全 文 ：热 带 农 业 科 技 2014,37(3）
Tropical Agricultural Science & Technology
假叶树（Ruscus aculeatus L.）是天门冬科假叶树
属多年生常绿小灌木植物，原产地中海沿岸［1］，因
其丛生分枝特化成革质的绿色“叶状枝”而名。假
叶树的“叶状枝”形状别致，颜色深绿、醒目，瓶插
期长，是很好的插花配叶和盆栽观赏的高档材料，
深受人们的喜爱，有较好的市场前景。
近几年从国外引进的假叶树主要靠分株繁殖，
繁殖速度慢，不能满足市场需求，需要研究其快繁
技术，而相关的组织培养报道较少［2］。笔者采用
假叶树的幼嫩茎段进行离体培养，研究加入不同
植物激素（组合）培养基对组培各阶段的影响，以
期建立假叶树的组培快繁技术。
1 材料和方法
1.1 材料
从泰国引进的假叶树，种植于云南省热带作物
科学研究所种苗圃内，选取新抽生的幼嫩茎段。
1.2 方法
外植体消毒：取新抽生的嫩茎，用自来水冲洗
后，在超净工作台上用 75%酒精消毒 10 s，然后用
1.0 g·L-1的 HgCl消毒灭菌 10 min，无菌水冲洗 5次，
备用。
愈伤组织诱导：将消毒好的材料用无菌滤纸吸
干附着的水分，切成 2 cm左右的茎段接种到诱导
培养基上，每处理接种 15管，每管接种 1节。培养
基以 MS为基本培养基［2］，在培养基中分别加入 6-
BA 1.0、2.0 mg·L- 1，ZT 1.0、2.0 mg·L- 1，IBA 0.1、
0.5 mg·L-1，NAA 0.3 mg·L-1。培养 40 d后调查诱导
产愈率。
————————————
收稿日期：2014－01－14
假叶树组织培养植物激素应用筛选试验
梁国平，管 艳，李 玲，黄凤翔，桂明春
（云南省热带作物科学研究所，云南 景洪 666100）
摘要：采用假叶树的幼嫩茎段为外植体组织培养,对加入适合的植物激素作筛选试验,结果表
明：MS+ ZT 2.0 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1 培养基愈伤组织的诱导率最高；MS+ZT 1.5 mg·L-1+
IBA 0.2 mg·L-1培养基分化不定芽效果最佳，并且在MS+ZT 1.0 mg·L-1-1.5 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1培
养基上继代增殖培养增殖系数可达 4～5倍；不定芽在 1/2MS+NAA 1.0+1.5 g·L-1活性炭的培养基上，
生根率达 100%；生根小苗移栽珍珠岩与泥炭土（1∶1）基质上，成活率达 95%以上。
关键词：假叶树；组织培养；植物激素
中图分类号：S688.2 文献标识码：A 文章编号：1672-450X（2014）03-0037-03
——————————————
Screening of Plant Hormones on Ruscus aculeatus in Vitro
LIANG Guo-ping, GUAN Yan, LI Ling, HUANG Feng-xiang, GUI Ming-chun
Yunnan Institute of Tropical Crops, Jinghong 666100, China
Abstract: Experiment of plant hormones on tender stem of Ruscus aculeatus in vitro was carried out. The screening results indi-
cated that the highest induced rate of callus can be obtained in medium of MS+ ZT 2.0 mg· L- 1+IBA 0.5 mg· L- 1 and the opti-
mum medium is MS + ZT 1.5 mg · L- 1 + IBA 0.2 mg · L- 1 for differentiation of adventitious bud. The growth coeffi-
cient could be four to five times in medium of MS+ZT 1.0 mg· L-1-1.5 mg· L-1+IBA 0.2 mg· L-1 for multiplication culture. Root-
ing of adventitious bud in medium of 1/2MS + NAA 1.0 + 1.5 g · L- 1 reached to 100 percent, the survival rate of seed-
ling could reach to 95 percent or more after transplanting in mixture of perlite and peat soil in the ratio of 1 to 1.
Key words: Ruscus aculeatus L.; tissue culture; plant hormone
-- 37
DOI:10.16005/j.cnki.tast.2014.03.008
热 带 农 业 科 技 2014,37(3）
Tropical Agricultural Science & Technology
分化与继代增殖培养：将诱导的愈伤组织转接
到分化培养基上，每处理接种 10瓶，每瓶接种 3块
愈伤组织。在 MS 培养基中分别加入 6-BA 0.5、
1.0、1.5、2.0 mg·L- 1，ZT 0.5、1.0、1.5、2.0 mg·L- 1，
IBA 0.2 mg·L-1。培养 40 d后调查分化情况。将愈
伤组织转接到不同激素培养基上，筛选继代增殖
培养基。
生根培养：切取长 3～4 cm的单芽或芽丛，接
种到诱导生根培养基上，每处理接种 15瓶，每瓶接
种 3株。生根培养基以 1/2MS分别添加不同生长素
NAA 0.5、1.0 mg·L-1，IAA 0.5、1.0 mg·L-1，IBA 0.5、
1.0 mg·L-1，以 1/2MS不添加生长素为对照。培养
30 d后调查生根情况。
上述培养基除生根培养基添加 1.5 g·L-1活性
炭外，均附加 30 g·L-1蔗糖、5 g·L-1琼脂，pH5.8。培
养温度为（25±2）℃，光照强度 500 lx，光照时间
12 h·d-1。
2 结果与分析
2.1 不同植物激素对诱导愈伤组织的影响
外植体接种培养 7 d，在腋芽处出现白色芽点
凸起，15 d芽点伸长，基部开始膨大，逐渐形成愈
伤组织。诱导出的愈伤组织颜色有白色、淡黄色、
黄色、淡绿色，结构有的疏松、有的致密。培养
30 d左右，在淡黄和淡绿色的愈伤组织上看到绿色
芽点。
培养基中添加 ZT+IBA比 6-BA+IBA诱导的愈
伤 组 织 更 好 、更 多 ，其 中 以 ZT 2.0 mg·L- 1 +
IBA 0.5 mg·L-1诱导率最高，达 91.7%，且愈伤组织
结构较致密、呈淡绿色，随培养时间延长，在愈伤
组织上出现绿色小芽点。其次是 ZT 1.0 mg·L-1+
IBA 0.5 mg·L-1，诱导率 81.8%，但愈伤组织较前者
小。最差为 6-BA 1.0 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1，诱导
率只有 25.0%，愈伤组织结构较疏松、白色，很难诱
导出不定芽，随着培养时间延长，愈伤组织逐渐变
黑死亡。添加 6-BA+NAA和 ZT+NAA两种配比的培
养基，诱导率低于 ZT+IBA配比，诱导的愈伤组织结
构较疏松。说明诱导假叶树愈伤组织培养，ZT的
作用比 6-BA 的大，而生长素 IBA 要比 NAA 好一
些 。 因 此 ，在 诱 导 愈 伤 组 织 培 养 基 以 加 入
ZT 2.0 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1为佳（表 1、封三图 1）。
2.2 不同植物激素对不定芽分化与继代增殖
的影响
愈伤组织在分化培养基上培养 10 d左右，愈伤
块上出现绿色芽点，20 d后不定芽伸长，可看到细
小的“叶状枝”，40 d 后，有的不定芽可长到 2～
3 cm。
培养基中添加 ZT+IBA诱导的不定芽多于添加
6-BA+IBA的，且健壮。其中以添加 ZT 1.5 mg·L-1+
IBA 0.2 mg·L-1的分化率最高，分化的不定芽多、健
壮，愈伤块随培养时间延长可增大一倍以上。当
ZT的浓度升高到 2.0 mg·L-1时，虽然分化的不定芽
和愈伤块增殖也多，但不定芽较 ZT 1.5 mg·L-1的细
小。最差的是 6-BA 0.5 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1，未
分化出不定芽，愈伤块增长小。ZT诱导不定芽的
作用比 6-BA的大，这与仲磊等的试验结果相一致
［2］。因此，从培育良种的角度看，以培养基中添加
ZT 1.5 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1效果更佳（表 2、图 2）。
表1 不同植物激素对诱导愈伤组织比较
植物激素/mg· L
-1
接种数量/节·管
-1
污染/节·管
-1
产愈数/节·管
-1
产愈率/% 形态特征
6-BA1.0+IBA0.1 15 3 3 25.0 白色、疏松
6-BA1.0+IBA0.5 15 2 7 53.9 淡黄色、致密
6-BA2.0+IBA0.1 15 5 5 50.0 淡黄色、疏松
6-BA2.0+IBA0.5 15 6 6 66.7 淡黄色、致密
6-BA1.0+NAA0.3 15 5 4 40.0 淡黄色、疏松
ZT1.0+IBA0.1 15 1 8 57.1 黄色、疏松
ZT1.0+IBA0.5 15 4 9 81.8 淡绿色、致密
ZT2.0+IBA0.1 15 2 10 76.9 淡黄色、疏松
ZT2.0+IBA0.5 15 3 11 91.7 淡绿色、致密
ZT1.0+NAA0.3 15 3 7 53.9 淡黄色、疏松
-- 38
热 带 农 业 科 技 2014,37(3）
Tropical Agricultural Science & Technology
将诱导的愈伤组织转接到以 MS 为基本培养
基，添加 ZT 1.0～1.5 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1的组合
进行继代增殖，不定芽的增殖系数分别达到 4～5
倍。继代增殖培养是组培快繁中培育良种的关
键，不仅诱导的不定芽多，还要健壮，同时培养的
愈伤组织在继代中保持增殖（表 3、图 3）。
2.3 生根与移栽
切取 2～3 cm的不定芽接种到生根培养基上，
7 d左右可看到基部产生白色不定根点，15 d不定
根可伸长到 2～3 cm，30 d可长到 4～5 cm，同时小
植株也可长高到 4～5 cm，这时可以移栽。移栽时
先炼苗 7 d左右，然后将苗小心取出，洗净附着根
上的培养基，再将根部在 0.2%的多菌灵液浸泡
5 s，之后移栽到珍珠岩与泥炭土（1∶1）的基质上，
淋足水，成活率可达 95%以上。
在 培 养 基 中 添 加 NAA 效 果 最 好 ：添 加
NAA 0.5、1.0 mg·L-1，生根率分别达 93.3%和 100%，
平 均 生 根 2.5～3 条 /株 。 其 次 ，添 加
IBA 0.5、1.0 mg·L- 1 的，生根率分别为 68.9%和
77.8%，平均生根 2.0～2.5条 /株；不加生长素的最
差，生根率仅 6.7%，平均生根 0.1条 /株（表 4）。
3 讨论
植物组织培养中脱分化是一个复杂的生理生
化过程，培养基中加入恰当的植物激素（组合）会
起到重要作用。假叶树组培成功关键之一是诱导
的愈伤组织，愈伤组织的量不仅要多，愈伤的结构
也要致密，这在后期培养中能诱导出不定芽。本
项试验表明：诱导假叶树外植体愈伤组织以加入
ZT 2.0 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1培养基的诱导效果最
佳；分化与继代增殖培养中，以 ZT和 IBA的浓度分
别下调 0.5和 0.3 mg·L-1为宜；以 NAA诱导生根效
果最好。
试验观察到 ZT 2.0 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1的配
比诱导率最高，而相同浓度的 6-BA与 IBA的配比
诱导率就低很多，ZT的作用大于 6-BA：在分化与
继代增殖培养中同样如此。这与仲磊等的研究结
果较为一致［2］。在假叶树组培快繁中不定根诱导
以 NAA 最好，而 IBA 和 IAA 的诱导率较低，说明
IBA在脱分化中激素配比的效果好，但诱导生根不
一定好，这可能与植物细胞对不同生长素的适应
反应有关，这一问题需要进一步探讨。
参考文献：
[1]中国科学院植物研究所．中国高等植物图鉴 5［Ｍ］．北
京：科学出版社，1976：523．
[2]仲磊，李玉巧，蒋泽平，等．假叶树的组织培养［Ｊ］．江苏
林业科技，2000，27（5）：32-34．
表 3 不同培养基对不定芽继代增殖的影响
植物激素
/mg· L
-1
接种数
/瓶
不定芽增殖
/颗
增殖系数
ZT1.0+IBA0.2 15 180 4
ZT1.5+IBA0.2 15 225 5
表 4 不同植物激素对生根的影响
植物激素
/mg· L
-1
接种数
/瓶
生根数
/株
生根率
/%
平均生根数
/条
0 15 3 6.7 0.1
NAA0.5 15 42 93.3 2.5
NAA1.0 15 45 100 3.0
IAA0.5 15 23 51.1 1.5
IAA1.0 15 25 55.6 2.0
IBA0.5 15 31 68.9 2.0
IBA1.0 15 35 77.8 2.5
表2 不同植物激素对不定芽分化的影响
植物激素/mg· L
-1
平均分化不定芽数/个·块
-1
分化率/% 不定芽生势
6-BA0.5+IBA0.2 0 0 没有不定芽，愈伤块增长小
6-BA1.0+IBA0.2 2 25.5 不定芽较少、细小，愈伤块增长小
6-BA1.5+IBA0.2 3 53.5 不定芽少、细小，愈伤块增大1/3
6-BA2.0+IBA0.2 2 25.5 不定芽较少、细小，愈伤块增大1/3
ZT0.5+IBA0.2 2 25.5 不定芽较少、健壮，愈伤块增长小
ZT1.0+IBA0.2 4 73.5 不定芽少、健壮，愈伤块增大1/2
ZT1.5+IBA0.2 5 90.5 不定芽多、健壮，愈伤块增大一倍
ZT2.0+IBA0.2 5 90.5 不定芽多、细小，愈伤块增大一倍
-- 39