全 文 :文章编号:0490-6756(2000)04-0590-04
桂竹香花托诱导再生植株的研究
魏 琴1 ,周黎军2 , 陈东林1 ,李旭峰3 ,陈 放3
(1.宜宾师范专科学校 ,宜宾 644007;2.宜宾农业学校 ,宜宾 644000;3.四川大学生命科学学院 , 成都 , 610064)
摘要:用桂竹香带子房花托 ,在附加 6-BA 2.00~ 3.00mg/ L+NAA 0.1~ 0.5mg/ L 的 MS 培
养基上诱导出愈伤组织后 ,转接到附加 6-BA 0.2mg/ L+NAA 0.01mg/ L 的 MS 培养基上 ,分化
出的丛生芽状态最佳 ,丛生芽在附加 NAA 0.5mg/ L 的 1/ 2 MS 培养基中可诱导出多而粗壮的
根.
关键词:桂竹香;组织培养;再生植株
中图分类号:Q 813 文献标识码:A
桂竹香(Cheiranthus Cheiri L .)是十字花科(Cruci ferae)常见的庭园观赏植物 ,也是一种
特种经济植物.种子含油量约 26%,供工业用;花可药用 ,有泻下 、通经之效[ 1] ;栽培上 ,耐干
旱 ,抗病虫能力强 ,故该植物是油料 、花卉 、药物及栽培上的优良遗传资源 ,其开发前景好.利用
组织培养技术再生植株 ,可为加速桂竹香的开发利用创造条件.
1 材料和方法
1.1 实验材料
从南京引种成都后 ,经四川大学植物研究所选育的植株作为实验材料 ,所用外植体是花
托.
1.2 实验方法
1.2.1 无菌外植体的获得 选取盛开的(已授粉)花并连同花柄摘下 ,去掉花瓣上部分 ,自来
水冲洗2 ~ 3次后 ,在超净工作台上用 70%的酒精浸泡30see ,无菌水冲洗2次 , 0.1%升汞浸泡
4min ,更换一次升汞后再泡 2min ,无菌水冲洗 5 ~ 8次 ,置于无菌培养皿的吸水纸上 ,在无菌条
件下剥出花托.
1.2.2 带子房花托与去子房花托的离体培养 将带子房花托和去子房花托分别接种于附加
6-BA 0.2 ~ 3.0mg/ L +NAA 0.01 ~ 0.5mg/L 及 3.0%蔗糖 , 0.8%琼脂的 MS 培养基上 ,
pH5.8 ,培养条件:温度(25±2)℃,每日光照时间12h ,光照强度1500 ~ 2000 lx ,2周后观察 、记
录.
1.2.3 正常丛生芽的分化 将已培养 2周且长势较好的愈伤组织 ,连同子房 、花托转入不含
激素及激素浓度较低的表 1中的前二种培养基上 ,并经不同强度的光照再经 3周后 ,观察愈伤
组织分化丛生芽的情况.
1.2.4 生根诱导及试管苗移栽 将长到2 ~ 3cm的健壮的丛生芽移至附加不同激素的生根
收稿日期:1999-12-29
2000 年 8 月
第 37 卷第 4 期
四川大学学报(自然科学版)
Journal of Sichuan University(Natural Science Edition)
Aug.2000
Vo l.37 No.4
培养基上 ,4周后观察诱导生根的情况.
2 实验结果与分析
2.1 带子房花托与去子房花托的离体培养(表 1)
表 1 带子房花托与去子房花托离体培养结果(6 周后的统计结果 、每次处理外植体数为 20)
激素浓度(mg/ L)
6-BA NAA
愈伤组织生长情况** 外植体平均出芽数(个) 丛生芽离化率(%)
带子房花托 去子房花托 带子房花托 去子房花托 带子房花托 去子房托
0.2 0.01 - - 0 0 / /
0.5 0.05 - - 0 0 / /
0.5 0.10 ± - 0 0 / /
1.0 0.10 + - 2.5* 0.05 90 0
2.0 0.10 ++ - 3.2* 0.10 95 0
3.0 0.10 ++ - 2.8* 0 100 /
2.0 0.30 ++ - 3.0* 0.05 100 0
2.0 0.50 ++ - 3.5* 0.15 100 0
*从愈伤组织上分化出芽;** -,不生长;±,少量生长;+,生长较好;++,生长很好
在我们所设计的 8种激素浓度条件下 ,培养 2周后观察 ,在前三种激素浓度条件时 ,花托 、
子房未有大的变化 ,而在后五种激素浓度下花托膨大 ,子房增长;3周后观察 ,在前二种激素浓
度条件下子房 、花托黄化 、死亡 ,而在后六种激素浓度条件下带子房花托长出愈伤组织 ,且愈伤
组织的生长状态随 6-BA和 NAA浓度的增高而变好 ,而去子房花托上均未长 愈伤组织 , 5周
后 ,在后五种激素浓度条件下愈伤组织上分化出芽 ,但玻璃化现象严重 ,达 90%~ 100%,6同
后 ,少数去子房花托上直接出芽(附图-1),未见玻璃化现象.统计结果见表 1.
2.2 正常丛生芽的分化
正常丛生芽诱导分化情况见表 2.
表 2 正常丛生芽分化情况(3 周后的统计结果)
激素浓度(mg/ L)
6-BA NAA
诱导分化率(%) 玻璃化苗率(%)
弱光 强光 弱光 强光
1000 lx 2000 lx 1000 lx 2000 lx
0 0 30 60 4 5
0.2 0.01 56 95 6 6
0.5 0.05 70 92 9 8
由表 2可以看出 ,正常丛生芽的诱导分化 ,只需较低的激素浓度 ,光照强度对分化诱导影
响较大 ,光强增大 ,诱导分化率增加 ,而对玻璃化影响不明显(附图-2).
2.3 生根诱导及试管苗移栽诱导
将2 ~ 3cm的再生苗转入生根培养基上 , 3周后可见切口处膨大 ,再过一周左右有不定根
生长.从表 3可知 , IBA 对生根的诱导不如 NAA 好 , IBA诱导生根率低 ,生根数量少 ,纤细且
短 ,而 NAA诱导生根率较粗壮且多(附图-3).
591第 4期 魏琴等:桂竹香花托诱导再生植株的研究
表 3 激素对丛生芽生根的影响(5周后统计结果)
培养基成分(mg/ L) 供试苗的数目(个) 生根诱导率(%) 生根状况
1/ 2 MS+IBA 0.2 20 10 短 、少 、细
1/ 2 MS+IBA 0.5 22 15 短 、少 、细
1/ 2 MS+NAA 0.2 25 86 较多且粗
1/ 2 MS+NAA 0.5 24 92 多且粗
待苗在瓶中长至 5 ~ 6cm高时打开瓶盖 ,自然光下放置 4 ~ 5d ,以增强其光合能力 ,取出后
洗净根部残留的培养基 ,移栽到温室瓦钵中 ,浇 1/2 MS 培养液 1 ~ 2次 ,10 ~ 15d后移入土 ,成
活率在 85%以上(附图-4).
附图说明
1.去子房花托培养 6 周后花托上直接出芽;2.带子房花托形成的愈伤组织分化出正常的丛生芽;3.丛生芽在
生根培养基上 5 周后长出的根;4.移栽瓦钵中的小苗
3 讨论
我们以桂竹香花托为材料 ,初步探讨了子房 、激素及光照对花托培养过程中的影响.结果
表明:子房的存在影响诱导花托再生植株的方式.带子房花托经愈伤组织分化出苗 ,而去子房
花托以直接出苗方式再生 ,这可能与子房中某些激素的存在有关.不管是带子房花托还是去子
房花托其再生的启动都需要较高的激素浓度(6-BA 1mg/L , NAA 0.1 mg/L 以上),在诱导分
化过程中高浓度的激素导致玻璃化现象的出现 ,而转入低浓度(6-BA 0.5mg/ L ,NAA 0.05mg/
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L 以下)才诱导出正常丛生芽 ,可见激素浓度对再生的启动及分化有较大影响.激素种类对生
根诱导影响较大 ,NAA 0.5mg/ L 更适合根的生长.光照强度影响丛生芽的分化率.
参考文献:
[ 1] 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴[ M] .北京:科学出版社.
[ 2] 高宏波 , 李红梅 ,王幼平 , 等.四川大学学报(自然科学版), 1998 , 5:764~ 768.
[ 3] 刘咏梅 , 谈锋 ,李坤培.西南师范大学学报(自然科学版), 1995 , 20(2):183 ~ 186.
[ 4] Takara T.Minouta T.Takada H.Carcinogenesis , 1990 , 11(11):2015 ~ 2019.
[ 5] 罗鹏 , 周冀明 ,吴沿友 , 等.遗传 , 1996 , 18(1):23 ~ 25.
STUDIESON PLANTLET REGENERATION OF RECEPTACLE IN
CHEIRANTHUS CHEIRI L .
WEI Qin 1 , ZHOU LI-Jun2 , CHEN Dong-Lin1 , Li X iu-Feng3 CHEN Fang3
(1.Yibin Teachers College , Yibin 644007 ,China;2.Yibin Ag riculture s School , Yibin 644000 ,
China;3.College of L ife Scienee ,Sichuan Uaiversity ,Chengdu 610064 ,China)
Abstract:Clusters of buds w ere best that receptacle w ith calli and ovary of Cheiranthus
Cheiri L .were cultured on MS+6-BA 0.2mg/ L+NAA 0.01mg/L after calli were induced on
M S+6-BA 2.0 ~ 3.0 mg/L +NAA 0.1 ~ 0.3 mg/L.Many sturdy roo ts were induced on 1/2
M S+NAA 0.5mg/ L.
Key words:Cheiranthus Cheiri L .;tissue culture;plant regeneration
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