全 文 ：粉枝莓根中的三萜及甾体化合物
康淑荷 1 ,师永清1 ,杨彩霞 2
(1.西北民族大学化工学院 ,甘肃兰州 730030;2.西北师范大学化工学院 ,甘肃兰州 730060)
　　摘要　目的:对粉枝莓 RubusbiflorusBuch.根的化学成分进行研究。 方法:采用硅胶低压柱层析 、制备薄层层
析和重结晶等方法进行分离提取 ,根据理化性质和光谱数据鉴定结构。结果:得到了 5个三萜及甾体化合物 ,分别
为:羽扁豆醇乙酸酯(Ⅰ )、2α, 3β -二羟基乌苏-12-烯-28-酸(Ⅱ )、齐墩果酸(Ⅲ )、2α-羟基齐墩果酸(Ⅳ)、β -谷甾醇
(Ⅴ)。结论:以上化合物均为首次从本植物中分离得到。
关键词　粉枝莓;三萜;甾体
中图分类号:R284.1/R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2008)11-1669-03
TriterpenoidsandSteroidsofRootofRubusbiflorus
KANGShu-he1 , SHIYong-qing1 , YANGCai-xia2
(1.SchoolofChemicalEngineering, NorthwestMinoritiesUniversity, Lanzhou730030, China;2.SchoolofChemicalEngineering,
NorthwestNormalUniversity, Lanzhou730060, China)
Abstract　Objective:ToinvestigatethechemicalconstituentsofrootofRubusbiflorus.Methods:Isolationandpurificationwere
carriedoutbysilicagelcolumnchromatographyandrecrystalizationandsoon.Structuraldeterminationofthepurecompoundswas
basedonphysico-chemicalpropertiesandvariousspectraldataanalysis(1H-NMR, 13C-NMR, IR, EI-MS).Results:Fivecompounds
wereisolatedandidentifiedasfollows:lupeolacetate(Ⅰ ), corosolicacid(Ⅱ), oleanicacid(Ⅲ), 2α-hydroxyoleanolicacid(Ⅳ),
sitosterol(Ⅴ).Conclusion:Allthesecompoundsareisolatedfromthisplantforthefirsttime.
Keywords　RubusbiflorusBuch.Triterpenoid;Steroids
作者简介:康淑荷 ,女 ,硕士 ,讲师 ,研究方向:天然产物化学;Tel:0931-2927883, E-mail:kangshuhe@163.com。
　　粉枝莓 RubusbiflorusBuch.是蔷薇科悬钩子属
植物中的一种落叶性野生果木 ,主要分布于陕西 、湖
北 、四川 、云南 、西藏〔1〕。其根茎叶果皆可入药 ,具
有补肾固精明目的药用功效 〔2〕 ,民间常用其根治疗
痢疾。其化学成分未见文献报道 ,为进一步开发利
用悬钩子属植物药用资源 ,笔者对粉枝莓化学成分
进行了研究 ,曾报道了粉枝莓中的两种新黄酮成
分 〔3〕 ,现报道对粉枝莓根中的三萜及甾体化合物的
研究。从粉枝莓根的乙醇提取液中分得 5个三萜及
甾体成分 ,经物理常数和光谱数据分析 ,它们分别为
羽扁豆醇乙酸酯(lupeolacetate, Ⅰ)、2α, 3β-二羟基
乌苏-12-烯-28-酸 (corosolicacid, Ⅱ )、齐墩果酸
(oleanlicacid, Ⅲ )、 2α-羟基齐墩果酸 (2α-hydroxy-
oleanolicacid, Ⅳ)、β -谷甾醇(sitosterol, Ⅴ)。这些
化合物均为首次从粉枝莓根中分得。
1 　仪器与试剂
X4型显微熔点测定仪(温度计未校正);Perkin-
Elmer599B红外光谱仪;BrukerAM-300核磁共振谱
仪(TMS内标);VGZAB-HB质谱仪 。薄层色谱硅胶
GF254和柱色谱硅胶 (100 ～ 200目 、200 ～ 300目)均
为青岛海洋化工厂产品 ,其他化学试剂均为分析纯 。
植物样品 2005年 8月采自四川宜宾地区 ,经西北师
范大学生命科学院廉永善教授鉴定为蔷薇科悬钩子
属植物粉枝莓 RubusbiflorusBuch。
2　提取与分离
取干燥粉枝莓根 3.0 kg,粉碎后 ,经 95%乙醇
在室温下浸泡提取 4次(每次 7 d),合并提取液 ,减
压浓缩得浸膏 300g,总浸膏分别用环己烷 、二氯甲
烷 、乙酸乙酯 、甲醇萃取 ,乙酸乙酯部位减压回收溶
剂得浸膏 61 g, 经过硅胶柱层析色谱 , 分别用
CH2Cl2-EtOAc和 EtOAc-MeOH进行梯度洗脱 。根
据 TLC合并得到 38个组分(Fr1 ～ 38)。Fr3、Fr27
～ 29、Fr32 ～ 34分别经硅胶低压柱层析 ,制备薄层
层析和重结晶分离 ,得到化合物Ⅰ ～ Ⅴ 。
3　结构鉴定
化合物Ⅰ :白色针晶(氯仿)。IR(KBr):3072,
2941, 2870, 1728(C=O), 1639(C=C), 1454, 1369,
1245, 1020, 890 cm-1。 EI-MSm/z:468[ M+ ] , 453,
393, 249, 218, 189 , 175。1H-NMR(CDCl3 )δ:0.79,
0.84, 0.84, 0.85, 0.94, 1.03(each3H, s, 6×CH3),
1.69(3H, s, 30-H), 2.04(3H, s, -COCH3 ), 2.38
(1H, m, 19-H), 4.66(1H, m, 3-H), 4.69、4.56(each
1H, m, 29-H);13C-NMRδ:38.3(C-1), 23.7(C-2),
81.0(C-3), 38.0(C-4), 55.4(C-5), 18.2(C-6),
·1669·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 31卷第 11期 2008年 11月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.11.038
34.2(C-7), 40.8(C-8), 50.3(C-9), 37.1(C-10),
20.9(C-11), 25.0(C-12), 37.9(C-13), 42.9(C-
14), 27.4(C-15), 35.6(C-16), 43.0(C-17), 48.3
(C-18), 48.0(C-19), 150.9(C-20), 29.9(C-21),
40.0(C-22), 27.9(C-23), 15.9(C-24), 16.5(C-
25), 16.2(C-26), 14.5(C-27), 18.0(C-28), 19.3
(C-29), 109.3(C-30), 170.9 (C=O)and21.3(-
COCH3)。以上数据与文献〔4〕基本一致 , 确定为羽
扁豆醇乙酸酯(lupeolacetate)。
化合物 Ⅱ:白色粉末(氯仿-甲醇)。 Liebermann-
Burchard反应呈阳性。 IR(KBr):3425, 1693(C=
O), 1641(C=C), 1461, 1376 , 1050cm-1。EI-MSm/
z:472[ M+ ] , 248, 233, 219, 203, 189 , 133。1H-NMR
(Py-d5)δ:0.93, (3H, d, J=6.2Hz, CH3), 0.97(3H,
d, J=3.3Hz, CH3), 1.00(6H, s, CH3 ×2), 1.19
(3H, s, CH3), 1.25(6H, s, CH3 ×2), 3.38(1H, d, J
=9.5Hz, 3-H), 5.43(1H, br, s, 12-H), 11.99(1H,
s, br, 28-COOH);13C-NMRδ:48.0(C-1), 68.4(C-
2), 83.7(C-3), 39.4(C-4), 55.8(C-5), 18.9(C-6),
33.6(C-7), 40.1(C-8), 48.2(C-9), 38.5(C-10),
23.7(C-11), 125.5(C-12), 139.5(C-13), 42.6(C-
14), 28.8(C-15), 25.0(C-16), 48.2(C-17), 53.7
(C-18), 39.8(C-19), 39.5(C-20), 30.0(C-21),
37.5(C-22), 29.5(C-23).17.5(C-24), 17.5(C-
25), 17.5(C-26), 23.9(C-27), 177.4(C-28), 17.5
(C-29), 21.4(C-30)。以上数据与文献〔5〕基本一
致 ,故鉴定化合物 Ⅱ为 2α, 3β -二羟基乌苏 -12-烯-
28-酸(corosolicacid)。
化合物 Ⅲ:白色针晶(氯仿-甲醇)。 Liebermann-
Burchard反应呈阳性 。IR(KBr):3420(OH), 2900,
1690(C=O), 1640(C=C), 1385, 1372, 1325, 1305,
1270 cm-1。 EI-MSm/z:456 [ M+ ] , 438, 248, 235,
207, 203, 189, 133, 119, 69。1H-NMR(CDCl3)δ:0.75
(3H, s), 0.77(3H, s), 0.89(3H, s), 0.91(3H, s),
0.93(3H, s), 0.99(3H, s), 1.13(3H, s), 2.82(1H,
m, 18-H), 3.22(1H, m, 3-H), 5.28(1H, brs, 12-
H);13C-NMRδ:38.4(C-1), 26.9(C-2), 76.8(C-
3), 38.5(C-4), 54.8(C-5), 18.0(C-6), 32.7(C-7),
39.3(C-8), 47.0(C-9), 36.6(C-10), 23.2(C-11),
121.5(C-12), 143.7(C-13), 41.6(C-14), 28.0(C-
15), 25.7(C-16), 45.8(C-17), 40.8(C-18), 46.4
(C-19), 29.5(C-20), 33.8(C-21), 32.4(C-22),
30.4(C-23).16.7(C-24), 15.5(C-25), 17.0(C-
26), 27.0(C-27), 183.7(C-28), 32.9(C-29), 23.5
(C-30)。1H-NMR、13C-NMR数据与文献〔6〕报道的齐
墩果酸(oleanlicacid)一致 。
化合物 Ⅳ:白色粉末 (丙酮)。 IR(KBr):3428
(OH), 1694 (C=O), 1638 (C=C), 1461, 1378,
1051cm-1。EI-MSm/z:472(M+, 2), 454, 437, 248,
203, 189, 113。1H-NMR(CD3OD)δ:0.81, (3H, s),
0.82(3H, s), 0.90(3H, s), 0.94(3H, s), 1.01(6H,
s), 1.02(3H, s), 1.16(3H, s), 2.86(1H, m, 18-H),
2.90(1H, d, J=9.6Hz, 3-H), 3.62(1H, m, H-2),
5.24(1H, brs, 12-H);13C-NMR(CD3OD)δ:48.4(C-
1), 69.5(C-2), 84.5(C-3), 40.6(C-4), 56.7(C-5),
19.7(C-6), 33.7(C-7), 40.6(C-8), 48.4(C-9),
39.4(C-10), 24.1(C-11), 123.4(C-12), 145.3(C-
13), 42.8(C-14), 28.9(C-15), 24.7(C-16), 47.7
(C-17), 43.0(C-18), 47.2(C-19), 31.6(C-20),
35.1(C-21), 33.9(C-22), 29.4(C-23).17.8(C-
24), 17.2(C-25), 17.5(C-26), 26.5(C-27), 181.8
(C-28), 34.0(C-29), 24.2(C-30)。1H-NMR、13C-
NMR数据与文献 〔7〕报道的数据基本一致 ,因此鉴定
化合物 Ⅳ为 2α-羟基齐墩果酸 (2α-hydroxyoleanolic
acid)。
化合物Ⅴ:白色针晶(氯仿)。 Liebermann-Bur-
chard反应呈阳性 。IR(KBr):3430(OH), 2933(C=
H), 2863 , 1634(C=C), 1465, 1380, 1060, 956 cm-1。
EI-MSm/z:414 [ M+ ] , 399, 381, 273。1H-NMR
(CDCl3)δ:0.67, (3H, s, 18-CH3), 1.01(3H, s, 19-
CH3), 0.92(3H, d, J=6.3Hz, 21-CH3), 0.84(3H, t,
J=7.5Hz, , 29-CH3 ), 0.83(3H, d, J=6.0Hz, 26-
CH3), 0.81(3H, d, J=7.0Hz, 27-CH3), 3.53(1H,
m, 3-H), 5.35(1H, d, J=3.6Hz, 6-H);13 C-NMR
(CDCl3)δ:37.3(C-1), 31.6(C-2), 71.8(C-3), 42.3
(C-4), 140.6(C-5), 121.6(C-6), 31.9(C-7), 31.9
(C-8), 50.1(C-9), 36.2(C-10), 21.1(C-11), 39.7
(C-12), 42.3(C-13), 56.8(C-14), 24.4(C-15),
28.3(C-16), 56.0(C-17), 12.0(C-18), 19.9(C-
19), 37.3(C-20), 18.8(C-21), 34.0(C-22), 26.1
(C-23).45.8(C-24), 29.2(C-25), 19.9(C-26),
19.5(C-27), 23.1(C-28), 12.0(C-29)。以上数据
与文献〔8〕报道的 β -谷甾醇的数据一致 ,故鉴定化合
物Ⅴ为 β-谷甾醇(sitosterol)。
参 考 文 献
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(2008-04-21收稿)
延胡索甲素和延胡索乙素的电喷雾质谱研究
孙明谦 1 ,卢建秋 1 ,郜　欣2 ,张宏桂 2＊ ,王春国 1
(1.北京中医药大学 ,北京 100102;2.吉林省药物研究所 ,吉林长春 130061)
　　摘要　目的:对延胡索甲素和延胡索乙素在电喷雾质谱下的裂解途径进行研究。方法:采用高效液相-电喷雾
串联质谱(HPLC-ESI-MSn)对其样品进行测定。结果:在正离子模式下 ,延胡索甲素和延胡索乙素围绕碳氮键进行
开环裂解 , 碎裂成苯二亚甲基和四氢异喹啉两部分 , 形成其鉴定的主要碎片离子。结论:本实验为该类化合物的分
析鉴定提供有效的质谱方法。
关键词　延胡索甲素;延胡索乙素;高效液相-电喷雾串联质谱;裂解途径
中图分类号:R284　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2008)11-1671-02
作者简介:孙明谦 ,男 ,博士研究生;Tel:13810838761, E-mail:smqsmqsmq@sohu.com。＊通讯作者:张宏桂 ,男 ,博士 ,教授 ,博士生导师;E-mail:Zhanghg4@163.com。
　　延胡索又名延胡 、玄胡索 、元胡索 、元胡 ,为紫堇
科紫堇属植物延胡索部分种类的干燥块茎 。具有活
血散瘀 、理气止痛的功效 。现在临床主要集中用于
各种疼痛 、心血管疾病及痛经等〔1〕。延胡索中的主
要成分是原小檗碱型生物碱〔2〕 , 临床研究具有活
血 、行气 、止痛的作用 。延胡索甲素和延胡索乙素是
其中的代表成分 。对中药及其复方制剂的化学成分
分析是阐明其作用机制和物质基础的重要环节 ,质
谱提供化合物分子量和碎片离子的信息与其结构密
切相关 ,可为中药中的化学成分归类及鉴定提供依
据 。液相与质谱联用技术结合了液相分离和质谱定
性的优势 ,简化了样品的分析和分离过程 ,还可对微
量成分进行分析 ,与常规的中药成分分析鉴定方法
相比有较大优势 。然而 HPLC-MS尚未建立数据库 ,
无法像 GC-MS一样提供参考结构 ,通过对更多化合
物裂解途径的推导 ,有助于提供鉴定各化学成分的
指标离子 ,促进质谱数据库的建立 ,从而提高中药化
学成分的分析效率 。本文利用 HPLC-ESI-MSn技术
对延胡索中的延胡索甲素和延胡索乙素裂解途径进
行研究 ,为该类化合物的检测建立一种更为简便和
快速的方法 ,也为其复方制剂的深入研究奠定基础 。
1　实验部分
1.1　仪器与试剂　Agilent1100系列液 -质联用仪:
AglientTrapxctplus型多级离子阱质谱仪 、高压二元
梯度泵 、二极管阵列检测器 、自动进样器 、柱温箱 、
chemstations化学工作站等 (美国安捷伦公司)。色
谱柱:AgilentC18(4.6 mm×250 mm, 5 μm),延胡索
甲素和延胡索乙素(纯度大于 98%,中国药品生物
制品检定所),甲醇(色谱纯 ,美国 Fisher公司);水
为双蒸水并经 0.45μm滤膜过滤。
1.2　方法
1.2.1 　检测条件:ESI离子源 ,离子源温度 350℃,
毛细管电压 3000eV,正离子检出模式 ,雾化压力 40
psi,干燥氮气流速 10 L/min,扫描范围:100 ～ 1000
m/z。
1.2.2 　样品处理:将延胡索甲素和延胡索乙素精
密称取各 1 mg,置于 25ml量瓶中 ,甲醇溶液稀释至
刻度 ,摇匀 。样品经 0.45 μm滤膜过滤后 ,注入液
质联机中进行质谱分析 。
2　结果与分析
通过对质谱检测结果的分析 ,笔者对延胡索甲
素和延胡索乙素的裂解途径进行了如下推导 〔3-5〕。
·1671·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 31卷第 11期 2008年 11月