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北乌头不同提取液对菜青虫快速变态的影响



全 文 :书 [收稿日期] 2013-03-05;2013-08-06修回
 [基金项目] 吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目资助[(2012)-356]
 [作者简介] 赵玉敏(1964-),女,教授,从事昆虫生理生化研究。E-mail:zhaoyumin1964@163.com
[文章编号]1001-3601(2013)10-0599-0109-03
北乌头不同提取液对菜青虫快速变态的影响
赵玉敏1,王 凯2,顾地周1,乔淑芬1,何晓燕1,宫汝纯1
(1.通化师范学院 生命科学学院,吉林 通化134002;2.通化市第一中学,吉林 通化134002)
  [摘 要]为了解北乌头对菜青虫变态速度的影响,用北乌头乙醇、蒸馏水、丙酮不同浓度的提取液处理
3龄菜青虫幼虫,研究其对菜青虫变态的促进作用。结果表明:不同浓度的北乌头提取混和液能促进菜青虫
的变态,48h的变态率在70%以上,72h的变态率超过80%,达显著水平;蒸馏水提取液对菜青虫快速变态
有促进作用,当浓度为42.5mg/mL时变态率最高,达99.5%。
[关键词]北乌头;提取液;菜青虫;变态
[中图分类号]S433 [文献标识码]A
Efect of Diferent Aconitum kusnezofi Extract on
Rapid Metamorphosis of Pieris rapae
ZHAO Yumin1,WANG Kai 2,GU Dizhou1,QIAO Shufen1,HE Xiaoyan1,GONG Ruchun1
(1.College of Life Science,Tonghua Normal University,Tonghua,Jilin134002;2.Tonghua No.1 Middle School,
Tonghua,Jilin134002,China)
  Abstract:3rd instar larvae of P.rapae was tested by different mass concentration of A.kusnezoffii
extract liquid prepared by ethanol,distiled water,and acetone to study the acceleration effect on
metamorphosis of P.rapae The results showed that the mixture of different mass concentration of A.
kusnezoffii extract liquid could accelerate the metamorphosis of P.rapae,with more than 70% of
metamorphism rate in 48hrs,and more than 80%of metamorphism rate in 72hrs,reached significant level.
Additionaly,the extract liquid prepared by distiled water had acceleration effect on rapid metamorphosis,
and the metamosphsis rate could reach 99.5% when the extract concentration was 42.5mg/mL.
Key words:Aconitum kusnezoffii;extract Pieris rapae;metamorphosis
  北乌头(Aconitum kusnezoffii Reichb)又叫草
乌,隶属于毛茛科(Ra-nunculaceae)乌头属(Aconi-
tumL.),为多年生的草本植物,多生长于山涧沟谷
中的阴湿地带。北乌头的块根呈暗黑褐色,形如乌
头,全草有毒,块根毒性最大,多分布于我国的东北、
华北地区,朝鲜、苏联西伯利亚也有分布。北乌头能
祛风痰,逐寒湿,用于腰膝关节冷痛、头痛和冻疮等。
乌头的块根内含有乌头碱等多种生物碱,其中乌头
碱有剧毒。北乌头除应用于医学外[1-2],已有将其应
用于植物上害虫的防治报道,如:乔淑芬等[3]利用北
乌头不同部位乙醇提取液处理玉米蚜,研究了其生
物活性;顾地周等[4]对长白山区3种乌头属植物对
3种农作物螟虫触杀活性进行了研究。菜青虫
(Pieris rapae L.)因寄主植物多(十字花科、菊科、
旋花科、百合科、茄科、藜科、苋科等9科35种)、分
布广而危害较重,生产上多是喷洒低毒化学农药进
行防治,这对昆虫物种保存和生态均不利。昆虫快
速变态,不仅缩短了幼虫的生活周期,而且减少了昆
虫的摄食,即减少了昆虫对作物的损害。为了解北
乌头对菜青虫快速变态的影响,研究了北乌头不同
提取液对菜青虫快速变态的促进作用,旨在为探索
植物源农药的利用、减少化学农药的使用的同时又
保存生物多样性提供方法参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
北乌头采自通化白鸡腰国家森林公园,供试菜
青虫(3龄幼虫,大小均等)捕自通化师范学院周边
菜地,供试蔬菜品种为甘蓝。
1.2 试验方法
1.2.1 北乌头不同提取液的制备 将北乌头洗净
阴干,称取全草3份,每份10g。将2份放入研钵中捣
碎,分别加入100mL 95%乙醇和丙酮溶液,于(23±2)℃
恒温振荡提取8h。另1份切割成长2mm的小段,用蒸
馏水浸泡12h后进行水蒸汽蒸馏3次,均用2层纱布过
滤3次,将3次水馏液混合后定容。乙醇和丙酮提取液
的滤液减压浓缩,放入少量95%的乙醇溶液溶解后,以
蒸馏水定容。按鲜草用量换算,3种提取液分别制备成
质量浓度为10.0mg/mL、12.5mg/mL、15.0mg/mL、
17.5mg/mL、20.0mg/mL、22.5mg/mL、25.0mg/mL、
27.5mg/mL、30.0mg/mL和32.5mg/mL药液后,置于
3~5℃冰箱中备用。
 贵州农业科学 2013,41(10):109~111
 Guizhou Agricultural Sciences
1.2.2 试验设计 为了快速而准确地判断出3种
提取液对菜青虫快速变态影响的显著性,采用均匀
设计法进行试验设计,试验各处理见 U10(103)均匀
表(表1)。
为了更接近自然条件,对叶碟测定法进行了改
进,即采用浸液法进行非选择性变态率的测定。方
法为:将新鲜平整的甘蓝叶片洗净,放入不同浓度的
乙醇、蒸馏水、丙酮药液中浸渍5s后取出,用圆形
打孔器打成直径为2cm的叶碟,将叶碟置入直径为
9cm的底部铺有滤纸保湿的培养皿中,每个培养皿
内放入3个相同浓度处理的叶碟,每皿接入一头已
饥饿4h的3龄菜青虫幼虫。试虫取食24h后换新
叶碟。每处理重复3次,取平均值,以5.0mg/mL
的乙醇(CK1)、蒸馏水(CK2)和丙酮(CK3)溶液作对
照处理。菜青虫生活环境的温度保持(25±1)℃,相
对湿度(75±5)%,光照时数和强度以季节的自然情
况为准。试验期间对菜青虫变态进行观测,并分别
于接入菜青虫的48h和72h统计并计算变态率。
变态率=(处理组变态数-对照组变态数)/处
理组变态数×100%。
1.2.3 数据统计分析 采用SPSS(13.0)软件[5]
对试验数据进行处理和分析。
2 结果与分析
2.1 北乌头提取液对菜青虫变态率的影响
从表1看出,对照组中,乙醇(CK1)、蒸馏水
(CK2)和丙酮(CK3)北乌头提取液的变态率在
5.2%~41.5%,变态率较低。不同提取混合液中,
以处理10的变态率最高,48h变态率达81.8%,
72h变态率达94.5%;而其他提取混合液的变态率
48h均在70%以上,72h均在80%以上,远远超过
对照的变态率。经观测,菜青虫取食叶蝶后,爬向培
养皿边缘,活动能力有所减退,散失体内少许水分,体
重逐渐下降,以丝缚于培养皿顶部提前化蛹,蛹的大
小为正常的2/3,蛹态畸形,成虫经过喂养未见产卵。
表1 不同北乌头提取液处理菜青虫的U10(103)均匀试验设计及结果
Table 1 Uniform experimental design U10(103)and results of P.rapae L.treated by different A.kusnezoffii
处理
Treatment
浸提液质量浓度/(mg/mL)
Mass concentration of extract liquid
乙醇
Ethanol
蒸馏水
Distiled water
丙酮
Acetone
48h变态率/%
Metamorphsis
rate in 48hrs
72h变态率/%
Metamorphsis
rate in 72hrs
1  20.0  10.0  30.0  70.9±0.02  81.3±0.04
2  32.5  12.5  20.0  71.7±0.11  82.5±0.03
3  17.5  15.0  10.0  72.6±0.03  83.8±0.07
4  30.0  17.5  27.5  73.3±0.11  84.9±0.12
5  15.0  20.0  17.5  74.1±0.13  85.1±0.13
6  27.5  22.5  12.5  75.0±0.08  87.4±0.09
7  12.5  25.0  25.0  75.6±0.06  89.4±0.11
8  25.0  27.5  15.0  76.4±0.11  91.6±0.08
9  10.0  30.0  32.5  79.5±0.15  92.7±0.14
10  22.5  32.5  22.5  81.8±0.10  94.5±0.11
11(CK1) 5.0  0  0  5.2±0.06  12.3±0.11
12(CK2) 0  5.0  0  35.8±0.04  41.5±0.06
13(CK3) 0  0  5.0  4.1±0.11  6.2±0.09
2.2 提取液对菜青虫快速变态影响的显著性
对试验所得数据(表1)经SPSS(13.0)软件进
行回归分析,结果(表2)表明:48h、72h的回归方
程均呈显著水平,即北乌头蒸馏水提取液48h和
72h均对菜青虫快速变态具有显著作用,并随着浓
度提高变态率提高;而北乌头乙醇、丙酮提取液对菜
青虫快速变态影响不显著。由48h和72h的回归
分析结果可知,蒸馏水浸提液与变态率呈正相关,推
测蒸馏水浸提液质量浓度在32.5mg/mL以上可能
有更高的变态率。因此,以蒸馏水提取液质量浓度
为35.0 mg/mL、37.5 mg/mL、40.0 mg/mL、
42.5mg/mL、45.0mg/mL进行了5水平的补充试
验。结果发现,质量浓度为42.5mg/mL时变态率
最高,达99.5%,超过此浓度虫体死亡。
表2 北乌头对菜青虫变态率影响的回归分析结果
Table 2 Regression results of metamorphism rate for P.rapae treated by A.kusnezoffii
时间
Time
回归方程
Regression equation
复相关系数(R)
Multiple correlation coefficient
检验值Ft
Test value
临界值F
Critical value
检验结果
Test result
48h y1=65.843+0.435x2 0.960  94.657  F(0.05,1,8)=5.318  Ft>F(0.05,1,8)
72h y2=74.699+0.594x2 0.989  372.919  F(0.05,1,8)=5.318  Ft>F(0.05,1,8)
 注:样本容量N=10,显著性水平α=0.05。
 Note:Sample size N=10,αin the same column indicated significance at 5%level.
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                                        贵 州 农 业 科 学
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3 结论与讨论
1)试验结果表明,北乌头蒸馏水提取液对菜青
虫快速变态具有显著影响。
通过对48h和72h的回归方程分析结果可
知,北乌头乙醇溶液、蒸馏水和丙酮的提取液中,只
有蒸馏水提取液对菜青虫快速变态有促进作用,并
随着浓度提高变态率提高。但是当质量浓度为
42.5mg/mL时变态率最高,达99.5%,超过此浓度
虫体死亡。原因可能是北乌头含有促进菜青虫快速
变态的物质,此物质可能是抗保幼激素的成份,可能
是供试药剂诱发抗保幼激素提前释放,但是当浓度
过高时,药物毒性升高,导致虫体死亡;也可能是北
乌头中生物碱导致菜青虫快速变态[6];或者是北乌
头促进菜青虫快速变态的活性物质极易被蒸馏水提
取,并且北乌头中起促进菜青虫快速变态的活性物
质在蒸馏水提取液中能保持较好的稳定性。而北乌
头乙醇和丙酮提取液对促进菜青虫快速变态效果不
明显,其原因可能是乙醇和丙酮提取液中含促进菜
青虫快速变态的物质较少或北乌头中促进菜青虫快
速变态的活性物质不易被乙醇和丙酮提取出来,导
致乙醇和丙酮提取液中促进菜青虫快速变态活性物
质含量少效果不明显。另外,通过实验发现,3龄以
下幼虫可以变成裸蛹,原因可能是虫龄不到,体内所
需酶等变态物质积累不够,不能达到转变成虫。北
乌头中何种物质可以促进菜青虫快速变态,以及活
性物质的进一步分离、提纯及对昆虫的作用机制和
毒理机制等方面还有待更深入的研究。
2)用有毒植物次生代谢产物提取液开发无公
害农药是当今杀虫剂研究的热点,无公害农药的优
点表现在易于分解、残留低和不污染环境,而用有毒
植物提取液对菜青虫生物活性的研究大多集中于拒
食和触杀[7-11],关于北乌头促进菜青虫快速变态的
研究尚未见报道。本研究结果对利用北乌头进一步
开发低毒防治菜青虫的药剂奠定一定的基础。
[参 考 文 献]
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(责任编辑:聂克艳)
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 赵玉敏 等 北乌头不同提取液对菜青虫快速变态的影响
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