全 文 ：中国药房 2010年第21卷第27期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 27
土牛膝，别名倒扣草，2005年版《中国药典》（一部）对土牛
膝记载：药性为苦、凉；归肺、脾、肝、膀胱经；药效为败毒抗癌、
逐瘀除痹、消炎利尿。铅（Pb）和镉（Cd）是对人体健康有害的
重金属，Pb过量会使人免疫力降低、寿命缩短；Cd过量是损害
骨骼的慢性疾病。微量元素含量不仅受中药材遗传特性的控
制，也与不同栽培地区的环境因子密切相关。近年大量研究[1]
没有明确“原产地”中药材金属元素的含量，而国际市场的植
物药贸易要求提供可靠和丰富的“原产地”信息 [2]。对“原产
地”中药材金属元素含量的测定不仅可以丰富中药材的“原产
地”特征信息，还可为阐明中药的作用机制提供一定的基础。
因此，研究测定中药材金属元素含量的可靠方法，提供准确的
“原产地”中药材金属元素含量数据，具有一定的理论和实际
应用价值[3] 。
1 仪器与试药
WFX- 130A型原子吸收分光光度计（北京瑞利分析仪器
公司）；WF- 1E型石墨炉电源（北京瑞利分析仪器公司）；Pb、
Cd空心阴极灯（日本岛津公司）；AY- 220型电子天平（日本岛
津公司）；JRY- X350型消解器（湖南金蓉园仪器设备有限
公司）；SZ- 93型自动三重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪
器厂）。
Pb标准贮备液 1 000 µg·mL- 1、Cd标准贮备液 1 000 µg·
mL- 1（国家标准物质中心）；土牛膝样品分别采于长沙郊区、郴
州郊区、北京郊区、成都郊区，经湘南学院化学与生命科学系
魏得良研究员鉴定为真品；硝酸、高氯酸为优级纯，其余试剂
均为分析纯，试验用水为三次蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 仪器条件
仪器工作条件见表1；石墨炉升温程序见表2。
表1 仪器的工作条件
Tab 1 Operational conditions of detector
元素
Pb
Cd
波长/nm
283.3
228.8
光谱带宽/nm
0.7
0.7
灯电流/mA
5
3
负高压/V
254.0
288.2
扣背景氘灯
是
是
计算方式
峰高
峰高
2.2 样品采集与预处理
本试验所用样品为长沙产土牛膝、郴州产土牛膝、北京产
土牛膝和成都产土牛膝的根，均为野生土牛膝，将其茎叶去除
留下根，洗净，晒干，剪碎，置于干燥箱中85℃干燥至恒重，用
硝酸浸泡过的干净研钵碾碎，过40目筛。
2.3 样品消解
试样的前处理是确保分析结果准确可靠的条件，由于中
石墨炉原子吸收分光光度法测定不同产地土牛膝中铅、镉的含量Δ
马文杰 1＊，黄志红 2，刘 伟 2，黄秀英 2，魏得良 2 #（1.湘南学院附一医院/郴州市第一人民医院，郴州市 423000；
2.湘南学院化学与生命科学系，郴州市 423000）
中图分类号 R282.1；R927.2 文献标识码 A 文章编号 1001- 0408（2010）27- 2541- 03
摘 要 目的：建立测定不同产地土牛膝中铅、镉含量的方法。方法：采用石墨炉原子吸收光谱法。结果：标样中铅、镉的浓度与
吸光度各呈良好的线性关系。其中铅的线性范围为0～80.00 μg·L- 1（r＝0.999 6），相对标准偏差（n＝10）为0～5.00％，加标回收率
为 95％～101％；镉的线性范围为 0～7.000 μg·L- 1（r＝0.998 2），相对标准偏差（n＝10）为 1.00％～5.00％，加标回收率为 98％～
103％。结论：本法简单易行、方便快捷、灵敏度和精密度高、选择性好，结果令人满意。
关键词 石墨炉原子吸收光谱法；土牛膝；铅；镉；含量；产地
Content Determination of Lead and Cadmium in Achyranthes bidentata form Different Habitats by Graphite
Furnace Atomic Absorption Spectrometry
MA Wen-jie（The First Affiliated Hospital of Xiangnan University，Chenzhou Municipal First People’s Hospital，
Chenzhou 423000，China）
HUANG Zhi-hong，LIU Wei，HUANG Xiu-ying，WEI De-liang（Dept. of Chemistry and Life Science，Xiangnan
University，Chenzhou 423000，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the methods for content determination of lead and cadmium in Achyranthes bidentata from
different habitats. METHODS：Graphite furnace atomic absorption spectrometry was applied. RESULTS：There were a good linear rela-
tionship between the concentration and absorbance of lead and cadmium. The linear range of lead were 0～80.00 μg·L- 1（r＝0.999 6）
with recovery of 95％～101％（RSD ranged from 0％ to 5.00％，n＝10）. The linear range of cadmium were 0～7.000 μg·L- 1（r＝0.998
2）with recovery of 98％～103％（RSD ranged from 1.00％ to 5.00％，n＝10）. CONCLUSION：The method is simple，accurate，con-
venient and sensitive and the results are satisfactory.
KEY WORDS Graphite furnace atomic absorption spectrometry；Achyranthes bidentata；Lead；Cadmium；Content；Habitats
Δ湖南省科技计划项目（06FJ4099）
＊副主任医师。研究方向：老年病。E- mail：czmawenjie@163.
com
＃通讯作者：研究员。研究方向：分析化学的教学与科研。电话：
0735- 2653211。E- mail：weideliang22@sohu.com
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China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 27 中国药房 2010年第21卷第27期
药材样品具有复杂、结构各异的特点，现在多采用消化法进行
处理。中药中主要成分为碳水化合物，因而可用酸氧化分解，
经消化处理后微量元素均以离子存在，可以比较全面地进行
测定[4]。
本试验采用湿法消解（化）土牛膝样品，即：精确称取 4个
不同产地的已过 40目筛的样品粉末各 1.000 g，分别置于贴好
标签的50 mL消解管中，各加入10 mL混合酸（硝酸 ∶高氯酸＝
4 ∶ 1），混匀，浸泡过夜。同法制备2份空白溶液。样品液与空
白液同时置于消解器上加热消解。保持微沸，若变棕黑色则
再加入混合酸适量，持续加热至溶液澄明后，升高温度，继续
加热至冒白烟，直至无白烟[5]。最后得到无色透明的消解液，
冷却，转入50 mL容量瓶中，用2％的硝酸溶液洗涤容器，洗涤
液合并于容量瓶中，并用 2％的硝酸溶液稀释至刻度线，摇匀
即可，得到4个不同产地土牛膝的供试液。试验所用玻璃仪器
均经过2％的硝酸溶液浸泡、清洗。
2.4 校准曲线的制备
准确量取Pb、Cd标准贮备液（1 000 µg·mL- 1）适量，用硝
酸（1 ∶ 99）稀释配成含Pb、Cd均为 100 ng·mL- 1的溶液。分别
准确量取含Pb、Cd为100 ng·mL- 1的标准贮备液适量，用硝酸
（1 ∶ 99）稀释成分别含 Pb、Cd 0、20.00、40.00、60.00、80.00 ng·
mL- 1，0、1.00、3.00、5.00、7.00 ng·mL- 1的溶液，用自动进样器精
密吸取 20 µL Pb、Cd标准工作溶液，按所选的仪器工作条件、
石墨炉升温程序依次进样，分别测定吸光度，仪器自动制备标
准曲线。结果，Pb、Cd的浓度（C）分别在 0～80.00、0～7.00
ng·mL- 1范围内与吸光度（A）呈良好线性关系，线性回归方程
分别为A＝0.003 5C+0.007 4（r＝0.999 6）、A＝0.020 1C+0.006
（r＝0.998 2）。
2.5 检出限试验
对已消化处理的空白溶液进行 20次重复测定，以空白信
号标准偏差的 3倍计算检出限，求得 Pb、Cd的检出限分别为
0.000 9、0.000 6 µg·mL- 1。
2.6 精密度试验
本试验采取重复性方法：按试验方案，对土牛膝样品溶液
连续进样 10次（即平行测定 10次）。结果，Pb、Cd的 4个样品
（长沙、郴州、北京、成都）精密度分别为2.42％、0.75％、1.71％、
3.11％，2.07％、4.15％、1.65％、1.26％。
2.7 回收率试验
配制高、中、低 3种浓度的加标混合样品。在选定的仪器
条件下，同法进行测定，计算回收率，结果见表3。
2.8 样品中Pb、Cd含量的测定
分别用自动进样器精密吸取20 µL Pb、Cd标准溶液、空白
溶液和供试液，依次按仪器工作条件测定吸光度，每个溶液测
10次，空白测20次，利用工作曲线，根据所测供试液的吸光度
得供试液浓度。再经换算得所测中药中Pb、Cd的含量[6]，结果
见表4。
表4 样品含量测定结果（n＝10）
Tab 4 Content determination of samples（n＝10）
样品
空白
长沙产
郴州产
北京产
成都产
Pb
吸光度
0.002 3
0.036 9
0.065 2
0.041 1
0.087 5
标准偏差
0.000 3
0.000 1
0.000 9
0.000 1
0.000 1
RSD
/％
4.20
2.42
0.75
3.11
1.71
Cd
含量
/μg·g- 1
- 0.003 2
0.291 2
0.356 5
0.314 4
0.185 7
吸光度
0.002 4
0.041 0
0.087 4
0.021 2
0.074 9
标准偏差
0.000 1
0.000 1
0.000 4
0.000 3
0.000 9
RSD
/％
4.16
2.07
4.15
1.65
1.26
含量
/μg·g- 1
- 0.001 1
0.236 5
0.386 5
0.178 7
0.225 6
3 讨论
经硝酸-高氯酸混酸（4 ∶ 1）消化、石墨炉原子吸收光谱法
测定4个不同产地土牛膝中Pb、Cd含量，加标回收率在95％～
105％，RSD在0.05％～5.00％之间。长沙、郴州、北京、成都产
土牛膝的Pb、Cd含量分别为 0.291 2、0.236 5 μg·g- 1，0.356 5、
0.385 6 μg·g- 1，0.314 4 、0.178 7 μg·g- 1，0.185 7、0.225 6 μg·
g- 1。方法简便可行，是研究中药材微量元素含量的有效方法。
4种样品中Pb的含量均符合药用植物中重金属含量标准，
Cd含量郴州产超标（Cd应＜0.3 mg·kg- 1）[7]。不同地区的土牛
膝样品中Pb、Cd含量不尽相同，主要是生长环境不同，但影响
其Pb、Cd含量有差异的具体因素还有待进一步研究。
样品采集和处理极大地影响分析结果的准确性，规范地
采集和处理是研究成功的保证。文献报道中药不同部位的微
量元素含量不尽相同，由于土牛膝作为一种中药材，主要以其
根入药，因此本文取其根来进行研究，具有一定的实际意义。
参考文献
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量元素与健康研究，2002，19（4）：68.
[ 2 ] 阎汝南，王静竹，刘舒平，等.不同产地的黄芪微量的测定
与研究[J].广东微量元素科学，1998，5（9）：54.
[ 3 ] 薛国庆，刘 青，任雪蜂，等.火焰原子吸收光谱法测定锁
表 2 测定Pb、Cd的石墨炉升温程序
Tab 2 Graphite furnace temperature programming for co-
ntent determination of lead and cadmium
阶段
1干燥
2干燥
3灰化
4灰化
5原子化
6冲洗
Pb
温度/℃
30
120
400
800
2 400
2 600
时间/s
20
25
25
7
4
6
Cd
温度/℃
30
100
300
700
1 900
2 600
时间/s
20
20
20
7
4
6
表3 回收率试验结果
Tab 3 Results of recovery experiment
样品
长沙产
郴州产
北京产
成都产
Pb
加入量
/μg
0
1.0
1.5
2.0
0
1.0
1.5
2.0
0
1.0
1.5
2.0
0
1.0
1.5
2.0
测定值
/μg
0.029 1
0.985 1
1.488 6
1.969 1
0.035 6
1.022 6
1.483 1
1.975 6
0.031 4
1.081 5
1.486 4
2.111 4
0.018 5
1.016 5
1.487 4
1.976 6
回收率
/％
95.60
97.30
97.00
98.70
96.50
97.00
98.50
98.70
100.10
100.10
100.40
99.50
x
/％
96.63
97.40
99.10
100.40
Cd
加入量
/μg
0
1.0
1.5
2.0
0
1.0
1.5
2.0
0
1.0
1.5
2.0
0
1.0
1.5
2.0
测定值
/μg
0.023 6
1.013 6
1.604 6
2.065 6
0.038 5
1.050 8
1.559 5
2.018 6
0.017 8
1.156 7
1.603 8
2.037 8
0.185 7
1.016 4
1.487 3
1.976 6
回收率
/％
99.00
104.90
103.70
96.50
96.70
98.60
100.20
99.60
100.60
100.60
99.70
99.20
x
/％
102.50
97.30
100.10
99.80
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中国药房 2010年第21卷第27期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 27
阳中15种金属元素含量[J].光谱学与光谱分析，2004，24
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含量测定[J].中国药房，2007，18（21）：1 641.
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东微量元素科学，2001，8（12）：44.
（收稿日期：2009- 08- 06 修回日期：2010- 03- 21）
广金钱草及其制剂的HPLC指纹图谱研究Δ
姬生国＊，郭念欣，李颖春，王 东#（广东药学院中药学院，广州市 510006）
中图分类号 R284.1；R283 文献标识码 A 文章编号 1001- 0408（2010）27- 2543- 03
摘 要 目的：建立广金钱草及其制剂的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，为其质量评价提供依据。方法：色谱柱为迪马ODS- C18
（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇- 2％磷酸溶液（梯度洗脱），流速为1.0 mL·min- 1，柱温为25℃，检测波长为360 nm，记录
广金钱草及其制剂的HPLC指纹图谱。结果：广金钱草药材和制剂均有13个共有峰，多数峰可以达到较好分离。结论：本方法具
有良好的精密度、稳定性和重复性，建立的指纹图谱检测标准可以作为广金钱草及其制剂质量评价的主要依据之一。
关键词 广金钱草；指纹图谱；反相高效液相色谱法
Study on HPLC Fingerprint of Desmodium styracifolium and Its Preparations
JI Sheng-guo，GUO Nian-xin，LI Ying-chun，WANG Dong（School of Traditional Chinese Medicine，Guang-
dong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish RP- HPLC fingerprints of Desmodium styracifolium and its preparations in order to pro-
vide basis for the quality evaluation of them. METHODS：The separation was performed on ODS- C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）
column with mobile phase consisted of methanol- 20％ phosphoric acid（gradient elution）. The detection wavelength was set at 360
nm and flow rate was 1.0 mL·min- 1. Column temperature was set at 25 ℃. The RP- HPLC fingerprint of D. styracifolium and its
preparations were recorded. RESULTS：There were 13 common peak in RP- HPLC fingerprint of D. styracifolium and its prepara-
tions. CONCLUSION：The method is accurate，stable and reproducible for basis of quality evaluation and RP- HPLC finger print
of D. styracifolium and its preparations.
KEY WORDS Desmodium styracifolium；Fingerprint；RP- HPLC
Δ广东省科技产业技术研究与开发资金项目（2009B030801044）；
广东药学院引进人才科研基金（启动）项目（2007ZYX10）
＊副教授，博士。研究方向：中药资源、中药质量标准及中药新
药。电话：020- 39352327。E- mail：shengguo_ji@yahoo.cn
# 通讯作者：副教授，硕士。研究方向：中药质量分析。电话：
020- 39352181。E- mail：jsgwdxy@126.com
􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌
广金钱草别名落地金钱草、假花生、山地豆，来源于豆科
植物广金钱草Desmodium styracifolium（Osb.）Merr.的干燥地
上部分，主产于广东、广西、福建等东南沿海等地。广金钱草
始载于《岭南草药志》，载为蝶形花科山绿豆属的一种灌木，
并附文考证：“现代缪永祺谓金钱草（两广地区称广金钱草），
治疗膀胱结石甚为奇效”[1]。其主要功效为清热除湿、利尿通
淋，用于治疗热淋、砂淋、石淋、小便涩痛、水肿尿少、黄疸、尿
赤、尿路结石。以广金钱草为主药的中成药品种很多，如石
淋通片等。本文拟通过对广金钱草及其制剂石淋通片的高
效液相色谱（HPLC）指纹图谱 [2，3]的研究，建立其质量控制依
据。
1 材料
1.1 仪器
LC2000型 HPLC仪（上海天美科学仪器有限公司）；
Bp211- D型电子天平（德国赛多利斯公司）；KP3200型超声波
清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；HH6型数显电子恒温
水浴锅（江苏金坛市宏华仪器厂）。
1.2 试药
所用试剂除流动相为色谱纯外其余均为分析纯；试验所
用 2批药材样品分别采集于广东省德庆市和广东药学院药用
植物园，其余药材及制剂分别购自广东省各大药店和医院，具
体信息见表 1。所有药材均经笔者鉴定为豆科蚂蝗属植物广
金钱草D. styracifolium（Osh.）Merr.的干燥地上部分。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：迪马ODS- C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：
甲醇- 0.2％磷酸溶液，梯度洗脱（0→60 min，甲醇体积百分比
32％→40％）；流速：1.0 mL·min- 1；柱温：25℃；检测波长：360
nm；进样量：10 μL。
2.2 供试品溶液的制备
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