全 文 ：文章编号:1001-7380(2000)05-0032-03
假叶树的组织培养
仲　磊 ,李玉巧 ,蒋泽平 ,倪竞德
(江苏省林业科学研究院 ,江苏　南京　211153)
摘要:在假叶树组织培养过程中 , 各种激素的质量浓度(mg/ L):在愈伤组织阶段 , 细胞分裂素 ZT 以
1.0 、生长素 NAA以 0.3 为宜;分化阶段 , 细胞分裂素 BA 以 1.0 或 ZT 以 0.5 、生长素 NAA 以 0.1 为
宜;生根阶段以 0.3%活性炭 ,不加任何激素生根效果最好。
关键词:假叶树;组织培养;愈伤组织;分化
中图分类号:S722.3　　文献标识码:A
Tissue culture of Ruscus aculeatus L.
ZHONG Lei ,LI Yu-qiao , JIANG Ze-ping ,NI Jing-de
(Jiangsu Academy of Forestry , Nanjing 211153 , China)
Abstract:Experiments were performed sucessfully in the tissue culture of Ruscus aculeatus L.Callus from the
explant were induced best in MS medium containing 1.0 mg/ L ZT and 0.3 mg/L NAA.Callus abore-mentioned
could further differentiate into shoots in MS medium supplemented suitably with 1.0 mg/ L BA , 0.5 mg/L ZT
and 0.1 mg/ L NAA.The rooting process of cultures occured best under the condition of 1/2MS with 0.3% ac-
tive carbon , additive to no growth hormones.
Key words:Ruscus aculeatus L.;Tissue culture;Callus;Differentiation
　　假叶树(Ruscus aculeatus L.)原产南欧和
北非 , 是百合科假叶树属的一种常绿小灌
木[ 1] ,因其地上茎形状别致 ,颜色墨绿 ,高雅
悦目 ,且保存时间长 ,是插花配叶 、餐盘拼图
及盆栽观赏的优良材料 ,深受人们的喜爱。
假叶树属约 5种 ,江苏目前只引栽了假叶树
1种 ,通常采用分株繁殖 ,增殖速度很慢 ,故
尽管市场需求良好 ,但栽培数量仍然有限 ,且
多为盆栽观赏。
组织培养是提高繁殖系数的有效手段之
一 ,但针对假叶树的组织培养尚未见报道 ,因
此 ,开展假叶树的组织培养研究 ,无论在理论
上 ,还是在生产实践中 ,都有着重要的意义。
1　材料与方法
1.1　供试材料
由江苏省林业科学研究院提供假叶树 2
年生苗 ,取其新抽出的嫩绿色叶状枝。
1.2　培养基
第 27卷第 5 期 江　苏　林　业　科　技 Vol.27 No.5
2000年 10 月 Journal of Jiangsu Forestry Science &Technology Oct.2000
收稿日期:2000-06-25
基金项目:江苏省林业科学研究院青年基金
作者简介:仲磊(1976-　),女 ,江苏赣榆人 ,中专毕业 ,主要从事林木花卉组织培养研究工作。
1.2.1　诱导愈伤组织培养基:
(1)MS+BA 1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L;
(2)MS+BA 2.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L;
(3)MS+ZT 1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L;
(4)MS+ZT 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L;
1.2.2　分化培养基
(5)MS+ZT 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;
(6)MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;
(7)MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;
(8)MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;
(9)MS+ZT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;
(10)MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;
1.2.3　生根培养基
(11)1/2MS+C(活性炭)0.3%。
在上述各种培养基中均加蔗糖 3%,琼
脂0.7%,pH 调至 5.8 ～ 6.0。
1.3　培养方法[ 2 ,3]
切取地上茎的叶状枝 ,在无菌条件下 ,先
用70%乙醇消毒 20 s ,经杀菌后 ,用无菌水冲
洗4 ～ 5 次 ,再用消毒滤纸吸干表面水后 ,将
叶片剪成 0.4 ～ 0.6 cm2 的小块 ,接种到新鲜
的诱导愈伤组织的培养基上 ,置于室内培养
室培养 。室温(25±3)℃,每天光照 10 h 左
右 ,待长出黄豆大小的愈伤组织时 ,转至分化
培养基上培养 ,当长成完整的小植株时生根
即可移栽 。
2　结果与分析
2.1　杀菌条件
能否得到供试植物的无菌材料 ,是进行
组织培养的基本前提 ,也是能否成功的第一
步。杀菌条件(杀菌剂 、杀菌时间)选择试验
及结果列于表 1。
表 1　不同药品与时间对杀菌效果的影响
时间/min 升　汞(0.1%)
漂白粉
(10%)
次氯酸钙
(10%)
5 +++ - +
10 材料失去活性 + +
15 材料失去活性 ++ ++
　　在杀菌效果中:“ -”表示没有任何效果;“ +”表示杀菌
效果不明显;“ ++”表示效果较明显;“ +++”表示效果最
明显,去除细菌。
　　表 1表明 ,在升汞中杀菌 5 min效果最
好。另外 ,由于假叶树的叶状茎是革质的 ,如
扩繁初期无菌材料受细菌污染 ,仍然可以用
此方法杀菌。
2.2　愈伤组织诱导最适培养基选择
无菌材料在合适的培养基上 ,尽快形成
愈伤组织是获组织培养苗的关键步骤 ,因此 ,
通过筛选并得到最佳培养基是十分重要的研
究内容。试验结果见表 2。
由表 2可以看出 ,(1),(2),(3),(4)四种
培养基 ,对形成愈伤组织的时间和量的多少
无明显影响 ,但分化出绿色芽点的时间(4)号
培养基比(1),(2),(3)号分别提前约为 20 ,15
和 10 d ,因此 ,在诱导愈伤组织的培养基中添
加不同的细胞分裂素 、生长素及其配比关系
对加快芽的发育有着明显的影响。
表 2　不同转入天数添加不同激素对诱导愈伤组织和分化芽的影响
转入天数
培养基诱导情况
(1)MS+BA 1.0 mg/ L+
IAA 0.3 mg/ L (2)MS+BA 2.0 mg/ L+IAA 0.3mg/L (3)MS+ZT 1.0 mg/ L+IAA 0.3 mg/ L (4)MS+ZT 1.0 mg/ L+NAA 0.3mg/L
10～ 60 变化不明显 变化不明显 乳白色松散鱼籽状分化物＊ 乳白色松散鱼籽状分化物
60～ 80 乳白色鱼籽状分化物 乳白色鱼籽分化物 愈伤组织呈淡黄色 愈伤组织呈黑绿色
80～ 100 愈伤组织呈淡黄色 愈伤组织开始转绿 愈伤组织开始转绿 见黑绿色芽点
100～ 110 愈伤组织转绿 ,松散 愈伤组织转绿 出现绿色芽点 小芽及芽点增多
110～ 150 开始出现芽点 出现绿色芽点 小芽开始抽叶 , 芽点没有增多 抽出幼叶 ,长成植株
　　＊:刚转入时 ,愈伤组织呈淡黄色球状。
33第 5 期 仲　磊等:假叶树的组织培养
2.3　芽分化最适培养基的选择
愈伤组织在合适的培养基上分化或成
苗 ,是获得健壮组织培养苗的重要条件。通
过反复筛选(见表 3),尽管(5)～ (10)号 6种
在分化培养基上 120 d 左右均可形成小植
株 ,但从苗的数量和质量看 ,(6)、(9)号培养
基较为适宜 ,这说明在分化培养基中加入细
胞分裂素 BA或 ZT 适宜质量浓度比 KT 诱芽
效果好 ,添加细胞生长素 NAA 质量浓度以
0.1 mg/L 为宜 。
表3　不同激素和含量对芽形成和小植株生长的影
响
项　目 培　养　基(5)＊ (6) (7) (8) (9) (10)
愈块直径/ cm 1.8 2.3 1.8 1.6 2.1 1.5
芽数 5.0 8.0 5.0 2.0 7.0 3.0
苗高/ cm 2.0 2.5 1.8 1.6 2.5 2.2
长势 较壮 壮 较弱 较弱 壮 壮
　　＊:培养基序号。
2.4　生根及移栽
健壮的植株能否生根是移栽成活的关键 ,
将长至 2 cm 以上的小植株切下放入1/2 MS ,
加0.3%活性炭的培养基上生根 ,15 d后长出
2 ～ 3条不定根 ,简便易行 ,又节省成本 ,将生
过根的苗选净移栽 ,成活率达90%以上。
3　结语
将用于组织培养的假叶树无菌材料以
0.1%升汞液杀菌5 min ,在 ZT 1.0mg/L 、NAA
0.3 mg/L构成的培养基上诱导愈伤组织 ,在
BA 1.0 mg/L 或 ZT 0.5 mg/L ,NAA 0.1 mg/L
构成的培养基上芽分化 ,在1/2MS+0.3%活
性炭构成的生根培养基上进行诱导生根 ,最
终可获得假叶树小苗 。因此 ,认为利用该方
法来解决假叶树的快速繁殖问题是可行的。
参考文献:
[ 1] 　江苏省植物研究所.江苏植物志:上册[ M] .南京:江
苏人民出版社 , 1977.356.
[ 2] 　江苏省植物组织培养研究协会.经济植物组织培养
[M] .南京:江苏科学技术出版社 , 1988.34.
[ 3] 　李玉巧.朱鹿鸣.花叶芋的叶片培养[ J] .江苏林业
科技 , 1989 , 16(4):18-19.
·征订启事·
欢迎订阅 2001年《黑龙江林业》
《黑龙江林业》(《林业月报》)是黑龙江省林业厅主办的综合性期刊。设有:专家论坛 、工作
探索 、林海写真 、特别报道 、科技园地 、科普之窗 、法制天地 、九州绿影 、信息传真 、生活指南 、广
而告之 、五花山等栏目 ,融指导性 、科学性 、实用性 、知识性为一体 ,是广大林区职工 、专业户 、各
级干部 、林区青年 、院校师生及林业爱好者的忠实朋友和参谋。
《黑龙江林业》为月刊 ,大 16开本 ,48页 ,四封彩色印刷 ,每期定价 4.50元 ,全年 54.00元 。
在全国各地邮局办理订阅手续 。国内邮发代号为 14-73 ,国外代号为M490。本刊地址:黑龙江
省哈尔滨市经济开发区衡山路 10号。邮政编码:150090。
34 江　苏　林　业　科　技 第 27 卷