全 文 ：蕨麻中多糖提取工艺研究及含量测定
丁耀光， 马富花， 苟如虎
（甘肃民族师范学院化学与生命科学系，甘肃 合作 747000）
摘 要：蕨麻是蔷薇科委陵菜属的多年生草本植物，富含植物多糖，块根可入药。 通过两种提取方法，将蕨麻中
提取的多糖采用苯酚-硫酸比色法进行测定。 试验结果表明，索氏提取仪提取甘南蕨麻中多糖含量为 14.34 mg/g，超
声波辅助提取法提取甘南蕨麻中多糖含量为 24.25 mg/g。 因此，超声法提取蕨麻中多糖含量明显高于索氏提取法。
关键词：甘南； 蕨麻； 多糖含量
中图分类号：O629.12 文献标识码：A 文章编号：1004－874X（2014）11－0106-03
Study on the extraction process and content determination
of polysaccharides in Potentilla anserina
DING Yao-guang, MA Fu-hua, GOU Ru-hu
(Department of Chemistry and Life Science, Gansu Normal University for Nationalities, Hezuo 747000, China)
Abstract: Potentilla anserina is a perennial herb rose, which is rich in plant polysaccharides, and its root can be
made into medicine. Extracted by two methods, polysaccharides from potentilla were measured by phenol -vitriolic
colorimetry. The results showed that, polysaccharide content extracted by soxhlet extraction was 14.34 mg/100mL, and
polysaccharide content extracted by ultrasonic assisted extraction was 24.25 mg/100mL. Through the determination, the
polysaccharide content of Potentilla anserina extracted by ultrasonic extraction was significantly higher than that of soxhlet
extraction.
Key words: Gannan; Potentilla anserina; polysaccharide content
蕨麻（Potentilla anserina）属蔷薇科（Rosaceae）多年
生草本植物，俗称人参果、莲菜花等，藏语名称为“卓老
沙僧”[1]，富含植物多糖，块根可入药。 植物多糖可以增
强免疫力，并有降血糖、抗肿瘤的作用，这些糖类在增
强人体免疫力、抗疲劳等方面具有显著作用 [2]，因此测
定多糖的含量，具有广阔的前景。
甘南藏族自治州合作市地处青藏高原东北部边
缘，位于 102°53E、34°57N，海拔高度为 2 963 m。 冬季
寒冷漫长，夏季温暖短暂，全年日照充足。 平均气温
为-0.5~3.5℃，最高气温 28℃，最低气温-23℃，平均无
霜期 48 d。 平均年降水量为 545 mm，一般集中在 7~9
月。 该地区属于亚高寒草甸湿润类型，适合生长多种双
子叶、禾本科和莎草科植物。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试蕨麻采自甘南藏族自治州合作市。 4%苯酚溶
液、葡萄糖、正丁醇、石油醚、三氯甲烷、浓硫酸、乙醇均
为分析纯，溶剂为二次去离子水。
试验仪器：电热恒温鼓风干燥箱（CMD-20X-上海
琅玕公司）、超声提取仪（ORW1.5S-3E 昆山禾创超声仪
器有限公司）、旋转蒸发仪（RE-52AA-上海宙辉公司）、
型循环水真空泵（SHZ-D（A）-天津华鑫公司）、离心机
（AXTG16G-上海精密仪器有限公司）、分析天平（精确
度为 0.0001，FA2204N 上海菁海仪器有限公司）、 数显
恒温水浴锅（HHS-上海启前电子科技有限公司）、索氏
提取仪（上海本昂公司）。
1.2 试验方法
1.2.1 样品的预处理 将蕨麻自然阴干， 粉碎过 830
μm 筛 [3]，经过 Sevage 法 [4]脱脂，水煮提取粗多糖，然后
粗多糖脱蛋白，水提醇沉法 [4]提取纯净多糖，即纯净蕨
麻多糖[5]，再用苯酚-硫酸法测定多糖[5]。
1.2.2 脱脂 称取 10 g制备好的蕨麻样品装入圆底烧
瓶，加入 100 mL 石油醚（沸程 60~90℃），85.5℃恒温水
浴中回流提取 50 min，冷却，离心 3 min，回收石油醚，
重复 2 次，将残渣挥干溶剂，备用。
1.2.3 粗多糖提取 250 mL圆底烧瓶中加入蒸馏水和
脱脂后的蕨麻残渣，500 W 超声波、15 倍料液比下提取
30 min[6]，离心 6 min，抽滤，收集滤液，将滤液加入旋转
蒸发仪进行旋蒸，重复 2 次，浓缩至约 50 mL。
收稿日期：2013-07-17
基金项目：甘肃民族师范学院院长基金（13-11）
作者简介：丁耀光（1980-），男，硕士，讲师，E-mail：dingyao
guang@163.com
广东农业科学 2014 年第 11期106
DOI:10.16768/j.issn.1004-874x.2014.11.004
4．0
3．5
3．0
2．5
2．0
1．5
1．0
0．5
0
吸
光
度
400 450 500 550 600 650
波长（nm）
图 1 最大波长吸收
1.585
1.580
1.575
1.570
1.565
1.560
1.555
0 10 20 30 40 50 60 70 80
显色时间（min）
图 2 最佳显色时间
吸
光
度
1.2.4 脱蛋白 将粗多糖提取溶液倒入锥形瓶， 加入
三氯甲烷-正丁醇（5∶1，V/V）混合溶液 20 mL，搅拌 15
min，离心 6 min，收集上层溶液，至无蛋白质沉淀出现。
除去蛋白质的样品用紫外分光光度计检测， 如果在波
长 280 nm处无吸收，表明蛋白质已经除尽[7]。
1.2.5 纯净多糖提取 多糖离心后所得溶液加入无水
乙醇（溶液∶无水乙醇=1∶5，V/V），得到多糖混合溶液，静
置 24 h，抽滤，收集滤渣并真空干燥，得到蕨麻多糖产
品。
1.2.6 蕨麻多糖溶液的配制 用索氏提取器提取干燥
至恒重的蕨麻多糖，定容至 250 mL容量瓶中[8]。精密用
超声提取器提取，干燥至恒重的蕨麻多糖，定容至 250
mL容量瓶中。
1.2.7 标准溶液的制备 称取干燥至恒重的葡萄糖
100 mg，溶解定容于 100 mL 容量瓶中，用移液管吸取
标准溶液 0、2、4、6、8、10 mL， 定容至 100 mL 容量瓶
中。
2 结果与分析
2.1 多糖含量的测定
多糖含量测定采用苯酚-硫酸法，以葡萄糖为参照
物， 使用紫外可见分光光度计对制备出的产物的多糖
含量进行测定。 吸收曲线得到最大吸收波长[8]为 490 nm，
最佳显示时间为 30 min。
2.2 最大吸收波长
用移液管取适量样品溶液，向其中加入显色剂，在
波长 200~550 nm 范围内进行检测 [9]，绘制出吸收曲线，
由吸收曲线得到最大吸收波长为 490 nm[10]（图 1）。
2.3 最佳显色时间
显色反应是较为复杂的有机反应， 需要一定时间
才能显色完全 [11]。 在不同的显色时间下测定其吸光度
值，结果见图 2。
2.3 制备标准溶液
称取干燥至恒重的葡萄糖 100 mg， 溶解定容于
100 mL 容量瓶中，再用移液管吸取标准溶液 0、2、4、6、
8、10 mL，定容至 100 mL容量瓶中。
2.4 绘制标准曲线
取标准溶液 1 mL 于具塞试管中，分别加 1 mL 4%
的苯酚，快速加入 7 mL 浓硫酸，振荡 4 min，显色 30
min，在 490 nm 波长处测定吸光度，以 1.0 mL 蒸馏水
作空白对照试验。 以吸光度 A 为纵坐标， 葡萄糖浓度
（mg/mL）为横坐标作标准曲线[12]（图 3）。
2.5 换算因子测定
f=m/c×D
式中，m 为多糖质量（g），c 为多糖液中葡萄糖的浓度
（mg/mL），D 为多糖稀释倍数， 即稀释前的溶液浓度除
以稀释后的溶液浓度[13]。
精密称取干燥至恒重的多糖样品 0.0105 g， 置于
100 mL 容量瓶中，定容。 移取该溶液 1 mL，定容于 10
mL 容量瓶中，即制得待测溶液。 吸取 1 mL 待测液，显
色测定同上，测得吸光度为 1.259 回归方程 y=0.0476x+
0.0064，得 y=0.0663 mg/mL，由回归方程计算换算因子
f=1.583。
2.6 索氏提取法提取样品中多糖含量的测定
样品溶液的制备，将蕨麻多糖样品吸取取 1 mL 定
容至 100 mL 容量瓶中，即制得 1 号样品。 按上述步骤
制备 2号，3号样品。
分别从 1、2、3 号样品中取 1 mL 溶液于具塞试管
中测吸光度， 每种样品 3 次平行， 每个样吸光度记为
A1、A2、A3，结果见表 1。 从表 1 看出，3 批样品中多糖
含量分别为 14.34、14.38、14.34 mg/g， 说明本测定误差
0.12
0.11
0.10
0.09
0.08
0.07
0.06
吸
光
度
2 4 6 8 10
葡萄糖浓度（mg/mL）
图 3 苯酚-硫酸法测定的葡萄糖标准曲线
y=0.0476x+0.0064
R=0.9995
107
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（责任编辑 白雪娜）
多糖含量
（mg/g）
14.34
14.38
14.34
平均值
1.670
1.676
1.670
A3
1.689
1.676
1.690
A2
1.691
1.674
1.687
A1
1.689
1.679
1.692
样品编号
1
2
3
表 1 索氏提取法提取样品中多糖含量的测定
多糖含量
（mg/g）
24.06
24.07
24.07
平均值
3.711
3.712
3.712
A3
3.710
3.711
3.711
A2
3.712
3.710
3.713
A1
3.711
3.715
3.712
样品编号
1
2
3
表 2 超声提取法提取样品中多糖含量的测定
极小。
2.7 超声提取法提取样品中多糖含量的测定
试验结果（表 2）显示：3 批样品中多糖含量分别为
24.06、24.07、24.07 mg/g，说明本测定误差极小。
3 讨论
本研究利用索氏提取法和超声波辅助提取法分别
提取了甘南蕨麻中的多糖，结果表明，索氏提取甘南蕨
麻中多糖的含量为 14.34 mg/g，而超声提取甘南蕨麻中
多糖的含量为 24.25 mg/g，孙洁等 [14]用斐林试剂热滴定
法测定蕨麻中多糖的含量为 13.87 mg/g。方法的创新之
处是，在提取粗多糖的过程中采用超声提取的方法，提
高了多糖的产率，得到了比较理想的结果。 因此，超声
提取产率要比索氏提取高很多。
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（责任编辑 刘 翀）
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