,
因此本试验采集了大叶白麻主产区 5个不同产地的
样品 ,测定其叶片中槲皮素与总黄酮含量 ,并以此为
依据评判大叶白麻的质量 ,为该资源的合理开发利
用提供理论依据 。
1 材料与方法
1.1 实验材料
2004年 7月采集处于盛花期的生长健康 、株龄
近似的大叶白麻植株相同部位的完全展开叶 ,每个
种群随机采集 30株植物的叶片 ,相邻植株间距离大
于 20m 以避免无性克隆株间的重复取样 ,样品混合
后在冷冻条件下迅速带回实验室 ,置于 70℃烘箱中
烘干至恒重 ,样品产地见表 1。
表 1 试验样品及其产地
样品名 编号 产地
大叶白麻
(Poacynum pictum)
B-1 新疆阿克苏
B-2 新疆石河子
B-3 新疆尉犁
B-4 新疆库尔勒
B-5 甘肃金塔
1.2 仪器与试剂
中药粉碎机 ,索氏提取器 ,蒸馏装置 ,Waters高
效液相色谱仪(with Waters 2487 DualλAbsorbance De-
tector),紫外可见分光光度计(上海棱光技术有限公
司 ,Spectrumlab 54),槲皮素标准品(购于 Sigma 公
司),没食子酸标准品(购于 Sigma公司), Folin-Cio-
calteu s试剂(购于Sigma公司),甲醇(色谱纯),磷酸
(色谱纯),乙醇(分析纯),盐酸(分析纯)。
1.3 实验方法
1.3.1 黄酮类化合物的提取
将烘干至恒重的样品用中药粉碎机粉碎成粉
末 ,过筛 ,准确称取1.00g ,用150mL甲醇加 5滴浓盐
酸溶液为提取剂在索氏提取器中于 95℃的水浴加
DOI :10.13880/j.cnki .65-1174/n.2007.01.003
热条件下提取 6h ,蒸馏浓缩至 25mL左右 ,将浓缩液
转入 50mL 容量瓶中 ,用甲醇充分洗涤烧瓶3次并将
洗液一并转入容量瓶中 ,待溶液冷却至室温后用甲
醇定容至 50mL ,置于 4℃冰箱中备用 。
1.3.2 槲皮素标准曲线的绘制
色谱条件:色谱柱 Zorbax SD-C18 , 4.6mm ×
150mm;λ=370nm;缓冲液为 4.0g/L 的磷酸溶液;流
动相为甲醇∶磷酸=60∶40;进样量为 20μL;流速为
1mL/min;柱温为 35℃。
精确称取槲皮素标准品 32.52mg ,准确定容至
50mL ,取 10mL 溶液稀释至 50mL ,分别取 3μL , 5μL ,
10μL ,15μL , 20μL 进样 ,以浓度 C(mg/mL)对峰面积
A进行线性回归[ 9] ,得回归方程 C =1.249A ×10-7
-0.100 , r=0.9999 ,槲皮素含量在5 ~ 150mg/g范围
内线性关系良好 。
1.3.3 总黄酮标准曲线的绘制
以没食子酸作对照品 , 配制含 2%的没食子酸
溶液 100mL ,分别吸取 20 、40 、60 、80 、100 、120 、140 、
160 、180 、200 、220 、240μL 原液于试管中 , 分别加
1980 、1960 、1940 、1920 、1900 、1880 、1860 、1840 、1820 、
1800 、1780 、1760μL 蒸馏水 , 再加 2mL 1mol/L Folin-
Ciocalteu s试剂和 4mL 10 %Na2CO3溶液混合 ,静置
15min后离心 2min(12000r/min),取上清液 ,用紫外
可见分光光度计 765nm 处测定吸光度 ,以体积为横
坐标 ,吸光度为纵坐标绘制标准曲线[ 9] 。回归方程:
Y =0.0032 X -0.0662(X 表示体积 , Y 表示吸光
度), r=0.98 ,在 4 ~ 48mg/g 范围内呈现良好的线性
关系。
1.3.4 槲皮素含量的测定
取经高速离心 10min(12000r/min)的提取液经
微孔滤膜( =0.45)过滤 ,在 HPLC稳定条件下测定
各样品中目标峰的峰面积 ,记录数据 ,每样品重复进
样 6针 ,计算平均值 。
1.3.5 提取物中总黄酮含量的测定
用微量进样枪准确吸取 30μL 提取液移入 5mL
离心管中 ,加入 970μL无水乙醇 、1mL Folin-Ciocalteu
s 试剂 、2mL 10%Na2CO3 , 静置 15min , 离心 2min
(12000r/min),取上清液 ,在波长为 765nm 处测其吸
光度[ 9] 。
2 结果与讨论
实验结果表明不同种群的大叶白麻材料中槲皮
素与总黄酮的含量均呈现显著的地理差异(图 1 ,图
2)。
图 1 不同样品中黄酮含量差异 图 2 不同样品中槲皮素含量
由图 1和图 2可以看出 ,槲皮素含量最高的是
新疆库尔勒种群 ,其含量为 65.859mg/g ,含量最低
的是甘肃金塔种群 ,其槲皮素含量仅为 3.512mg/g 。
总黄酮含量最高的是新疆库尔勒种群与尉犁种群 ,
其叶片中总黄酮含量高达 78.896mg/g ,含量最低的
是新疆阿克苏种群 ,其含量仅为37.047mg/g 。
石河子种群中其叶片槲皮素含量占总黄酮含量
的76.6%,库尔勒种群中其叶片槲皮素含量高达总
黄酮含量的 83.5%,由此可以看出槲皮素是大叶白
麻叶片中黄酮类化合物的一个非常重要的组分 。
库尔勒产大叶白麻叶片中槲皮素与总黄酮含量
都显著地高于其他产地的材料;相反 ,阿克苏产大叶
白麻叶片中槲皮素与总黄酮含量则明显地低于其他
产地材料 ,前者槲皮素与总黄酮含量分别是后者的
18.8倍与 2.1倍。
董正均在详实的野外资源调查之后将阿克苏和
尉犁地区确定为大叶白麻的主产区[ 10] ,由于资源分
布相对集中 ,所以随后的大叶白麻资源开发工作基
10 石河子大学学报(自然科学版) 第 25卷
本上集中在这两个区域 。然而 ,本研究结果显示资
源数量占优势的阿克苏地区 ,其大叶白麻的品质却
远不如库尔勒种群与尉犁种群 ,且以库尔勒产大叶
白麻品质最优。大叶白麻叶片活性成分在不同地理
种群之间显示出的含量差异有可能是缘于种群间的
遗传差异 ,亦有可能是由于受不同环境因子的影响
而表现出的环境饰变 ,尚有待于进一步研究。
3 结论
1)在资源植物大叶白麻的开发与利用时 ,既要
考虑种群的数量优势 ,也应重视其种群间客观存在
的品质差异。
2)建议用于总黄酮提取的最佳大叶白麻材料为
库尔勒种群和尉犁种群 ,而用于槲皮素提取的最佳
大叶白麻材料为库尔勒种群。
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Spatial Variation in Content of Quercetin and Total Flavonoids
of Poacynum Hendersonii
GUO Jing-yi1 , MA Miao1 , 2
(1 College of Life Sciences , Shihezi University , Shihezi , Xinjiang 832003 , China.
2 Key Laboratory of Phytomedicine Resources &Mordenization of TCM , Shihezi University , Shihezi , Xinjiang 832003 , China)
Abstract:Poacynum hendersohnii (Hook.f.)Woodson has been used for traditional herbal medicine in Japan and Xin-
jiang ,China for a long time since there is quercetin and other flavonoids in its leaves.Although there were many research-
es about its pharmaceutic effects , little was known about the difference in content of quercetin and total flavonoids of P .
hendersonii among different populations.So the aim of this study was to evaluate the quality difference of the traditional
herbal medicine from different geographical populations.Results showed that there was significant difference in quality of
the traditional remedy among the populations , and the optimal population was Kuerle in Xinjiang province with highest
content of both quercetin and total flavonoids.It was suggested that both quantity and quality of Poacynum pictum should
be taken into account when the resources plant was utilized.
Key words:Poacynum hendersonii ;quercetin ;flavonoid ;spatial difference
11第 1 期 郭静谊 , 等:不同产地大叶白麻叶片槲皮素与总黄酮含量的比较