全 文 :吊丝球竹的组培快繁技术研究
徐强兴1 , 杨广超2
(1.湛江市农业技术推广中心 , 广东 湛江 524043;2.湛江市果树蔬菜研究所 , 广东 湛江 524049)
摘 要:对吊丝球竹离体培养的研究表明:采用当年生枝条半木质化的茎段 , 在 MS+6-BA 1.0 mg/ L 培养基上的
诱导效果最好 ,污染率最低 , 诱导率最高;增殖过程中将茎段平放接种在 MS+6-BA 5.0 mg/ L 培养基上的增殖倍数最
高;生根过程中将较成熟茎段与较幼嫩茎段切割分开并平放培养的生根效果最好 ,得到的苗数最多 , 生根培养以 1/2 MS
+NAA 1.0 mg/ L+IBA 1.0 mg/ L 培养基的效果最佳;生根苗移植于沙 、土(1∶1)混合基质中成活率可达 90%以上。
关键词:吊丝球竹;组织培养;茎段;快速繁殖
中图分类号:Q949.71+4.2;S336 文献标识码:A 文章编号:1004-874X(2007)02-0042-03
吊丝球竹杆高 8 ~ 12 m 、粗6 ~ 10 cm ,顶端弯曲弧
形 ,下垂呈钓丝状[ 1] ,是我国南方造林的首选竹种 ,目
前主要分布于广东 、广西 、海南等地 。吊丝球竹的竹材
可用于编织和制造各种农具 ,竹笋多加工成笋干 ,竹纤
维是优质的造纸原料。竹子传统的繁殖方法是“母竹
分株” ,这种方法繁殖系数低 ,若要大面积造林 ,竹种在
数量上很难满足要求。实践证明 ,竹子的组织培养快
速繁殖是目前最有效的一种繁殖技术 ,其最大的优点
是繁殖系数高 , 1个芽经 1年时间的培养即可繁殖数
万株苗 ,完全可以满足大面积造林的需要 。本试验通
过组培快繁技术繁殖吊丝竹并取得成功 ,对于满足造
林对竹子种苗的大量需求具有重要的意义。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为从广西柳州地区采集的生长旺盛的吊
收稿日期:2006-08-31
作者简介:徐强兴(1969-), 男 ,农艺师
丝球竹当年生枝条。
1.2 试验方法
1.2.1 芽诱导 、增殖及生根培养试验 试验以 MS或
1/2M S为基本培养基(每升加食用白糖 30 g 、卡拉胶 6
g ,调节 pH 值至 5.8),根据试验目的添加不同种类和
浓度的激素 。在超净工作台上切取供试的外植体 ,先
用消毒液(0.1%HgCl2 +0.5%吐温 -20)消毒 20
min ,再用无菌水冲洗 6 次 ,然后接入培养基中 。接种
后置于培养室中培养 ,控制温度为 26 ~ 28℃,光照强
度为 1 500 ~ 2 000 lx ,每天连续光照 10 h。
(1)诱导培养:将带单芽的成熟(完全木质化)茎
段 、半木质化茎段 、幼嫩(完全未木质化)茎段接种于
MS+6-BA 1.0 mg/L 诱导培养基中 ,接种后 30天调
查不同茎段对芽诱导的影响;另外 ,以最佳诱芽茎段
(半木质化茎段)作外植体 ,接种于添加不同激素浓度
或组合(6-BA 0.5 mg/L 、6-BA 1.0 mg/ L 、6-BA
2.0 mg/ L 、6-BA 3.0 mg/ L 、6-BA 1.0 mg/ L+NAA
0.1 mg/L 、6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.3 mg/L)的诱
导培养基中 ,以不添加激素的培养基作为对照 ,接种后
本试验通过喷施莲雾促花灵 、多效唑和催花
剂 ,结合环剥 、遮阴 、断根等措施 ,实现了印尼红莲
雾的反季节开花 ,并取得了比正造果更好的商品品
质和经济效益 。莲雾产期调控是一个复杂的问题 ,
是多因素综合作用的结果 ,为了能更方便 、高效地
实现莲雾产期调控 ,今后应结合花芽分化和激素进
行深入研究 。
参考文献:
[ 1] 肖邦森 , 谢江辉 , 雷新涛 , 等.莲雾优质高效栽培技术
[ M] .北京:中国农业出版社 , 2001:1-3.
[ 2] 王德男.莲雾提早开花调节产期之生产技术[ J] .兴农 ,
1990 , 251(1):17-25.
[ 3] 黄基倬 , 王德男.莲雾之合理化栽培管理[ J] .农业世界 ,
1991(222):22-29.
[ 4] 王德男.化学药剂及耕作处理对莲雾催花效果之影响
[ J] .果农合作 , 1992(540):27-30.
[ 5] 代正福.台湾莲雾栽培现状及研究进展[ J] .热带作物科
技 , 1995(2):34-38 , 33.
[ 6] 赖荣茂.莲雾以黑网遮光调节产期 ,食用安全没问题[ J] .
农业世界 , 1991(222):18-21.
[ 7] 赖荣茂 , 杨耀祥.遮光对莲雾催花之影响[ J] .兴大园艺 ,
1997 , 22(2):1-15.
42 广东农业科学 2007年第 2期
DOI :10.16768/j.issn.1004-874x.2007.02.016
30天调查不同激素处理对芽诱导的影响。每个处理
接种 50瓶 ,每瓶接 1个茎段。调查项目包括芽的诱导
率 、数量和生长情况 。
(2)增殖培养:将前代增殖芽在 MS培养基中培养
40天后 、大小基本一致的芽 ,按每 2 个芽为 1段切取
基部较成熟的茎段 ,采用平放和直插两种方法接种于
MS+6-BA 5.0 mg/L 培养基中 ,接种后 40天调查不
同接种方法对芽增殖的影响;同样 ,采用平放法将上述
茎段接种于 MS+不同激素处理的培养基中 ,接种后
30天调查不同激素处理对芽诱导的影响。每个处理
接种 50瓶 ,每瓶接 1个茎段。调查项目包括芽的增殖
倍数 、高度和生长情况。
(3)生根培养:将在 MS+6-BA 1.0 mg/L 培养
基中培养 40天 、大小基本一致 、高约 3 cm的芽采用切
割后平放接种(将芽基部较成熟的芽切成一段 ,余下尾
芽为一段 ,平放接入培养基中)和直插接种(将整个芽
直插接入培养基中)两种方法接种于 MS+NAA 1.0
mg/L +IBA 1.0 mg/L 生根培养基中 ,接种后 40天
调查不同接种方法对试管苗生根的影响;同样 ,采用直
插法将芽接种于 1/2 MS +不同激素处理的生根培养
基中 ,接种后 30 天调查不同激素处理对根诱导的影
响。每个处理接种 30瓶 ,每瓶接 1个芽 。调查项目包
括生根率 、生根数以及苗的数量 、高度和生长情况 。
1.2.2 移栽试验 将生根苗置于自然散射光较强的
地方炼苗 ,10天后取出幼苗 ,洗净根部培养基 ,移植于
大棚(移植棚先用双层 75%的遮阳网遮阴)内的沙 、土
(1∶1)混合基质中 ,植后淋足定根水 。移植后 20天内
保留双层遮阳网 、保持湿润 , 20天后保留 1 层遮阳网 、
保持间干间湿 ,并用 0.3%复合肥水溶液淋施 ,每隔 10
天淋 1次 ,2个月后调查移栽苗的高度和成活率 。
2 结果与分析
2.1 诱导培养试验
2.1.1 不同生长时期茎段对芽诱导的影响 从表 1
看出 , 半木质化茎段最适合作诱导材料 , 污染率较
低 , 诱导率和平均诱导芽数均最高 , 芽生长正常;完
全木质化的成熟茎段由于枝条暴露于空气中的时间较
长 , 较难消毒 , 污染率较高 , 且由于芽老化等原因导
致诱导率较低 , 但诱导出的芽生长正常;完全未木质
化的幼嫩茎段 , 虽然污染率最低 ,但由于组织太幼嫩 ,
不能成活 。
2.1.2 不同激素处理对芽诱导的影响 从表 2看出 ,
添加 6-BA 1.0 mg/L 的培养基较适合芽的诱导 ,诱
导率和诱导芽数均最高;6-BA 浓度<1.0 mg/L 的情
表 1 不同生长时期茎段对芽诱导的影响
外植体
类型
接种外植
体数(个)
污染率
(%)
诱导率
(%)
诱导芽数
(个)
成熟茎段 50 72 57.1 1.3
半木质化茎段 50 28 83.3 1.7
幼嫩茎段 50 14 0 0
况下 ,随着 6-BA 浓度的升高 ,芽的诱导率和诱导芽
数有增加的趋势 ,而当 6-BA 浓度继续升高时 ,其诱
导率和诱导芽数则逐渐降低。在 6-BA 的基础上加
入NAA后 ,芽的诱导率和诱导芽数也出现降低的趋
势。此外 ,除不加激素的培养基诱导的新芽萌发后易
枯死外 ,其余各培养基处理诱导的新芽均生长正常 。
表 2 不同激素处理对芽诱导的影响
处 理 接种外植体数(个)
诱导率
(%)
诱导芽数
(个)
6-BA0.5mg/ L 31 45.2 0.7
6-BA1.0mg/ L 35 77.1 1.5
6-BA2.0mg/ L 41 63.4 1.1
6-BA3.0mg/ L 29 44.8 0.9
6-BA1.0mg/ L+NAA0.1mg/ L 33 66.7 1.1
6-BA1.0mg/ L+NAA0.3mg/ L 35 51.4 0.8
不加激素(CK) 37 13.5 0.1
2.2 增殖培养
2.2.1 不同接种方法对芽增殖的影响 在增殖培养
中 ,每个成熟的单芽均可形成丛芽 ,而幼嫩的芽无法形
成丛芽 ,接种时将成熟的芽与幼嫩的芽切割分开培养 ,
使成熟的芽形成丛芽 ,幼嫩的芽继续生长 ,可大大提高
增殖效果。增殖培养试验结果显示 ,平放接种的增殖
倍数为 4.3倍 、芽高 2.3 cm 、芽生长健壮 ,直插接种的
增殖倍数为 2.6倍 、芽高 2.9 cm 、芽生长健壮。平放
接种法的增殖倍数比直插法高的主要原因是由于平放
法使芽能充分接触培养基 ,激素作用显著;而直插法顶
端优势明显 ,使增殖倍数降低 。此外 ,平放法在大量生
产中较易操作 ,接种效率较高 。
2.2.2 不同激素处理对芽增殖的影响 从表 3看出 ,
在 6-BA 浓度<5.0 mg/L 的情况下 ,随着 6-BA 浓
度的升高 ,芽的增殖倍数增高 ,但芽的高度有所下降;
当6-BA浓度达到 7.0 mg/ L 时 ,芽的增殖倍数明显
下降 ,芽也明显变短变粗 、呈球状;在 6-BA 浓度为
5.0 mg/L 时加入 NAA ,芽的增殖率反而有所下降。
因此认为 MS+6-BA 5.0 mg/L 培养基较适合芽的
增殖培养 。另外 ,据观察 ,在生根培养前 1 ~ 2代 ,将增
43
殖培养基中的 6-BA浓度降至 1.0 ~ 2.0 mg/ L ,既可
保持一定的增殖率 ,又可促进芽长高 ,有利于切割生
根。
表 3 不同激素处理对芽增殖的影响
处 理 增殖倍数
芽高
(cm)
6-BA1.0mg/ L 2.1 3.4
6-BA3.0mg/ L 3.5 2.7
6-BA5.0mg/ L 4.7 2.1
6-BA7.0mg/ L 3.2 1.2
6-BA5.0mg/ L+NAA0.1mg/ L 4.1 2.3
6-BA5.0mg/ L+NAA0.3mg/ L 3.7 2.4
不加激素(CK) 1.2 5.2
2.3 生根培养试验
2.3.1 不同接种方法对生根的影响 从表 4看出 ,在
生根培养中 ,切割和接种方法会明显影响芽的成苗 ,其
中 ,切割后平放接种处理切段中的每个较成熟的单芽
均可生根形成独立的植株 ,诱导成苗的数量明显较多 ,
而直插接种处理的芽只能生根长成单一的植株。说明
切割后平放接种法能以较少的增殖芽生产出较多的
苗 ,从而大大减少生产成本。
表 4 不同接种方法对生根的影响
接种方法 成苗数(株)
生根率
(%)
生根数
(条)
苗高
(cm)
切割后平放接种 3.4 89.2 2.5 4.3
直插接种 1.0 93.3 2.7 5.8
2.3.2 不同激素处理对根诱导的影响 试验结果(表
5)表明 ,NAA 、IBA单独使用均可诱导组培苗生根 ,但
以混合使用的效果较好 ,其中 NAA 1.0 mg/ L +IBA
1.0 mg/ L或 NAA 1.5 mg/ L+IBA 1.5 mg/L 培养基
处理的生根率 、生根数和苗高均较高 ,苗生长正常 、健
壮 ,根系发达。但考虑到生长激素太高对移栽将造成
不良影响 ,因此认为以 1/2M S+NAA 1.0 mg/L+IBA
1.0 mg/ L 培养基作生根培养基较适宜。
2.4 生根苗移栽试验
试验结果表明 ,生根苗移植于沙 、土(1∶1)混合基
质中 ,苗的高度可达 15 cm以上 ,成活率在 90%以上 。
表 5 不同激素处理对根诱导的影响
处 理 生根率(%)
生根数
(条)
苗高
(cm)
NAA1.0mg/ L 43.3 0.87 5.4
NAA2.0mg/ L 66.7 1.37 5.2
NAA3.0mg/ L 76.7 1.90 5.7
IBA1.0mg/ L 33.3 0.43 5.3
IBA2.0mg/ L 56.7 0.93 5.8
IBA3.0mg/ L 70.0 1.33 6.1
NAA1.0mg/ L+IBA1.0mg/ L 86.7 2.17 5.6
NAA1.5mg/ L+IBA1.5mg/ L 90.0 2.33 6.0
不加激素(CK) 16.7 0.23 4.9
3结论与讨论
3.1 在离体培养过程中 ,外植体是决定培养是否成功
的关键因素之一 。大多数植物在其生长刚开始的季节
采样较好 ,若在生长末期或休眠期采样 ,外植体在培养
中则往往反应迟钝或不能培养成功[ 2] 。吊丝球竹外
植体的采样应选择当年生枝条中的半木质化茎段 ,采
样时期应选择在生长旺盛的夏 、秋季 ,因冬季和早春的
芽已老化或休眠 ,较难诱导成功。
3.2 切割和接种方法对离体培养的繁殖速度影响极
大。在离体培养中 ,根据不同作物的特点采用不同的
切割和接种方法 ,往往可以收到意想不到的培养效果 ,
这在芦荟等植物离体培养中已得到应用[ 3] 。本研究
结果表明 ,吊丝球竹的离体培养采用切割后平放培养
的方法 ,可以大大提高繁殖速度 ,减少生产成本。
3.3 本研究结果表明 ,MS+6-BA 1.0 mg/L 培养基
较适合吊丝球竹离体培养中芽的诱导 , MS +6 -BA
5.0 mg/L 培养基较适合芽的增殖 , 1/2 MS +NAA
1.0 mg/ L+IBA 1.0 mg/ L 培养基较适合诱导生根;
将生根苗移植于沙 、土混合(1∶1)基质中 ,其成活率可
达 90%以上 。
参考文献:
[ 1] 孙鹏 ,王准 , 张小平 ,等.竹类栽培与经营[ M] .成都:天地
出版社 , 2001:165.
[ 2] 谭文澄 , 戴策刚.观赏植物组织培养技术[ M] .北京:中国
林业出版社 , 1991:136-137.
[ 3] 周根余 , 丁洪峰 ,施望敏 , 等.芦荟的无性快速繁殖[ J] .园
艺学报 , 1999 , 26(6):410-411.
44