全 文 : 收稿日期:2010-08-31
基金项目:贵州省林业厅年度计划项目(2007-001);贵州省创新能力平台项目[黔科合院所创新能(2009)4002]
作者简介:王莲辉(1969-),女,贵州贵阳人,副研究员,从事花卉及林木生物技术研究。
鄂报春组织培养与快速繁殖(简报)
王莲辉 1,冯育才 2,韩克松 3,姜运力 1,潘得权 1,杨成华 1
(1.贵州省林业科学研究院 生物技术中心,贵州 贵阳 550005;2.贵州大沙河省级自然保护区,贵州 道真 563000;3.
贵州省道真县林业局,贵州 道真 563000)
Tissue Culture and Rapid Propagation of Primula obconica
WANG Lian-hui1, FENG Yu-cai2, HAN Ke-song3, JIANG Yun-li1, PAN De-quan1, YANG Cheng-hua
(1.Center of Biological Technology, Guizhou Academy of Forestry, Guiyang 550005, Guizhou China;2.Guizhou Dashahe
Provincial Nature Reserve, Daozhen 563000, Guizhou China;3.Forestry Bureau of Daozhen County, Daozhen 563000,
Guizhou China)
摘 要:鄂报春是报春花科报春花属多年生常绿草本植物,具有较高的观赏价值,可作盆栽及花坛用花。本文
采用组织培养方法可在短期内产生出大量种苗。同属其它种已有组培快繁方面的报道,而鄂报春组培快繁尚未
见报道。
关键词:鄂报春;组织培养;快速繁殖
Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2010.04.017
中图分类号:Q943.1 文献标识码:B 文章编号:1009-7791(2010)04-0067-02
1 植物名称与材料类别 鄂报春(Primula obconica)幼嫩叶片
2 培养条件 基本培养基为 MS。愈伤组织及不定芽诱导培养基:(1)MS + 6-BA 0.1 mg/L(单位下同)
+ NAA 0.5。丛生芽分化及继代增殖培养基:(2)错误!链接无效。 + 6-BA 0.5 + NAA 0.2;(3)错误!
链接无效。 + 6-BA 2.0 + NAA 0.2。生根培养基:(4)1/2MS + IBA 0.3 + 2 g/L 活性炭。以上培养基均
加 3.0%蔗糖和 0.6%琼脂,pH 5.8。培养温度(25±2)℃,光照强度 30~40 μmol/m2·s,光照时间 12 h/d。
3 生长与分化情况
3.1 材料无菌处理 取鄂报春幼嫩叶片,放入洗洁精溶液中浸泡 5 错误!链接无效。,经自来水冲洗
2~3 h 后,用 75%乙醇表面消毒 30 s,置于 10%次氯酸钠溶液中消毒 20 min,再用 0.1%升汞溶液消毒
15 min,最后用无菌水冲洗 5~6 次。将消毒过的鄂报春细嫩叶片置于灭菌滤纸上吸干水分,用解剖刀
切除四周受伤组织,然后将叶片切成 1 cm × 1 错误!链接无效。左右小块,接种于愈伤组织诱导培养
基(1),每瓶接种 3~4 块。
3.2 愈伤组织及不定芽诱导 接种 2 周后,叶片边缘开绐膨大,基部切口边缘处开始出现淡绿色颗粒
状突起,继续培养 3 周后颗粒状突起逐渐转绿肿大,形成绿色愈伤组织块;2 周后,在愈伤组织块上开
始形成不定芽(图 1)。
3.3 丛生芽分化及继代增殖 将不定芽切分并转接到培养基(2)、(3)上培养,2 周后开始形成 3~5
个芽的芽丛,芽丛不断分化并在短时间内繁殖出大量试管苗,每 4~5 周为一个继代扩繁周期,每个周
期芽丛在(2)号培养基上可增殖不定芽 3~5 倍;在培养基(3)上可增殖不定芽 5~7 倍(图 2)。继代
时间不能超过 50 d,否则芽丛变褐死亡。待芽数量较多时,将丛生芽切分成单株,将高 2~3 cm、带有
2~3 片叶的小芽切下并转入生根培养基上进行生根培养。
3.4 生根与移栽 在生根培养基(4)中,约 20 d 左右开始生根,50 d 生根率可达 90%以上,植株生长
2010,39(4):67-68.
Subtropical Plant Science
第 39 卷 ﹒68﹒
旺盛,且根系发达,每苗生根数平均可达 4~6 条(图 3)。当苗高 5 cm 以上、具 3~4 片叶时,便可出
瓶移栽。移栽前,将生根瓶苗打开瓶盖,移至常温下炼苗 3 d,然后用镊子将试管苗从培养瓶中取出,
洗去根部的培养基,栽种于用 0.01%高锰酸钾溶液灭菌过的碎树皮与腐殖土(2∶1)混合成的基质中
(移栽前浇透水),放置在遮光度 50%~60%、湿度达 80%以上的温室中,50 d 后,成活率达 90%左右
(图 4)。
4 意义与进展 鄂报春是报春花科报春花属的多年生常绿草本植物,1880 年被发现,模式产地在我国
湖北省宜昌市,分布于贵州、云南、四川、湖南、湖北西部、广东北部、广西、江西等省区;在贵州,
已发现分布于贵阳市、黔西县的金坡乡和沙井乡、大方县的普底乡、赫章县的妈姑镇、威宁县的百草
坪和二塘、道真县的大沙河等地。生长在海拔 1 200~2 650 m 的疏林和灌木林下、草坡,在水沟边和
湿润的岩石上均可生长,对土壤、气候和水分要求不甚严格。自然条件下 3~4 月份开花,花具玫瑰红
色、红色,偶有白色,花色艳丽;花葶高 5~25 cm,直立,伞形花序有近 30 朵小花,花朵陆续开放,
栽培条件下花期很长,又名四季报春,具有较高的观赏价值,可作盆栽及花坛用花,为常见的盆栽花
卉(图 5)。同属的灰岩皱叶报春(和文佳等,2007)、小报春(金晓霞等,2005)、高穗花报春(李燕等,
2005)已有过组培方面的报道,而鄂报春组培快繁尚未见报道。
图 1 叶片愈伤组织诱导 图 2 丛芽继代增殖 图 3 试管苗生根
图 4 试管苗移栽 图 5 鄂报春野外开花植株