全 文 ：试验研究 2011.2
3 结论与讨论
（1） 任何生物体由于受其本身生物学特性的影
响，无论生境如何适宜，其生长量都有一个极限值，
不会无限增长，竹柳当然也不会例外。 因此，如果株
行距过大， 竹柳个体在丰富的营养空间里达到其生
长的最大极限后，无法充分利用充裕的营养空间，势
必造成地力资源的浪费，达不到预期的经济效果；而
株行距过小不但引起林木对地上部分阳光和空间营
养元素的竞争， 而且还会引起林木地下部分对水分
和养分的恶性竞争[3]。
（2）通过对试验结果综合进行评估，江苏森茂生
态科技园内， 竹柳栽培的最佳株行距为 2 m×1.5 m。
这样的株行距有利于竹柳充分利用空间， 合理利用
光能，建立比较科学的林地生态系统。
（3） 合理的株行距布局必须要与适宜的造林密
度结合起来才能充分利用立地资源， 产生最大的经
济效益。 密度不能等同最后株行距，而株行距能决定
密度。 如何合理安排种植密度和株行距，还需进一步
探讨。
（4）我国是一个多生态类型的国家，在不同的生
态区，竹柳栽培应有不同的最佳株行距，需要在不同
的生态区进行探讨。
参考文献
[1]金丹．超速生树之王——美国竹柳[J]．金点子生意，2010（8）：22.
[2]高峰 ．美国竹柳将在中国掀起造林热潮 [J]．大众商务 ，2010
（3）：59.
[3]苏金乐．园林苗圃学[M]．北京：中国农业出版社，2003：83.
宝铎草 （Disporum sessile D．Don） 又称淡竹花，
属于百合科宝铎草属多年生草本植物， 生长于山坡
草地、 林下或灌木丛中， 在我国的辽宁、 陕西、 云
南、 华北、 华南等地有分布 [1-2]。 宝铎草的根和根
茎可作药用， 具有清肺化痰、 健脾消食、 舒筋活血
等功效。 能治肺热咳嗽、 肺痨咳血、 食积胀满、 风
湿脾疼、 腰腿疼和骨折等疾病 [3]。 由于宝铎草具有
多种药用价值， 多年来人们都在广泛采集药用； 再
加之环境的污染破坏， 不仅使这种药用植物的分布
区越来越小， 而且数量也越来越少。 虽然宝铎草在
野生的条件下是通过种子繁殖的， 但现在人们几乎
看不到宝铎草的种子。 现在， 在辽宁的南部地区只
有庄河的步云山才有少量的宝铎草。 为了保护这种
野生资源， 满足人们药用栽培对种苗的需求， 我们
对宝铎草进行了组织培养和快速繁殖的研究。 虽然
目前已多有百合科植物组织培养研究的报道 [4-8]，
但迄今未见宝铎草属植物组织培养及快速繁殖研究
的报道。
1 材料和方法
1.1 材料
9 月下旬，于大连庄河的步云山将野生的宝铎草
挖回来后，栽在花盆中，翌年放在温室中，经过精心
管理，8月中下旬果实成熟后，除掉果皮，可获得红褐
色的的种子，作为研究的试验材料。
宝铎草组织培养及快速繁殖的研究
徐 娜 宁淑香 于 爽 宋 阳
（辽宁师范大学生命科学学院 大连 116029）
摘要：为保护宝铎草的野生资源，我们以胚轴作为材料，进行了愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、
不定芽的分化继代、试管苗的生根、试管苗的移栽和移植的研究，建立宝铎草的快速繁殖技术。 结
果证明：N6+BA0.4 mg/L+2,4-D1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L 是宝铎草胚轴愈伤组织诱导培养的理想
培养基； MS+BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L 是宝铎草愈伤组织分化培养的理想培养基； MS+BA
1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+ GA30.5 mg/L 是宝铎草不定芽分化继代培养的理想培养基 ；MS+
NAA0.1 mg/L+IAA1.0 mg/L 是宝铎草生根培养的理想培养基；移植到山坡上的试管苗保持了野生
宝铎草的生物性状，且生长旺盛。
关键词：宝铎草；组织培养；快速繁殖
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2011.2 试验研究
1.2 材料灭菌及无菌苗的获得
将获得的种子与湿河沙混合后在冰箱中冷冻
60 d后将种子挑出，用清水洗净后进行灭菌。 灭菌方
法参见 《毛脉山莴苣再生体系建立的研究》（参考文
献［9］）。
1.3 培养条件
培养条件参见 《毛脉山莴苣再生体系建立的研
究》（参考文献［9］）。
1.4 试验方法
1.4.1 不同基本培养基对胚轴愈伤组织诱导的影响
试验 当由种子发出的幼苗长到高 1～1.5 cm 时，除
掉叶片，将其切成长 0.1~0.2 cm 胚轴段，分别接种到
以 MS、 1/3MS、 1/4MS、 B5、 White、 LS 和 N6 为基
本培养基，附加 BA 0.4 mg/L +2,4-D 1.5 mg/L +NAA
0.2 mg/L的培养基上， 进行下胚轴的愈伤组织培养。
下胚轴的愈伤组织诱导试验重复 2 次， 每种培养基
接种 100个材料。
1.4.2 不同浓度激素配比对愈伤组织分化的影响试
验 把上述继代培养的愈伤组织分散成颗粒状后，
接种到以 MS、1/3MS、1/4MS、B5、White、LS 和 N6 为基
本培养基，附加不同浓度激素配比的培养基上，进行
愈伤组织的分化培养。 愈伤组织分化试验重复 2次，
每种培养基接种 100个材料。
1.4.3 不定芽的分化继代影响试验 把上述由愈伤
组织分化培养的不定芽从基部切下后， 分别接种到
以 MS+BA 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L 为基本培养基，
附加浓度分别为 0 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L
的 GA3培养基上，进行不定芽的分化继代培养。愈伤
组织分化继代培养试验重复 2 次， 每次继代培养 5
代，每种培养基接种 100个材料。
1.4.4 不同基本培养基对不定芽的生根培养的影响
试验 把上述继代培养的不定芽从基部切下后， 分
别接种到以 MS、 MS、 1/2MS、 1/3MS、 1/4MS、 B5、
White、 LS为基本培养基， 附加 NAA 0.1 mg/L +IAA
1.0 mg/L 的 GA3 的培养基上， 进行不定芽的生根培
养。 生根试验重复 3 次， 每种培养基接种 200 个材
料。
1.4.5 试管苗的移栽 在日光温室中， 把试管苗从
培养瓶中取出后，洗净根部的培养基，移栽到下面为
肥沃的园土、上面为一层干净河沙的温室花盆中。 移
栽后保持没有直射光、 温度为 16℃～28℃、 湿度为
90%的环境条件，进行正常管理。 移栽试验重复了 2
次，每次移栽 400株试管苗。
2 结果
2.1 不同基本培养基对胚轴愈伤组织诱导的影响
接种后 60d 统计， 结果见表 1。 由表 1 可见，以
MS 和 N6 为基本培养基胚轴的愈伤组织诱导率较
高，长势较好。 观察表明，在以 MS 和 N6为基本培养
基的培养基上，培养 20 d左右可见生长出愈伤组织，
培养到 60 d就可以培养形成浅绿色的、 由大小不等
的愈伤组织颗粒状组成的、直径 1 cm 左右的愈伤组
织。 将由 MS 和 N6 两种基本培养基诱导培养的愈伤
组织分散为颗粒状后， 接种到相同的基本培养基上
进行愈伤组织的继代培养。 继代培养试验重复了 2
次，每次继代培养 4 代，每种处理接种培养 100 个愈
伤组织颗粒。 继代培养的结果证明：以 MS 为基本培
养基继代培养的愈伤组织不仅生长缓慢， 而且愈伤
组织表面呈松软的灰白色，继代培养到 3 代时，所培
养的材料几乎不生长。 以 N6为基本培养基继代培养
的愈伤组织不仅生长较快，而且所培养的愈伤组织呈
均匀的绿色颗粒状。 以上结果说明：N6+BA 0.4 mg/L+
2,4-D 1.5 mg/L +NAA 0.2 mg/L 这一培养基是宝铎草
胚轴愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基。
2.2 不同浓度激素配比对愈伤组织分化的影响
培养到 55 d 时统计，结果见表 2。 由表 2 可见，
不同浓度的 BA 与不同浓度的 IAA 配合使用不能诱
导愈伤组织分化 ， 不同浓度的 BA 与不同浓度的
NAA 配合使用能诱导愈伤组织分化。 其中在 BA 的
浓度为 1.0 mg/L 与 NAA 0.1 mg/L 的培养基上培养
的愈伤组织分化率较高，分化的不定芽长势好。 观察
还表明， 在 BA 的浓度为 1.0 mg/L 与 NAA 0.1 mg/L
的培养基上培养的愈伤组织， 培养到 15 d 左右在约
半数的愈伤组织颗粒表面形成不定芽芽点，接着，伴
随着分化数的增加，先分化的不定芽在生长的同时，
又会在基部分化出 2~7 个不定芽，使其形成丛生状。
培养到 55 d时，不仅分化率达到了 93%、平均每个培
养颗粒分化出 4.6 个高 0.5 cm 左右的不定芽数，而
且分化的不定芽长势较好 。 以上结果说明 ：MS+
表 1 不同培养基对胚轴愈伤组织诱导的影响
注：++长势好；+长势一般；-不生长。 （下表同略）
基本培养基 愈伤组织诱导率（%） 愈伤组织长势
MS 78 ++
1/3MS 24 ++
1/4MS 13 +
B5 0 -
White 0 0
LS 0 -
N6 85 ++
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表 2 不同浓度激素配比对愈伤组织分化的影响
BA（mg/L） IAA（mg/L） NAA（mg/L） 分化数 分化率（%） 平均分化不定芽数/颗粒 长势
0 0 0 0 0 0 -
0.5 0.1 0 0 0 0 -
0.5 0.3 0 0 0 0 -
0.5 0.5 0 0 0 0 -
0.5 0 0.1 57 57 2.3 ++
0.5 0 0.3 42 42 2.3 +
0.5 0 0.5 16 16 1.6 +
1.0 0.1 0 0 0 0 -
1.0 0.3 0 0 0 0 -
1.0 0.5 0 0 0 0 -
1.0 0 0.1 93 93 4.6 ++
1.0 0 0.3 53 53 2.8 +
1.0 0 0.5 51 51 1.2 +
BA1.0 mg/L +NAA0.1 mg/L 这一培养基是宝铎草愈
伤组织分化培养的理想培养基。
2.3 不定芽的分化继代影响
培养到 40 d 时观察统计证明： 在附加浓度为
0.5 mg/L 的 GA3 培养基上，分化培养的效果较好，由
1 个不定芽能分化培养出 4.2 个高 1 cm 以上、 具有
4~6 个叶片、 生长较旺盛的不定芽。 这说明 MS+BA
1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L + GA 30.5 mg/L 这种培养
基是宝铎草不定芽分化继代培养的理想培养基。
2.4 不同基本培养基对不定芽的生根培养的影响
培养到 30 d 时观察统计表明， 在以 MS 为基本
培养基的生根培养基上， 不仅所培养的不定芽能生
长成为株高 3 cm 左右、叶片伸展、生长较旺盛、平均
具有 5.6 条根的试管苗， 而且平均生根率达到了
92.5%，同时 3 次重复生根试验的结果一致。 这说明
MS+NAA 0.1 mg/L +IAA 1.0 mg/L 这种培养基是宝铎
草生根培养的理想培养基。
2.5 试管苗的移栽和移植
移栽后 13 d， 成活的试管苗可见发出新叶，30 d
观察统计成活率为 89%。 移栽成活的试管苗前 40 d
生长缓慢，而后生长速度加快。
把在温室花盆中移栽成活的试管苗， 于 6 月上
旬分 2 次移植到大连市甘井子区石门山的山坡上，
共移植 800 株。 结果证明： 移植的试管苗可以保持
野生宝铎草的原有生物学性状， 成活率为 99%， 生
长旺盛。
3 讨论
我们以宝铎草胚轴作为试验材料， 进行了愈伤
组织的诱导、分化，不定芽的分化继代、试管苗的生
根、移植等研究，成功地建立了宝铎草的快速繁殖体
系，为人工保护和栽培宝铎草奠定了技术基础。 宝铎
草胚轴愈伤组织诱导和分化培养的理想培养基分别
是 N6+BA 0.4 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L
和 MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L；MS+BA 1.0 mg/L
+NAA 0.1 mg/L+GA 30.5 mg/L 是宝铎草不定芽分化
继代培养的理想培养基 ； MS +NAA 0.1 mg/L +
IAA 1.0 mg/L 是宝铎草生根培养的理想培养基。
移植到山坡上的试管苗成活率很高且保持了野
生宝铎草的生物学性状，这可能有两点原因，一是试
验材料本身具有很强的生长势， 对环境有很好的适
应性； 二是生长激素在试管苗移植到山上后仍发挥
着作用。
采用不定芽分化培养的方法可以进行快速繁
殖，40 d的繁殖系数为 4.2， 按照这个速度计算，1 年
能繁殖出 40 多万个后代，每年都可以繁殖大量的试
管苗，从而达到快速繁殖的目的。
参考文献
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