全 文 ：不同电荷自乳化递药系统对细梗香草皂苷B小肠吸收
的研究
陈威宇1，钱亚芳2，谷满仓1*，李南奇1
（1浙江中医药大学药学院，杭州 310053；2浙江省中医院，杭州 310006）
摘 要：目的：研究不同电荷自乳化递药系统对细梗香草皂苷B（CAPB）小肠吸收的影响。方法：分别
制备CAPB的正电荷自乳化递药系统（PO-SEDDS）与负电荷自乳化递药系统（NE-SEDDS），评价其乳
粒粒径、Zeta电位和自乳化时间，采用大鼠在体单向肠灌流模型考察CAPB以及两种自乳化递药系统的
有效肠渗透速率Peff。结果：CAPB-PO-SEDDS与CAPB-NE-SEDDS的乳粒粒径、Zeta电位和自乳化时
间分别为在57.14±6.11 nm vs 56.80±4.72 nm，16.77±4.59 mV vs -3.52±0.31 mV，23±12.1 s vs 27±10.6 s，
CAPB在pH=6.55的肠灌流液中能保持稳定，CAPB-PO-SEDDS的Peff为3.73±0.62×105 cm/s，显著高于
CAPB-NE-SEDDS（Peff= 2.72±0.42×105 cm/s）以及CAPB溶液（Peff=1.08±0.72×105 cm/s）。结论：正电
荷自乳化递药系统与负电荷自乳化递药系统以及药物溶液相比，即能保持自乳化性能，又能明显促进
CAPB的小肠吸收。
关键词：细梗香草皂苷B；高效液相；大鼠在体肠灌流模型；自乳化递药系统
中图分类号：R285 文献标识码：A 文章编号：1001-7119（2015）11-0110-04
Study on the Effect of Differenet Charge of Self Emulsifying Drug Delivery
Systems on Capilliposide B in Intestinal Absorption
Chen Weiyu1，Qian Yafang2，Gu Mancang1*，Li Nanqi1
（1.College of Pharmacy，Zhejiang Chinese Medicine University，Hangzhou 310053，China；
2.Zhejiang Hospital of Traditional Chinese Medicine，Hangzhou 310006，China）
Abstract：Object：To study the effect of self-emulsifying drug delivery systems with different charge on
capilliposide B (CAPB) in the small intestine absorption. Method：CAPB self-emulsifying drug delivery
system with positive charge (PO-SEDDS) and the self-emulsifying drug delivery system with negative
charge (NE-SEDDS) were prepared respectively. The emulsion particle size, Zeta potential and self-
emulsifying time were evaluated. The in situ rat single pass intestinal perfusion model was employed to
study the effective intestinal penetration rate (Peff) after administrating PO-SEDDS, NE-SEDDS and
solution of CAPB. Result：The emulsion particle size, Zeta potential and self-emulsifying time of CAPB-
PO-SEDDS and CAPB-NE-SEDDS are 57.14 ±6.11 nm vs 56.80 ±4.72 nm, 16.77 ± 4.59 mV vs -3.52
± 0.31 mV, 23 ± 12.1 s vs 27 ± 10.6 s, respectively. CAPB remains stable in pH=6.55 intestinal
收稿日期：2015-03-04
基金项目：国家自然科学基金青年基金项目（No. 81303235）；教育部高等学校博士学科点专项科研基
金项目（No. 20113322120001）；浙江省自然科学基金青年基金项目（No. LQ12H29002）；浙江
省重点科技创新团队项目（2012R10044_07）；浙江省医药卫生科技项目（No. 2011KYA119）。
作者简介：陈威宇（1994-），男，主要研究方向为中药口服新剂型，E-mail：18858269424@163.com。
*通讯作者：谷满仓（1980-），男，中药学博士，副教授，主要研究方向为新型中药抗递药系统的构建及作
用机理。E-mail：gmancang@zcmu.edu.cn。
第31卷第11期
2015年11月
科 技 通 报
BULLETIN OF SCIENCE AND TECHNOLOGY
Vol.31 No.11
Nov. 2015
DOI:10.13774/j.cnki.kjtb.2015.11.022
第11期
perfusion in solution. The Peff of CAPB-PO-SEDDS (3.73±0.62×105cm/s) is significantly higher than
that of CAPB-NE-SEDDS (2.72±0.42×105 cm/s) and CAPB solution (1.08±0.72×105 cm/s). Conclusion：
the positive charge self- emulsifying drug delivery system can not only keep the self- emulsifying
properties, but also promote the intestinal absorption of CAPB obviously, which is compared with the
negative charge of self-emulsifying drug delivery system and the drug solution.
Keywords：capilliposide B；HPLC；in situ rat single pass intestinal perfusion model；self-emulsifying drug
delivery system
细梗香草（Lysimachia capillipes Hemsl.）又名
满山香、香排草，为报春花科珍珠菜属植物。研
究表明其中的细梗香草皂苷B（CAPB）具有很强
的体内外抗肿瘤活性 [1]。但其在水中溶解度较
小，导致药物在胃肠道吸收差、生物利用度低。
自乳化释药系统（SEDDS）是由油相、乳化剂和助
乳化剂形成均一的透明药液，在胃肠道或环境温
度37℃温和搅拌的情况下，能自发乳化形成粒径
在 100~500 nm的胶束 [2，3]。为提高 CAPB口服生
物利用度，本研究将CAPB制成不同电荷的自乳
化递药系统，并通过在体大鼠单向肠灌流模型研
究两种自乳化递药系统对CAPB在小肠吸收的影
响，并以两者的粒径分布，Zata电位，自乳化时间
为指标进行体外评价。
1 材料
1.1 仪器
Agilent1200型高效液相色谱仪；ELSD-3500
检测器（格雷斯公司）；紫外可见分光光度计（尤
尼柯公司）；分析天平（奥豪斯仪器上海有限公
司）；超声波清洗器（杭州法兰特超声波科技有限
公司）；超纯水系统（美国密理博公司）。
1.2 试剂与药品
细梗香草皂苷B对照品（capilliposide B，简称
CAPB，含量>95.0%，批号201401001，浙江中医药
大学杨波老师提供）；酚红（上海源叶生物科技有
限公司）；Labrasol、Transcutol HP（法国嘉法狮公
司）、Cormphor RH40（都莱生物）、GTCC（浙江物
美化学品公司）。Kreb-Ringers营养液（简称K-
R液，每 1000 mL内含 NaCl 7.80 g、KCl 0.35 g、
NaH2PO4 0.32g、NaHCO3 1.37 g、MgCl2 0.02 g、葡萄
糖1.40 g、CaCl2 0.37 g）；戊巴比妥钠（纯度≥99%，
达文生物进口分装）；生理盐水（浙江都邦药业股
份有限公司）；色谱纯甲醇、乙腈；其他试剂均为
分析纯。
1.3 动物
SD大鼠，雌雄各半，清洁级，体重（280±30）g
（浙江中医药大学动物实验中心，合格证号SYXK
（浙）2012-0002）。
2 方法
2.1 不同电荷CAPB自乳化递药系统的制备
2.1.1负电荷自乳化递药系统（NE-SEDDS）
准 确 量 取 GTCC 0.37g、Cormphor RH40
1.02 g、Labrasol 0.93 g和 Transcutol HP 1.67 g混
匀，加入CAPB 80 mg，置于 45℃水浴搅拌均匀直
至形成均一透明液体。
2.1.2正电荷自乳化递药系统（PO-SEDDS）
在NE-SEDDS的基础上，加入 2%的油胺，混
匀，即得。
2.2 自乳化递药系统的体外评价
2.2.1乳粒粒径、Zeta电位[4]
取 2种CAPB-SEDDS适量（含细梗香草皂苷
B 约 20 mg），缓慢注入 37℃的 250 mL1×PBS中，
50 r/min搅拌至自乳化形成，用激光粒度 Zeta电
势测定仪测定微乳乳滴的粒径及Ztea电位。
2.2.2自乳化时间
取 2种CAPB-SEDDS适量（含细梗香草皂苷
B 约 20 mg），缓慢注入 37℃的 250 mL1×PBS中，
50 r/min搅拌，观察记录形成微乳所需要的时间。
2.3 CAPB肠灌流液含量测定方法
2.3.1色谱条件
色谱柱：Ultimate XB-C18，5 μm，4.6 × 250
mm；流动相：乙腈-0.3%乙酸（47:53）；流速：1 mL/
min；柱温：40 ℃；进样量 20 μL；ELSD漂移管温
度：100 ℃；气体流速：2.6 L/min；增益值：1；氮气
气压：0.45 MPa，进样20 μL。
2.3.2线性回归
陈威宇等. 不同电荷自乳化递药系统对细梗香草皂苷B小肠吸收的研究 111
第31卷科 技 通 报
精密移取混合对照品液适量，加空白K-R缓冲
液-乙腈(1∶1，v/v)的混合溶液定容，得到CAPB浓
度为 0.056、0.119、0.238、0.476、0.952 mg/mL的对
照品溶液。12000 r/min，离心 15 min，过 0.45 μm
微孔滤膜，进样20 μL，以峰面积的常用对数值为
纵坐标，以浓度的常用对数值为横坐标，进行线
性回归。
2.3.3精密度试验
取0.238 mg/mL CAPB对照品溶液，按上述色
谱条件重复进样6次，以峰面积计算RSD。
2.3.4重复性试验
精密量取肠灌流样品液1 mL平行6份，分别
用乙腈定容至 2 mL，过 0.45 μm微孔滤膜，进样
20 μL。并在第2、3日分别平行取6份，按如上操
作进样，分别计算日内、日间重复性。
2.3.5回收率试验
取空白肠灌流液-乙腈（1∶1，v/v）的混合溶液
配制低、中、高浓度的对照品溶液（含 CAPB
0.056、0.238、0.952 mg/mL），按上述色谱条件进样
检测，计算回收率。
2.3.6细梗香草皂苷B在肠灌流液中的稳定性
分别取 pH为 5.00、6.55、7.43得K-R缓冲液
20 mL，平行操作 3份，各加入 20 mg的CAPB，超
声助溶。分别在第 0、1、3、6 h各取样 1 mL，用乙
腈定容到 2 mL，离心，过 0.45 μm微孔滤膜，进样
20 μL，将不同时间点的峰面积与 0 h的比较，考
察CAPB在不同pH的K-R缓冲液中稳定性。
2.4 大鼠在体单向肠灌流实验
2.4.1肠灌流配制
精密称取一定量CAPB储备液，用含酚红的
K-R缓冲液稀释至不同浓度，超声即得CAPB肠
灌流液；取相同量 CAPB的 NE-SEDDS和 PO-
SEDDS，缓慢注入 37℃的K-R缓冲液中，50 r/min
搅拌至自乳化液形成，即得2种自乳化肠灌流液，
均置于37 ℃备用。
2.4.2大鼠在体单向肠灌流操作
取禁食不禁水（14~16 h）的大鼠，称重，腹腔
注射3%戊巴比妥钠（0.15 mL/100 g），沿腹中线剖
开腹腔，分离出待考察的小肠段，于两端开口，结
扎，用预热至37 ℃的生理盐水将肠内容物冲洗干
净，再用空气将生理盐水排净。实验时取不同的
供试液（预热至37 ℃）100 mL，先以1.0 mL/min的
流速灌流 10 min，再调流速为 0.2 mL/min，平衡
30 min后，每 10 min收集 1管，每管 2 mL，共收集
9管。取样品 0.5 mL以测定酚红浓度，剩余保存
于-20 ℃供日后测定。十二指肠段为距幽门下方
1 cm处开始量取10 cm；空肠段为距幽门15 cm处
开始量取20 cm；回肠段为距盲肠上方25 cm处开
始量取 20 cm，实验结束时剪取各个被灌流的小
肠段，测量肠内径和长度。
2.5 数据分析
采用酚红法对灌流液的流入和流出的体积
进行校正，消除其体积变化的影响。
其中Q为灌流液的流速，Cin,phenolred ，Cout,phenolred
为进出口灌流液中酚红的浓度；Cin，Cout为进出
口灌流液中CPAB的浓度，Cin，Cout，为经过酚
红校正后的进出口灌流液中CPAB的浓度，R为
肠内径（cm），L为肠的长度（cm）。利用统计分析
软件 SPSS12. 0 对数据进行单因素方差分析
（ANOVA），实验结果以mean±SD表示，多样本均
数的两两比较采用 LSD检验，当P＜0.05时判定
具有统计学意义。
3 结果
3.1 CAPB肠灌流液的HPLC含量测定
空白肠液以及空白微乳对药物的测定无干
扰，见图1。CAPB的线性回归方程为 y=1.6545x+
3.1123，r=0.9999，在 0.0595~0.952 mg/mL内线性
关系良好。细梗香草皂苷B的高、中、低3个浓度
的药物平均回收率和 RSD 分别为 97.76%，
97.20%，97.09%，1.30%，1.09%，1.01%（n=6）。
3.2 不同电荷自乳化递药系统的乳粒粒径、Zeta
电位及自乳化时间
2种不同电荷的 CAPB-SEDDS在 1min中内
均能形成均一、稳定的微乳。乳粒粒径、Zeta电
位、自乳化时间结果见表1。
3.3 CAPB在不同 pH下K-R缓冲液中的稳定
性
结果表明，细梗香草皂苷B在偏酸性条件下
比较稳定，随着pH的增大，降解较多。由于小肠
液 pH更接近 6.55，因此选择将K-R缓冲液调至
Peff (cm/s) = -q1n(Cout /Cin)2πRL
Cout
Cin =
Cout
Cin ×
Cin,phenolred
Cout,phenolred
112
第11期
pH=6.55作后续研究，结果见图2。
图2 CAPB在不同pH值 K-R缓冲液的稳定性结果(n=6)
Fig.2 The stability results of CAPB in KR buffer at different pH
(n=6)
3.3 不同电荷CAPB自乳化递药系统小肠吸收
结果
CAPB- NE- SEDDS、CAPB- PO- SEDDS 和
CAPB溶液的大鼠肠吸收参数见表2。结果表明，
与对照溶液相比 CAPB的 SEDDS均能够显著增
加CAPB的吸收，其中 PO-SEDDS的小肠渗透速
率优于NE-SEDDS。
4 分析讨论
乳剂的粒径大小是影响药物吸收的主要因
素，乳滴的粒径越小，生物利用度越好[2]。细梗香
草皂苷正负电荷自乳化系统的粒径大小相差不
大，说明不同种类的电荷递药系统不会影响其生
物利用度和性能。从小肠吸收结果看，与溶液相
比自乳化递药系统可显著提高CAPB的有效肠渗
透率，其原因可能与自乳化递药系统可使CAPB
以胶束状态存在于小肠液中，增加了CAPB与小
肠壁的接触面积有关；同时自乳化递药系统中含
有的表面活性剂与助表面活性剂可抑制小肠壁
的外排泵与代谢酶活性，并开发细胞间通路 [5]。
同时我们还发现与常见的负电荷自乳化递药系
统相比。正电荷递药系统可显著促进CAPB的小
肠吸收。其原因可能由于其表面的正电荷增加
了CAPB与表面负电荷的小肠上皮绒毛细胞亲和
性，从而促进CAPB的小肠吸收[6]。
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216.
图1 HPLC-ELSD色谱图A：对照品CAPB；B：肠灌流样品；C：
空白肠灌流液
Fig.1 HPLC-ELSD chromatogram A: reference CAPB; B:
intestinal perfusion sample; C: blank intestinal perfusate
表1不同电荷SEDDS的粒径、Zeta电位、自乳化时间（mean±
S.D,n=5）
Table 1 The particle size, Zeta potential, self-emulsifying time
of SEDDS with different charge(mean ± SD, n = 5)
类型
NE-SEDDS
PO-SEDDS
粒径/nm
56.80±4.72
57.14±6.11
Zeta/mV
-3.52±0.31
16.77±4.59
自乳化时间/s
27±10.6
23±12.1
CAPB
参数/cm.s-1
Peff×10-5
CAPB溶液
1.08±0.72
NE-
SEDDS
2.72±0.42▲
PO-SEDDS
3.73±0.62▲*
表2不同电荷的CAPB-SEDDS的有效肠渗透速率Peff结果
（n=6, -x ±S.D.）
Table 2 The Peff of CAPB in SEDDS with different charges (n=
6, -x ±SD)
▲P<0.05 vs CAPB溶液组，* P<0.05 vs NE-SEDDS组
陈威宇等. 不同电荷自乳化递药系统对细梗香草皂苷B小肠吸收的研究 113