全 文 ：第 3 1 卷
V o l
.
3 1
第 1 期
N o
.
1
河 南 职 业 技 术 师 范 学 院 学 报
J
o u r n a l o f H e n a n V o e a t io n
一
T e e h n i e a l T e a e h e r s C o l l e g e
2 0 0 3 年 3 月
M a r
.
2 0 0 3
长寿花组织培养的研究
崔广荣 ,王 彦
(安徽技术师范学院农学系 ,安徽 凤 阳 23 3 10 0)
摘要 : 以长寿花为材料 ,研究 了其茎尖和带腋芽茎段组 织培养技术 。 在组培快繁过程中 , 细胞分裂素 B A 和生
长素 N A A 对带腋芽茎段和茎尖的分化有促进作用 ;生长素 BI A 和 N A A 共同作用促进根 的生长 。 试验证明 ,
当茎尖和带腋芽茎段在 M S + B A [ 1 . 。 m刘月 + N A A 0[ . 3 m。 月的培养基中培养 ,有利 于芽的分化增殖 ,其繁殖系数为
2
.
67
;而在培养基 12/ M s + N A A 0[ . 5 0 51/ : + BI A 加 . 3m酬: 中培养 , 有利于长寿花幼苗生根壮苗 。
关键词 : 长寿花 ; 组织培养 ; 细胞分裂素 ; 生长素
中图分类号 : 6 8 5 . 9 9 文献标识码 : A 文章编号 : 1 0 0 3一 4 8 2 X ( 2 0 0 3 ) 0 1一 0 0 5 1一 0 3
S t u d y o n T i s s u e C u l t u r e o f K a l a n e h o e B l o s s f e l d i a n
C U I G u a n g
一 r o n g
, e t a l
.
( A g r o n o m y D e p a r tm e n t o f A n h u i T e e h n i e a l T e a e h e r
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,
F e n g y a n g
,
A ih u i
,
2 3 3 1 0 0
,
C h i n a )
A b s t r a e t : T h e t i s s u e e u l t u r e t e e h n o lo g y a b o u t s h o o t
一 t i p a n d s t e m w it h a u x ill a r y b u d o f 犬 a za n c h o e
B l o s s j毛l d i a n , w h ie h w e r e u s e d a s e x p l a n t , w e r e s t u d ie d . In t h e p r o e e s s o f i n v it r o 。 u l t u r e , b o t h 。 y t o k i n i n s B A
a n d
a u x i n N A A h a v e s ig n i fi e a n t e f f e e t s o n t h e p r o l if e r a t io n o f a u x il l a r y b u d s t e m a n d s h o o t
一 t i p
.
A u x in N A A
e o m b in e d w it h I B A e a n p r o m o t e t h e g r o w t h o f r o o t
.
T h e r e s u l t
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a t m o n t h l y p r o p a g a t io n i n d e x o f
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a u x il la r y b u d s t e m w e r e e u lt u r e d i n M S m
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u m s u p p le m e n t e d w i t h 1
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M
e a n w h il e
, t h e m e d i u m w a s
s u i t a b le t o r o o t i n g a n d m a k i n g p la n t l e t s s t r o n g o n th i s e o n d i t io n
.
K e y w o r d s : 走a z a n c人。 。 况 o s sfe l d i a n
, t i s s u e e u l t
u r e ,卿 t o k i n i n , a u x in
利用长寿花茎尖和带腋芽茎段 、 叶片等等为外植体进行快繁报道较多川 , 其基本实验流程为首先进
行愈伤组织的诱导及继代培养 ,再进行愈伤组织的分化和芽的增殖 ,而后进行根的诱导 。 本试验利用龙
爪长寿花的茎段和茎尖 为材料 ,不经过愈伤组织阶段 , 而直接利用侧芽和顶芽进行快繁增殖方面的尝
试 , 同时以不同激素进行组合 ,试图在其生长的各个阶段 ,选择出适合长寿花芽增殖及生根 的最佳培养
基 , 为其快繁及大规模工厂化生产提供依据 。
1 材料与方法
1
.
1 材料与主要药品
供试材料龙爪长寿花由安徽技术师范学院种植科技园提供 。 叫噪丁酸 (I B A ) 、 节基腺嚓吟 ( 6一 B A ) 、
蔡乙酸 ( N A A )购于中国医药集团上海化学试剂公司 。
L Z 培养基
1
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2
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1 芽增殖培养基及其激素组合 以 M S 为基本培养基 ,添加各种不同浓度的激素 B A 、 N A A ,见表
收稿 日期 : 2 0 0 2 一 1 0 一 2 .4
作者简介 :崔广荣 ( 196 -6 ) , 男 , 安徽长丰县人 , 硕士 , 讲师 。
河 南职业技术师范学院学报 2 0 0 3年
1
,
5
.
89 / L 的卡拉胶 , 59 / L 活性炭 , 30 9八J 蔗糖 , p H 值调到 6 . 0
表 1 芽增殖培养基中加入 B A 、 N A A 的组合
序号 A B B A ( m g / l ) N A A ( m g / L )
表 2 生根培养基中加入 IB A 、 N A A 的组合
序号 A B I B A (m g / l ) N A A (m g / I )
0
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1
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.
1
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2
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2 生根培养基及其激素组合 以 1 2/ M S 为基本培养基 , 添加各种不同浓度激素 BI A 、 N A A (见表
2 )
,卡拉胶 5 . 89 / L ,蔗糖 3娘 / L , p H 值调到 6 . 。 。
1
.
3 处理方法
1
.
3
.
1 芽的增殖 我们设计 了二 因素随机区组试验 ,每个处理 因素分别设置了 3 个水平 , 即每个处理
接 3瓶 ,每瓶接 4 个茎尖或带腋芽茎段外植体 。 取材时取长寿花茎尖或带腋芽茎段 , 用 自来水冲洗后 ,用
70 %酒精进行表面消毒 3 05 , 以无菌水洗 4 次 ,再用 0 . 1%氯化汞溶液消毒 s m in , 然后用无菌水洗 4 次 。
在无菌条件下 ,将嫩茎切为 cI m 左右的茎尖和带 1~ 2 个节的茎段 ,接种到芽增殖培养基上 ,置温度 25
一 28 ` C 、 光照强度 10 0 0~ 20 o 0I J x 、 每天照光时间 8~ 1h0 的条件下培养 , 注意观察芽的分化情况 ,接种后
的 3 o d 进行芽增殖统计 。
1
.
3
.
2 生根壮苗 每个处理因素分别设置了 3 个水平 , 即每个处理接 3 瓶 ,每瓶接 4 个芽 。
2 结果与分析
2
.
1 芽的增殖
表 3 的结果表明 ,将外植体接种在不 同诱导
培养 基上 , 在 激素 B A 浓度 为 0 . 1一 1 . Om g / L ,
N A A 的浓度为 0 . 1~ 0 . s m g / I J 时 , 结果发现都能
长出不定芽 , 在 B A 浓度为 1 . o m g / L , N A A 浓度
为 0 . 3m g / L 时 , 能够较早分化 出不定芽 ,且不定
芽的增殖速度很快 , 繁殖系数可达 2 . 67 , 长势 良
好 。 通过对其折线图形 ( 图 l) 的分析 , 也可以观察
出长寿花分化的总体趋势 。 且在一定的范围内随
着 B A 、 N A A 浓度的增大 ,可 明显提高繁殖芽数
和繁殖系数 。 本试验中最适于长寿花分化和生长
的两种激素配比为 B A I . 。 rn g / , _ + N A A o . 。m : / l _ , 在此条
件下 ,长寿花繁殖系数为 2 . 67 。
表 3 B A 、 N A A 对芽增殖的影响
处理序号 B A N A A 芽增殖
(m g / I
子
) ( m g / I
J
) (个 ) 繁殖系数
111八6tl0é今`庄工
6275031.……1110自9曰.1乙QO口9白或甘00“渡月1.工n爪ō卜ú11nj,目勺Jgó连L勺J乙乃乙1nj工a…001丈1.JI沮…011Q乙gd , .且几J101五.…00 . 50 . 5
0
.
3
0
.
5
经上述试验结果 的统计分析显示 , 不同浓度 B A 对芽增殖影响差异达到极显著水平 (F 一 6 . 8 >
OF
. 。 1一 6 . 2 ) ; 不同浓度 N A A 对这个指标上的差异也达到了显著水平 (F 一 5 . 57 > OF . 。 5 ~ 3 . 63 ) , 因此选
择适宜的 B A 和 N A A 浓度对长寿花芽增殖和生长极为重要 。
通过多重分析 比较 , A 3 、 B Z 为优 , A 3 与 A Z 无显著差异 。 A 3 与 A l 、 A Z 与 A l 达到了极显著差异 ;
B Z 与 B 3 无显著差异 , B Z 与 B l 、 B 3 与 B l 达到了显著差异 。 所以应选择 A 3 、 A Z 、 B 3 、 B Z 培养基 , 即 B A
l(
.
o m g / I
J
~ 0
.
sm g / )L + N A A (0
.
3m g L/ 一 0 . s m g / L ) 。
第 1 期 崔广荣等 : 长寿花组 织培养的研究
O JQ厅 l八01ó心月任 ng曰,1nU
级毕公供澎冶献羹
2 3 4 5 8 9 2 3 4 5 6 7 8 9
处理序号 处理序号
图 1 不同处理的月繁殖系数 图 2 每株平均根数
2
.
2 长寿花不定根诱导
取初代培养 35 d 的不定芽接到含不同 BI A 、 N A A 的 1 2/ M S 培养基中诱导生根 , BI A 和 N A A 按不
同 配 比组成 9 种培养基 (见 表 4 ) 。 表 4 的结 果表 明 , 一定浓 度 的 BI A 有利 于促进 根的生成 , 但在
1
.
o m g I/
J时 ,对根的生长有明显抑制作用 。 本试验培养基中激素 BI A 。 . s m。 _ + N A A o . 。 rn。 的组合最有利于
不定根的形成 。 在此条件下 ,每株经 1 d5 培养 , 生根数平均可达 8 . 3 。
3 结论与讨论
3
.
1 结论
在 长寿花的组培快繁过程 中 , 细胞分裂素 B A
和生长素 N A A 两者共同使用可促进芽的分化 , 两
者的适宜组 配 , 再添加 3%的蔗糖作 为碳 源 、 5%活
性炭 [’] 就成为长寿花分 化的最适 培养基 , 即 M S +
B A
I
.
otn sI/ + N A A
o
.
3 m g I/
+ 5写活性炭 。 生长素 N A A 、
BI A 两者在适宜浓度进行组配时 , 有利于不定根的
形 成 , 从 而 确 定 生 根 壮 苗 培 养 基 为 : 1/ 2M S +
N A M
。 . sm g /:
+ IB A
o
.
s m : / I 。
3
.
2 讨论
S k o o g 和 M il l e r 1 9 5 7 年提 出的有关植物激素
表 4 N A A 、 I B A 对生根的影响
处理序号 I B A
( m g / I
,
)
N A A
( m g / I )
每株平均数
(个 )一.0562971
控制器官形成 的学说困是植物组织培养 中进行激素组合研究的重要理论根据 。 本试验 中的 B A 、 N A A
对长寿花芽增殖影响的结果表明随着激素 B A 、 N A A 浓度增大 , 总体趋势是繁殖系数的增加 ,但两者的
比例必须适当 ,否则不利于芽增殖 ,会出现繁殖系数的减小现象 。 这也是与 S ko g 和 M il e r 的理论相符
合 。利用现有 的各种激素并探讨最适合长寿花快速繁殖的培养基 , 提高其繁殖系数是我们下一步工作的
重点 。
参考文献 :
〕 李芝强 , 张荣蛰 . 室内花卉— 长寿花仁J〕. 林木花卉 , 1 9 8 , ( 5 ) : 50 一 52 .〕 程广有 . 名优花卉组织 培养技术 [M 〕. 北京 :科学技术文献出版社 , 2 0 01 .
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