全 文 ：2012 年第 2期 ·47·
HPLC测定山枚注射液中牡荆素鼠
李糖苷、金丝桃苷、芦丁的含量
高　辉
(黑龙江省澳利达药业股份有限公司·哈尔滨　150001)
摘　要　目的：建立测定山枚注射液中牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、芦丁含量的方法。方法：
采用高效液相色谱法。色谱条件：色谱柱：HypersilODS2(5μm，5mm×200mm)；流动相：甲醇-0.1％
磷酸溶液 (40:60)；流速：1ml/min；检测波长：3590nm。结果：建立的含量测定方法准确简便，
重复性好。
关键词　山枚注射液，牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、芦丁，高效液相色谱法
山枚注射液是由山楂、刺枚果两药味组成。山楂
味酸甘，微温，为药食两用之品，有消食化积、行气
散瘀的功效。刺玫果甘酸、微温，具有健脾理气，养
血调经的作用。本实验通过对山枚注射液有效成分的
含量测定，为本产品的进一步开发利用奠定了实验基础。
1　仪器和试药
1.1　仪器
岛津 SCL-10A 高效液相色谱仪，岛津 SPD-10A 紫
外检测器，昆山 KQ-200DB 型超声仪。
1.2　药品
牡 荆 素 鼠 李 糖 苷 对 照 品 ( 批 号 111668-
201101)、金丝桃苷对照品 ( 批号 111521-201103)、
芦丁对照品 ( 批号 110752-201009)( 购自中国药品生
物制品检定所 )，山枚注射液自制。
1.3　试剂
甲醇为色谱纯，乙醇为分析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件
色谱柱：HypersilODS2(5μm，5mm×200mm)；流
动相：甲醇 -0.1％磷酸溶液 (40：60)；流速：1ml/
min；检测波长：359nm。
2.2　对照品溶液的配制
精密称取牡荆素鼠李糖苷对照品 3.925mg，金
丝桃苷对照品 2.775mg，芦丁对照品 9.675mg，置于
25ml 容量瓶中，用 50％乙醇溶解并稀释至刻度，制
成混合溶液，作为对照品溶液，进样 10μl。
2.3　供试品溶液的配制与测定
精密量取样品 50ml，置于干燥蒸发皿中，水浴
蒸干，残渣加50％乙醇使溶解，转移至25ml容量瓶中，
并用 50％乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，
进样 10μl。
对照品溶液　　　　　　供试品溶液
2.4　标准曲线的绘制
精密称取干燥至恒重的牡荆素鼠李糖苷对照品
2mg，金丝桃苷对照品 2mg，芦丁对照品 5mg，置于
25ml 容量瓶中，加入适量的 50％乙醇超声振荡使其
溶解，加 50％乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液。
分别精密吸取上述对照品溶液 1、2、3、4、5ml 于
10ml 容量瓶中，用 50％乙醇稀释至刻度，再分别注
入高效液相色谱仪各 10μl，以峰面积为纵坐标，进
样量为横坐标绘制标准曲线，回归方程如下：
牡荆素鼠李糖苷：Y=4.10×10-8X+5.17×10-2，
r=0.9993， 线 性 范 围 0.08-0.4μg， 峰 面 积
RSD=1.20％。
金丝桃苷：Y=1 . 8 0 1×1O -8X - 7 . 3 9×10 -3，
r=0.9989，线性范围0.08-0.4μg,峰面积RSD=1.20%。
芦 丁：Y=8.74×10-8X+6.73×10-3，r=0.9987， 线
性范围 0.2-1.0μg，峰面积 RSD=0.85％。
2.5　精密度试验
取 线 性 关 系 项 下 牡 荆 素 鼠 李 糖 苷 浓 度 为
0.008mg/ml，金丝椤瞄浓度为 O.008mg/ml，芦丁
黑龙江中医药·48·
浓度为 0.02mg/ml 的混合对照品溶液，连续进样六
次，测定其峰面积，经计算，牡荆素鼠李糖苷峰面积
RSD=0.93％，金丝桃苷峰面积 RSD=0.11％，芦丁峰
面积 RSD=0.12％。
2.6　重复性试验
取同一批号下样品进行五次平行试验，分别
进行测定，测得牡荆素鼠李糖苷 0.0105mg/ml，
RSD=1.7％；金丝桃苷 O.0052mg/ml，RSD=1.9％；芦
丁 0.0170mg/ml，RSD=0.93％。
表 1
2.7　稳定性试验
取同一供试品溶液，室温下放置，在配制后的0、
2、4、6、8、24 依次测定，结果在 24 小时内的 RSD
如下：牡荆素鼠李糖苷 1.36％，金丝桃苷 1.9％，芦
丁 0.83％。
2.8　加样回收率试验
取已知含量的同批样品 6 份，精密加入一定量的
对照品，依供试品处理方法，测定样品中牡荆素鼠李
糖苷，金丝桃苷和芦丁的含量，计算平均回收率。结
果分别为：牡荆素鼠李糖苷99.45％ (RSD=1.72％ )，
金丝桃苷 98.87％ (RSD=0.82％ )，芦丁 97.15％
(RSD=1.68％ )，(n=6)。见表 1、2、3。
样品 牡荆素鼠李糖苷峰面积积分值
金丝桃苷含量
峰面积积分值
芦丁含量
峰面积积分值
1 349891 317519 748774
2 350084 317369 748251
3 347186 317487 749563
4 342401 317612 747998
5 345957 317447 748106
6 343259 318301 750112
平均含量 346463 317623 748801
RSD％ 0.93 0.11 0.12
样品 牡荆素鼠李糖苷含量(mg ／ ml)
金丝桃苷含量
(mg ／ ml) 芦丁含量
1 0.0104 0.0052 0.0170
2 0.0107 0.0051 0.0168
3 0.0103 0.0053 0.0172
4 0.0106 0.0051 0.0169
5 0.0103 0.0053 0.0171
平均含量 0.1015 0.0052 0.0170
RSD％ 1.7 1.9 0.93
时间 (h) 牡荆素鼠李糖苷含量(mg ／ ml)
金丝桃苷含量
(mg ／ ml)
芦丁含量
(mg ／ ml)
0 0.0104 0.0052 0.0170
2 0.0105 0.0051 0.0168
4 0.0103 0.0053 0.0172
6 0.0106 0.0054 0.0169
8 0.0104 0.0053 0.0171
24 0.0102 0.0052 0.0170
RSD％ 1.36 1.9 0.83
表 1
表 2
表 3
2.9　样品含量的测定
取三批样品，按上述方法制备成供试品溶液，每
批测定 3次，见表 4。
表 4
3　讨论
3.1　进行溶剂选择
比较了 50％乙醇、30％乙醇，结果以后者的牡
荆素鼠李糖苷，金丝桃苷和芦丁提取完全，且分离较
好。
3.2　色谱条件筛选
在流动相中曾选择用甲醇 -水系统，试验结果表
明采用甲醇 -磷酸溶液系统，三对照品的峰形对称，
保留时间适中，分离效果好。
参考文献
[1]　中国药典 .一部 [S].2005.273.
[2]　王福成，豆文太，等.HPLC测定山楂精中牡荆苷、牡荆苷-2″-O-
鼠李糖苷、金丝桃苷、芦丁的含量 . 中成药 .2002，24(2)，
122-124.
（2012-03-02　收稿）
样品 供试品量
(ml)
供试品中牡荆
素鼠李糖甘量
(mg)
加入量
(mg)
测出总量
(mg)
回收率
%
X% RSD%
1 100 1.1 1.0000 2.0646 96.46
2 100 1.1 1.0000 2.1001 100.09
3 100 1.1 1.0000 2.0847 98.47 99.45 1.72
4 100 1.1 1.0000 2.1002 100.15
5 100 1.1 1.0000 2.1004 100.41
6 100 1.1 1.0000 2.1011 101.14
样品 供试品量
（ml)
供试品中金
丝桃苷量
(mg)
加入量
(mg)
测出总量
(mg)
回收率
%
X-
%
RSD
%
1 100 0.51 0.5 2.0646 98.68
2 100 0.51 0.5 2.1001 99.98
3 100 0.51 0.5 2.0847 99.63 98.87 0.82
4 100 0.51 0.5 2.1002 98.16
5 100 0.51 0.5 2.1004 97.92
6 100 0.51 0.5 2.1011 98.87
样品 供试品量（ml)
供试品中芦
丁量 (mg)
加入量
(mg)
测出总量
(mg)
回收率
%
X-
%
RSD
%
1 100 1.69 1.5 3.1663 98.42
2 100 1.69 1.5 3.1747 98.98
3 100 1.69 1.5 3.1173 95.15 97.1533 1.68
4 100 1.69 1.5 3.1179 95.19
5 100 1.69 1.5 3.1494 97.29
6 100 1.69 1.5 3.1584 97.89
批号含量 051001 051002 051101 X- RSD%
牡荆素鼠里糖苷 0.0108mg/ml 0.0110mg/ml 0.0112mg/ml 0.0110mg/ml 1.8
金丝桃苷 0.0051mg/ml 0.0052mg/ml 0.0049mg/ml 0.0051mg/ml 3.0
芦丁 0.0170mg/ml 0.0165mg/ml 0.0173mg/ml 0.0169mg/ml 2.4