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牛尾菜的组织培养和快速繁殖



全 文 :·生物技术· 北方园艺 2007(12):196
第一作者简介:邵美妮(1975-),女,讲师, 博士 ,主要从事野生植物
资源的开发与利用方面的研究。E-mail:smnxsj@yahoo.com.cn。
通讯作者:李天来。 E-mail:ltl@syau.edu.cn。
基金项目:辽宁省教育厅高等学校科学研究资助项目
(202050782);沈阳农业大学校青年基金资助项目。
收稿日期:2007-07-28
牛 尾 菜 的 组 织 培 养 和 快 速 繁 殖
邵 美妮 , 李天 来 , 冯 建云
(沈阳农业大学园艺学院 ,辽宁沈阳 110161)
中图分类号:S 644.603.6 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2007)12-0196-01
1 试验材料
牛尾菜(Smilax riparia A.DC)的幼嫩茎段。
2 培养条件
以MS为基本培养基。诱导芽培养基:(1)MS+
6-BA 2.0 mg/ L(单位下同)+NAA 0.1;(2)增殖培养基:
MS+6-BA 1.0+NAA 0.1;(3)继代和壮苗培养基:MS+
6-BA 1.0 +NAA 0.5;(4)生根培养基:1/2 MS+NAA
0.2。所有培养基中均加入 3.0%蔗糖 、0.7%琼脂 ,
pH 5.8。培养温度为(23 ±2)℃, 光照度为 2 000 ~
3 000 lx ,培养时间为 12~ 16 h/d。
3 生长与分化情况
3.1 无菌材料的获得
取当年的嫩枝 ,流水冲洗一段时间 ,切割1 cm 左右
的小块(至少具有 1个芽)。在无菌条件下用 75%乙醇
溶液浸泡杀菌30 s ,再用 0.1%的升汞溶液灭菌5min ,最
后用无菌水冲洗3 ~ 4次 ,接种到培养基(1)上。
3.2 芽的诱导
无菌苗在培养基(1)上 ,经过 25 d后腋芽开始分化 ,
产生 2 ~ 3黄绿色小芽。
3.3 芽的增殖
将小芽移入培养基(2)中 ,经过 20 d后可分化出许
多小芽。将这些丛生芽切割成 1 cm×1 cm 小块 ,移入
培养基(2)中 ,每隔25 d继代1次.每次以7 ~ 8倍的速度
增殖(见图),继代时不能以单芽增殖 ,单芽的增殖率很
低。把这些芽移入培养基(3)中 ,经过20 d生长 ,将具有
3~ 4对小叶的苗从基部切下 ,再转到培养基(4)中 ,进行
生根培养。
3.4 生根与移栽
试管苗在培养基(4)上培养 30 d ,从小苗基部切口
处产生4 ~ 5条根 ,根长达2cm 左右 ,生根率100%,这些
苗可进行移栽。幼苗移栽前 ,先打开瓶塞置于室温下锻
炼7 d ,以培养基不染菌为宜 ,洗去根部的琼脂 ,移入事先
消毒的珍珠岩中 ,置于温室小拱棚内 ,移栽后 7 d内进行
50%~ 70%遮荫。保证温度在25℃左右 ,湿度在 85%左
右 ,20 d后逐渐移出塑料薄膜 ,成活率85%以上。
4 研究进展
牛尾菜又称草菝葜、白须公 、软叶菝葜 ,东北地区俗
称龙须菜 ,属于菝葜科(Smilacacea)菝葜属(Smilax),为
多年生草质藤本。早春其嫩茎叶可以食用 ,鲜嫩适口 ,
营养价值非常高 ,可谓野菜中之精品。同时其根状茎可
供药用 ,有活血散瘀 、祛痰止咳等作用;又是我国东北地
区多种植物资源中值得进一步筛选的抗癌植物种类之
一。牛尾菜作为一种蔬菜日益受到广大消费者的青睐 ,
早春蔬菜淡季时 ,掐取其嫩茎叶成捆 ,在市面上销量极
佳 ,市价达 8 ~ 10元/kg ,远远高于其它栽培蔬菜 ,其价
格可观 ,且数量有限 ,供不应求。由于采摘的野生牛尾
菜老嫩不一 ,产品供应常受季节限制 ,再加上山区群众
盲目的采挖 ,资源将不断减少。采用组织培养方法快速
繁殖 、常年供应新鲜的牛尾菜是一条值得考虑的途径。
目前尚未见到牛尾菜组织培养和快速繁殖的报道。
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