全 文 :收稿日期:2010-01-29; 修订日期:2010-05-21
基金项目:贵阳中医学院博士基金;
国家中医药管理局“西部”重点学科建设资助项目(No.
200414)
作者简介:王祥培(1975-) ,男(侗族) ,贵州天柱人,现为贵阳中医学院副
教授,博士学位,主要从事中药及民族药品种、品质与资源开发研究工作.
山木通挥发油成分的气相色谱-质谱联用分析
王祥培,许 乔,许士娜,李雨生,吴红梅
(贵阳中医学院,贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 分析山木通根及根茎与茎叶的挥发油的化学成分。方法 采用水蒸气蒸馏法分别从山木通根及根茎、茎叶中
提取挥发油。用气相色谱-质谱联用(GC - MS)对化学成分进行分离鉴定。结果 从根及根茎挥发油中鉴定了 96 个化合
物,占挥发油总成分的 80. 03 ﹪;茎叶挥发油中鉴定了 108 个化合物,占挥发油总成分的 95. 23 ﹪。结论 两者主要成分
基本相同,但相对含量有差异。
关键词:山木通; 气相色谱-质谱联用; 挥发油
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2011. 03. 051
中图分类号:R284. 1 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)03-0630-02
山木通 Clematis finetiana Lévl. et Vant.为毛茛科铁线莲属植
物,具有清热解毒,活血止痛,祛风除湿的功效,临床用于风湿关节
肿痛、跌打损伤、小便不利、乳汁不通等治疗,主要分布于云南、贵
州、四川、湖北、浙江等省[1,2]。由于市场需要,在一些地区有将山
木通作为威灵仙商品药材出售[3,4]。而山木通与威灵仙比较,具有
较强的镇痛作用[5]。到目前为止,只见正品威灵仙及其地方习用
品柱果铁线莲挥发油的研究报道[6,7],对于具有抗炎镇痛作用的山
木通中挥发油成分的研究尚未见报道。因此,本文采用气相色谱
-质谱联用技术对山木通的根及根茎与茎叶的挥发性成分进行分
析鉴定,为进一步开发利用该药用资源提供科学依据。
1 仪器与试剂
HP6890 /5975C GC /MS联用仪(美国安捷伦公司) ;挥发油提
取仪。药材样品 2009-10 购于贵州省凯里市药材市场,经王祥培
副教授鉴定为毛茛科植物山木通 Clematis finetiana Levl. Et Vant.
干燥的根及根茎或茎叶。正己烷、无水硫酸钠均为分析纯。
2 方法
2. 1 挥发油提取方法
2. 1. 1 山木通根及根茎挥发油提取[7] 取山木通根及根茎药材
250 g,粉碎,置于挥发油提取器中,加水适量,浸泡过夜,加入 4
ml正己烷,加热提取 6. 5 h,得到有特殊气味淡黄色的油状液体
约 3. 5 ml(含正己烷) ,经无水硫酸钠干燥作为供试品。
2. 1. 2 山木通茎叶挥发油提取[7] 取山木通茎叶药材 250 g,粉
碎,置于挥发油提取器中,加水适量,浸泡过夜,加入 4 ml 正己
烷,加热提取 6. 5 h,得到有特殊气味淡黄色的油状液体约 3. 5 ml
(含正己烷) ,经无水硫酸钠干燥作为供试品。
2. 2 气相色谱 -质谱分析 色谱柱为 Zebror. ZB - 5MSi 5% -
Phenyl - 95% - Dimethyl Polysiloxane 弹性石英毛细管柱(30m ×
0. 25 mm ×0. 25 μm) ;程序升温为 45℃(保留 2 min) ,以 5 ℃ /
min升温至 300 ℃,保持 8 min;气化室温度 250℃;载气为高纯
He(99. 999%) ;柱前压 7. 62 psi,载气流量 1. 0 ml /min;分流比 20
∶ 1,溶剂延迟时间 3 min。离子源为 EI源;离子源温度 230 ℃;四
极杆温度 150℃;电子能量 70 eV;发射电流 34. 6 μA;倍增器电压
1 052 V;接口温度 280℃;质量范围 20 ~ 450 amu。
按照上述实验条件进样 1 μl,按峰面积归一化法进行计算求
得各化学成分在挥发油中的相对含量。通过 HPMSD 化学工作
站,结合 Nist05 标准质谱图库和 wiley275 质谱图库进行检索,确
认各化合物。结果见表 1。总离子流图见图 1 ~ 2。
3 结果与讨论
本文从山木通根及根茎挥发油中鉴定了 96 个化合物,占挥
发油总成分的 80. 03 ﹪;从山木通茎叶挥发油中鉴定了 108 个化
合物,占挥发油总成分的 95. 23 ﹪。根及根茎与茎叶挥发油共有
成分 65 个,其中 1,8-桉叶素,L(-)冰片(龙脑) ,α -萜品醇,肉
豆蔻酸,棕榈酸,共轭亚油酸含量均比较高。研究结果提示山木
通根与茎叶挥发油的主要成分基本相同,但相对含量有一定差
异。其中 1,8-桉叶素具有抗炎、抗菌、镇痛的功能,L(-)冰片(龙
脑)具有抗炎、清热、止痛的功能[8 ~ 10],可能是山木通治风湿关节
肿痛的药效物质基础。
图 1 山木通茎叶挥发油总离子流图
图 2 山木通根及根茎挥发油总离子流图
表 1 山木通挥发油的化学成分
序
号
保留时间
t /min 化合物名称 分子式
相对含量(%)
茎叶 根及根茎
1 4. 84 Hexanal C6H12O 0. 703 0. 314
2 5. 68 1,3 - cyclopentadiene,5 - tert - butyl - C9H14O 0. 088 -
3 5. 84 Pentanoic acid C5H10O2 0. 087 0. 027
4 6. 16 (E)-2 - Hexenal C6H10O 0. 457 0. 060
5 6. 24 (Z)-3 - Hexenol C6H12O 0. 339 0. 024
6 6. 53 (E)-2 - Hexen - 1 - ol C6H12O 0. 083 0. 006
7 6. 59 1 - Hexanol C6H14O 0. 411 0. 155
8 7. 00 Protoanemonine C5H4O2 1. 634 0. 951
9 7. 19 2 - Heptanone C7H14O 0. 072 0. 028
10 7. 49 Heptanal C7H14O 0. 194 0. 152
11 7. 70 1,5,5 - Trimethyl - 3 - methylenecyclohexene C10H16 0. 067 0. 009
12 8. 12 Tricyclene C10H16 0. 026 0. 018
13 8. 48 α - Pinene C10H16 0. 951 3. 210
14 8. 60 3 - Ethyl - 1,5 - octadiene (c,t) C10H18 0. 011 -
15 8. 92 Camphene C10H16 0. 425 0. 995
16 9. 08 Verbenene C10H14 0. 097 -
17 9. 10 (E)-2 - Heptenal C7H12O 0. 050 0. 168
18 9. 23 Benzaldehyde C7H6O 0. 290 0. 083
19 9. 54 1 - Octene C8H16 0. 012 -
20 9. 67 Sabinene C10H16 0. 070 0. 046
21 9. 76 β - Pinene C10H16 0. 272 -
·036·
时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL. 22 NO. 3
续表 1
序
号
保留时间
t /min 化合物名称 分子式
相对含量(%)
茎叶 根及根茎
22 9. 82 1 - Octen - 3 - ol C8H16O 0. 351 3. 912
23 9. 96 2,3 - Octanedione C8H14O2 0. 045 -
24 10. 03 3 - Octanone C8H16O 0. 219 0. 060
25 10. 20 2 - Pentyl - furan C9H14O 0. 487 0. 356
26 10. 31 3 - Octanol C8H18O 0. 076 -
27 10. 45 Yomogi alcohol C10H18O 1. 774 0. 299
28 10. 53 Octanal C8H16O 0. 396 -
29 10. 60 α - Phellandrene C10H16 0. 162 0. 076
30 10. 76 2,4 - Heptadienal,(E,E)- C7H10O 0. 030 0. 025
31 10. 98 α - Terpinene C10H16 0. 481 0. 080
32 11. 22 P Cymene C10H14 0. 628 0. 186
33 11. 37 - Phellandrene C10H16 0. 188 0. 293
34 11. 44 1,8 - Cineole C10H18O 9. 436 1. 612
35 11. 77 Hyacinthin C8H8O 0. 246 0. 081
36 11. 94 (E)- Ocimene C10H16 0. 070 -
37 12. 27 γ - Terpinene C10H16 0. 733 0. 117
38 12. 33 Artemisia ketone C10H16O 0. 501 0. 071
39 12. 68 cis - Linalool oxide C10H18O2 0. 057 0. 043
40 13. 01 Artemisia alcohol C10H18O 1. 404 0. 185
41 13. 50 L - Linalool C10H18O 0. 549 0. 078
42 13. 62 Filifolone C9H14 0. 877 0. 191
43 13. 70 α - Thujone C10H16O 1. 101 0. 187
44 14. 02 - Thujone C10H16O 0. 216 0. 024
45 14. 17 P - menth - 2 - en - 1 - ol C10H18O 0. 455 0. 089
46 14. 27 Chrysanthenone C10H14O 0. 927 0. 512
47 14. 71 Terpenene - 1 - ol C10H18O 0. 567 1. 606
48 14. 87 Camphor C10H16O 2. 008 0. 470
49 15. 52 L - Borneol C10H18O 3. 401 1. 410
50 15. 85 Terpenene - 4 - ol C10H18O 2. 453 0. 442
51 16. 22 α - Terpineol C10H18O 1. 319 2. 361
52 16. 32 Methyl Salicylate C8H8O3 0. 358 0. 120
53 16. 59 Decanal C10H20O 0. 138 0. 148
54 17. 01 (E)- Carveol C10H16O 0. 441 0. 196
55 17. 08 - Cyclocitral C10H16O 0. 116 -
56 18. 01 trimethyl - tetrahydronaphthalene C13H18 0. 125 -
57 18. 46 Salotan C9H10O3 0. 194 -
58 19. 63 4 - vinyl - 2 - methoxy - phenol C10H14O 0. 298 0. 114
59 20. 80 Eugenol C10H12O2 1. 082 0. 387
60 21. 38 - Copaene C15H24 0. 122 0. 038
61 21. 54 - Damascenone C13H18O 0. 156 -
62 21. 781 -(2,4,6 - Trimethylphenyl)buta - 1,3 - dieneC13H16 0. 326 0. 096
63 21. 99 Methyl Eugenol C11H14O2 0. 059 -
64 22. 20 Isolongifolene C15H24 0. 082 0. 680
65 22. 55 β - Caryophyllene C15H24 3. 158 0. 476
66 23. 39 - Humulene C15H24 0. 379 0. 275
67 24. 07 Germacrene D C15H24 1. 109 -
68 24. 21 β - Selinene C15H24 0. 774 0. 818
69 24. 44 Bicyclogermacrene C15H24 0. 306 0. 703
70 24. 60 (E,E)- - Farnesene C15H24 1. 245 -
71 25. 05 δ - Cadinene C15H24 0. 240 0. 318
72 25. 86 Lauric acid C12H24O2 0. 191 0. 196
73 25. 93 d - Nerolidol C15H26O 0. 143 -
74 26. 21 Geranyl isovalerate C15H26O2 0. 135 -
75 26. 39 Spathulenol C15H26O 0. 662 0. 144
76 26. 54 Caryophyllene oxide C15H24O 1. 727 0. 328
77 27. 00 Cedrol C15H24O 0. 148 -
78 27. 24 Asarone C12H16O3 0. 370 0. 221
79 28. 17 (+ -)-5 - Epi - Paradisiol C15H26O 2. 305 1. 160
80 28. 72 - Bisabolol C15H26O 0. 139 -
81 28. 96 Heptadecane C17H36 0. 173 -
82 29. 28 Octadecanal C18H36O 0. 183 -
83 30. 36 Myristic acid C14H28O2 1. 969 2. 254
84 31. 28 Phytane C20H42 1. 306 -
85 32. 04 2 - Pentadecanone,6,10,14 - trimethyl - C18H36O 0. 870 -
86 32. 36 Pentadecanoic acid C15H30O2 0. 493 1. 371
87 32. 75 Cyclohexadecane C16H32 0. 949 -
88 33. 03 15,16 - Dinorlab - 12 - ene,8,13 - epoxy - C18H30O 0. 181 -
89 33. 13 Nonadecane C19H40 0. 233 -
90 33. 66 Methyl palmitate C17H34O2 3. 504 -
91 34. 54 Palmitic acid C16H32O2 14. 42 19. 295
92 34. 98 Ethyl palmitate C16H36O2 1. 598 -
93 35. 72 methylphenyl ester C16H20O5 1. 001 0. 595
94 36. 85 Methyl linoleate C19H34O2 0. 421 -
95 36. 97 Methyl 9,12,15 - octadecatrienoate C19H32O2 1. 124 -
96 37. 23 Phytol C20H40O 3. 599 -
97 37. 62 Linoleic acid C18H32O2 2. 006 9. 351
98 37. 73 Oleic acid C18H34O2 3. 223 -
续表 1
序
号
保留时间 /
t /min 化合物名称 分子式
相对含量(%)
茎叶 根及根茎
99 38. 06 Ethyl linoleate C20H36O2 0. 529 -
100 38. 19 Ethyl linolenate C20H34O2 1. 126 -
101 40. 13 O - Methylequileni C19H20O2 0. 173 -
102 40. 41 Tricosane C23H48 0. 243 -
103 43. 62 Pentacosane C25H52 0. 297 -
104 46. 59 Heptacosane C27H56 0. 165 -
105 48. 46 Octacosane C28H58 0. 050 -
106 49. 38 Nonacosane C29H60 0. 493 -
107 50. 70 Triacontane C30H62 0. 062 -
108 51. 98 Hentriacontane C31H64 0. 817 -
109 5. 740 Acetyl aleryl C7H12O2 - 0. 013
110 11. 14 3 - ethyl - O - xylene C10H14 - 0. 047
111 12. 23 Octenal C8H14O - 0. 034
112 13. 20 Terpinolene C10H16 - 0. 242
113 13. 95 Fenchol C10H18O - 0. 042
114 14. 65 Nopinone C9H14O - 0. 199
115 15. 08 (E,Z )-2,6 - Nonadienal C9H14O - 0. 083
116 15. 28 (Z)-2 - Nonenal C9H16O - 0. 649
117 15. 42 Pinocarvone C10H14O - 1. 087
118 15. 76 3 - Pinanone C10H16O - 0. 076
119 16. 42 Myrtenol C10H16O - 2. 884
120 16. 78 Berbenone C10H14O - 0. 323
121 17. 63 Cuminic aldehyde C10H12O - 0. 051
122 17. 73 Carvone C10H14O - 0. 095
123 18. 42 Nonoic acid C9H18O2 - 0. 119
124 18. 59 Methylbenzoate C8H8O2 - 0. 177
125 19. 25 Perilla alcohol C10H16O - 0. 233
126 21. 00 Capric acid C10H20O2 - 0. 113
127 22. 85 Widdrene C15H24 - 0. 061
128 22. 98 - Guaiene C15H24 - 0. 106
129 23. 31 γ - Muurolene C15H24 - 0. 077
130 23. 68 - Gurjunene C15H24 - 1. 059
131 23. 92 γ - Selinene C15H24 - 0. 122
132 24. 50 Aromadendrene C15H24 - 0. 320
133 24. 67 δ - Guaiene C15H24 - 0. 363
134 25. 30 Cadina - 1,4 - diene C15H24 - 0. 057
135 26. 50 - 6 - methyl -,methyl ester C10H12O4 - 3. 273
136 27. 64 Ethanone,1 -(2,4,5 - triethylphenyl)- C14H20O - 2. 875
137 27. 87 - Cadinol C15H26O - 0. 198
138 31. 55 Glaucic acid C15H22O2 - 4. 322
139 40. 75 Totarol C20H30O - 0. 436
山木通根及根茎、茎叶与文献报道[7]的柱果铁线莲挥发油
成分比较,共有成分 13 个,与文献报道[11]的威灵仙挥发油成分
比较,共有成分 28 个,其中亚油酸、棕榈酸等在几种药材中含量
均较高。
山木通根及根茎与茎叶中挥发油所含化学成分的异同与药
效的关系值得进一步研究。
参考文献:
[1] 刘 勇,刘贤旺.江西铁线莲属药用植物资源及其利用[J]. 江西
林业科技,2005,1:37.
[2] 肖培根.新编中药志,第1卷[M].北京:化学工业出版社,2002:679.
[3] 王祥培,黄 婕,靳凤云,等.黔产威灵仙类药材的鉴定及总皂苷的
比较[J]. 华西药学杂志,2009,24(3) :293.
[4] 黄 婕,王祥培,靳凤云,等.贵州地区威灵仙类药材中齐墩果酸的
含量比较[J].中成药,2009,31(4) :619.
[5] 钱海兵,陈秀芬,孙宜春,等.正品威灵仙与贵州地区习用品主要药
效的对比研究[J]. 四川中医,2009,27(8) :53.
[6] 徐 涛,杨永键,万德光. 峨眉山野生威灵仙挥发油类成分分析
[J].中华实用中西医杂志,2005,18(7) :1046.
[7] 王祥培,黄 婕,靳凤云,等. 柱果铁线莲挥发油化学成分分析
[J].安徽农业科学,2008,36(25) :10936.
[8] 陈 琳.蓝桉的研究进展[J].中国药业,2009,18(4) :61.
[9] 杨 柳,李艳福,何 娟,等. GC - MS法测定 12 个产地辛夷挥发油
中 1,8 -桉叶素[J].中草药,2007,38(11) :1729.
[10] 郭珊珊,余 玲,陈巧玲,等.冰片药效学研究进展[J].中国现代中
药,2008,10(6) :6.
[11] 张海丰,张桂燕,张志蓉,等. 不同种药材威灵仙挥发性成分研究
[J].中国现代中药,2009,6(6) :12.
·136·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL . 22 NO. 3 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期