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宜昌百合小鳞茎诱导的初步研究



全 文 :收稿日期:2005 - 05 - 16
作者简介;王祎 ,女(1983 -)本科生
*通讯作者
宜昌百合小鳞茎诱导的初步研究
王 祎 ,杨万年*
(华中师范大学生命科学学院 武汉 430079)
摘要:以宜昌百合当年成熟的鳞片为外植体 ,接种于 21种不同激素配比的 M S培养基上诱导小鳞茎 ,找出最适培养基。
实验结果表明:在小鳞茎诱导过程中 , 最佳诱导培养基为:M S+6 - BA1. 5 m g L - 1 +2, 4 -D 1m g L -1。生根培养基以 M S+
IBA0. 5 m g L - 1为好。
关键词:宜昌百合;组织培养;激素配比;小鳞茎诱导
中图分类号:Q945 文献标识码:A 文章编号:1006 -8376(2005)03 -0007 - 02
  宜昌百合(Lilium leucanthum (Bake r)Bake r)是
我国特有种 ,为多年草本 ,叶散生 ,披针型。花为喇
叭形 ,有微香 ,白色 ,里面淡黄色 ,外面背脊处淡绿黄
色 ,花期 6 ~ 7月 ,具较高的观赏价值。同时其鳞茎
可供药用 ,有镇痛 、消炎拔毒功效 。主要产于宣恩 、
鹤峰 、利川 、恩施 、宜昌 、神农架 ,分布四川 [ 1] 。目前
宜昌百合仍主要在野外自身繁殖 ,这一野生资源还
未被开发利用。百合常规繁殖主要通过小鳞茎培养
等方法进行 。该法繁殖系数小 ,远不能满足生产上
的需求 ,而组织培养以其繁殖系数大 ,繁殖周期短 ,
可周年进行生产等优点 , 弥补了分生繁殖的不
足 [ 2] 。寻找宜昌百合快速繁殖的方法对野生资源
的保护和利用有一定的积极意义。
1 材料与方法
1. 1 实验材料
宜昌百合当年成熟的鳞片 。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 培养条件
25℃,每天光照 12 h,光照强度 2000 lx。
1. 2. 2 小鳞茎的诱导
材料的消毒:选取当年收获的宜昌百合 2 ~ 4层
鳞片为接种外植体 ,先用自来水冲洗 20m in,体积分
数 75%酒精消毒 15 s,然后用 0. 1%的升汞消毒 7 ~
10 m in,无菌水淋洗 4 ~ 8次 ,备用 。接种:将消毒后
的鳞片切成 0. 5cm ×0. 5cm方块 ,接种。
1. 2. 3 生根的诱导
将丛生芽分割为单芽 ,转入生根培养基中诱导
生根 。同时将一部分丛生芽于 4℃处理 1 ~ 2周 ,再
移入生根培养基中诱导生根 。
1. 2. 4 试管苗的移植
将完整小植株直接移植于黄土与砂混合的基质
上栽培。分为两组:一组避光保水处理 1周 ,另一组
直接移于室外管理 ,比较两组的成活率 。
2 结果与分析
2. 1 小鳞茎的诱导
外植体诱导成败关键在于激素的种类和浓
度[ 3] 。基于各种百合在诱导过程中所用激素配比
相差很大 [ 4 ~ 6] 。实验共设计了 21种诱导培养基进
行小鳞茎的诱导 ,其结果见表 1。从表 1中可看出
4、7和 14号培养基诱导小鳞茎的能力高于其他培
养基 ,其中 4号培养基诱导效果最佳。 3、11、15、16
和 18这 5种培养基不能诱导形成小鳞茎或形成的
突起非常小 ,不能长大 。 1号培养基最早出现小突
起 ,另外在培养过程中观察到鳞片由最初接种时的
乳白色逐渐转变为浅黄 , 直至形成小芽时的浅
绿[ 7] 。在诱导过程中 ,可观察到外植体首先膨大 ,
继而在其表面形成针尖状小突起 ,随着诱导时间加
长 ,突起变大 、展开 ,形成可分辨的小鳞茎。
表 1 不同外源激素配比对小鳞茎诱导的影响
培养基
序号
激素配比
/mg L- 1 芽诱导率 /%
每个外植体
上芽平均数
1 6 - BA 0. 5+2, 4 - D1 66. 7 -
2 6 - BA 0. 5+2, 4 - D2 57. 1 2
3 6 - BA0. 5+2, 4 -D3 66. 7 -
4 6 - BA1. 5+2, 4 -D1 100. 0 2
5 6 - BA1. 5+2, 4 -D2 66. 7 2
6 6 - BA1. 5+2, 4 -D3 25. 0 -
氨基酸和生物资源 2005, 27(3):7~ 8
Am ino Acids&B iot ic R esources
DOI牶牨牥牣牨牬牨牳牳牤j牣ajsh牣牪牥牥牭牣牥牫牣牥牥牫
培养基
序号
激素配比
/m g L - 1 芽诱导率 /%
每个外植体
上芽平均数
7 6 - BA2. 5+2, 4 - D1 80. 0 1. 3
8 6 - BA2. 5+2, 4 - D2 0. 0 0
9 6 - BA2. 5+2, 4 - D3 0. 0 0
10 6 - BA3+2, 4 -D1 66. 7 1. 75
11 6 - BA3+2, 4 -D2 12. 5 -
12 6 - BA3+2, 4 -D3 30. 0 1
13 6 - BA1+2, 4 -D1 100. 0 0. 6
14 6 - BA1+2, 4 -D2 100. 0 1. 1
15 6 - BA1+2, 4 -D3 0. 0 0
16 6 - BA2+2, 4 -D1 0. 0 0
17 6 - BA2+2, 4 -D2 75. 0 1
18 6 - BA2+2, 4 -D3 11. 1 -
19 6 - BA3. 5+2, 4 - D1 50. 0 1. 3
20 6 - BA3. 5+2, 4 - D2 50. 0 1
21 6 - BA3. 5+2, 4 - D3 37. 5 0. 6
 注:基本培养基均为 MS,每种培养基中接鳞片数均为 10片. 表中
“ - ”表示突起很小 ,无法记数。此数据为诱导 37天统计。
2. 2 根的诱导
宜昌百合无菌苗的生根历时较长 ,本实验采用
MS+IBA0. 5 mg L -1和 MS+IBA1 mg L -1诱导生
根 ,但只有 1号培养基 21 d后有根长出(图 B),在
4℃冰箱中处理 2周的无菌苗移入生根培养基中与
未经处理的结果相差不大 。
2. 3 试管苗的移植
本实验用黄土与砂 1︰ 1的混合物作为基质 ,
试管苗直接进行小盆移栽 (图 A),避光保水的条件
下有 75%的移栽成活率 ,而光照保水条件下移栽全
部死亡 。
图 A 移栽的试管苗
3 讨论
从本实验的结果可明显看出 ,培养基的激素成
分与配比是影响宜昌百合鳞茎诱导的重要因素 。在
图 B 宜昌百合完整小植株(箭头所指为根)
小鳞茎的诱导过程中以 MS +6 -BA1. 5mg L -1 +
2, 4 -D1mg L - 1效果最好 。就接种的鳞片本身而
言 ,较大而健康的鳞片有利于小鳞茎的诱导 ,但其诱
导效果相互间存在较大差异 ,实验中采用了王爱勤
等人的研究结果 ,取 2 ~ 4层鳞片为外植体进行接
种[ 7] ,在一定程度上减小了由于外植体不同而造成
的诱导率差异 。实验中发现宜昌百合诱导生根较困
难。实验中基于生根历时较长 ,曾将激素配比扩展
为 5种 、MS +NAA0. 2 mg L - 1 +KT0. 1 mg L - 1
MS+IBA 1. 5 mg L- 1及 MS+NAA0. 5 mg L - 1 +
KT0. 1 mg L -1 ,但效果不明显。同时进行低温处
理后再进行诱导生根 ,结果同样不理想 。试管苗移
植后遮光保水条件下移植成活率高。
参考文献
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社 , 2002, 544
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[ 6]  阮少华 , 杨华 , 梁一池 , 等. 香水百合组织培养的试验
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其颜色变化与鳞茎形成的关系 [ J] . 园艺学报 , 2004,
31(1):117~ 119
(下转第 29页)
8 王 祎等:宜昌百合小鳞茎诱导的初步研究
D isinfection Technology for YoungKonjac in Test Tube
CHEN Yong - bo, ZHAO Q ing - hua
(TheK onjacResearch Institute ofEnshi Autonom ic S tate Academy of
Agricultural Sciences , Enshi 445000, China)
Abstract:Endogenec bacteria in young koniec tube could be destroyed mo re comp le tely by fum iga ting me th-
od, and the su rface cou ld be disinfected w ith alcoho l and HgC l2. The con tam inative ratios was con trolled under
10% on first inocula tion, unde r 5% on the next inocula tion.
Key words:kon jac;young konjac tube;d isinfection;large numbe r of tubes;fum igatingme thod
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(上接第 8页)
Study on Inducing Bulb il of Y ichang lily(L ilium
leucanthum(Baker)Baker)
WANG Y i, YANG W an - nian
(College of L ife Science , Cen tra lChina NormalUniversity ,Wuhan 430079, China)
Abstract:Thema tu re scales ofY ichang lily (Lilium leucan thum )were used as explan ts and inocula ted on 21
kinds ofM S med ia w ith different ho rmone combina tions for inducing bulbils. The re sult show ed tha tM S medium
supplemen ted w ith 1. 5mg L - 1 6 -BA and 1mg L- 1 2 , 4 - D1 had the be st effect on the inducemen.t A nd the
pre ferable med ium fo r roo ting w asM S medium supplemented w ith 0. 5mg L -1 IBA.
Key words:Y ichang lily;tissue cu lture;hormone comb ination;bu lb il inducemen t
29
氨基酸和生物资源 2005, 27(3):27~ 29
Am ino Acids&B iot ic R esources