全 文 ：2009年 11月 吉林师范大学学报(自然科学版) №.4
第4期 Journal of Jilin Normal University (Natural Science Edition) Nov.2009
收稿日期:2009-08-23　　基金项目:吉林省教育厅科技项目(吉教科合字 2005-157);吉林师范大学高等教育研究课题
第一作者简介:程　军(1968-),女 ,吉林省四平市人 ,现为吉林师范大学生命科学学院实验师 ,硕士.研究方向:遗传学实验教学.
一种适于植物组织培养的实验材料 ———长寿花
程　军 ,刘春明 ,袁　 ,赵　雪
(吉林师范大学 生命科学学院 ,吉林 四平 136000)
摘　要:实验教学中 , 分别选用长寿花叶片 、幼茎和花序作为外植体 ,在附加有不同种类 、不同比例激素组合的
MS 培养基上进行培养 , 观察研究长寿花叶片 、幼茎和花序组织培养的产物.结果表明:不同浓度和种类的激素对
长寿花不同器官进行组织培养 ,叶片可以诱导出愈伤组织 ,幼茎和花序可以诱导出不定芽.
关键词:长寿花;组织培养;实验材料
中图分类号:Q943　　文献标识码:A　　文章编号:1674-3873-(2009)04-0121-02
　　植物组织培养是把植物的器官 、组织以致单个
细胞 ,应用无菌操作使其在人工条件下能够继续生
长 ,甚至分化发育成一完整的植株的过程[ 1] .它不仅
对理论研究有重要意义 ,而且在生产实践中已有广
泛的应用.植物的组织培养实验是遗传学实验的必
做实验之一 ,以往实验材料的选择一直使用胡萝卜
的肉质根 ,由于在培养初期诱导较慢 ,学生只能观察
到愈伤组织阶段[ 2] .近年来 ,遗传学实验我们一直尝
试选用新的外植体 ,以便在较短时间内 ,学生不仅能
观察到愈伤组织 ,还能观察到不定芽.通过实验研究
发现 , 长寿花(Kalanchoe blossfeldiana)这种植物的
叶[ 3] 、茎和花序均能进行组织培养[ 4 ,5] ,诱导的产物
也不尽相同 ,因而长寿花是进行植物组织培养实验
的理想材料.
1　实验材料的选择与处理方法
1.1　材料选择
本实验采用吉林师范大学遗传实验室培养多年
的健壮长寿花 ,橙红色品种.长寿花又名矮生伽蓝
菜 ,为景天科伽蓝菜属 ,多年生短日照肉质草本.长
寿花株高 10 ～ 30 cm ,叶椭圆形对生 ,花顶生 ,圆锥状
聚伞花序.目前盆花栽培多为矮生园艺杂交品种.花
有红色 、粉红色 、橙红色等 ,在国外已专业化规模化
生产 ,是良好的室内观赏花卉[ 6、7] .
1.2　处理方法　
取植株叶片 、幼茎和花序 , 流水冲洗 30 min 以
上 ,75%酒精消毒 30 s ,再用 20%次氯酸钠盖上瓶盖
消毒 5 ～ 8 min ,无菌水冲洗 5次.将叶片切成 0.25 ～
1 cm
2左右的小块 ,正面朝上接种于诱导培养基上 ,
每瓶 3～ 4块 ,接种4瓶.把幼茎剪成1.5 cm左右带腋
芽的小段 ,腋芽朝上接种于培养基上 ,每瓶 3段 ,接种
4瓶.取花序分剪成带有 4 ～ 5朵未开放小花朵的小花
序 ,花朵朝上接种于培养基中 ,每瓶 2～ 3个.
1.3　培养基
基本培养基MS ,加入蔗糖 20 g/L 、琼脂 6 g/L ,
另附加植物激素 ,pH 值在 5.4 ～ 5.8之间.培养箱温
度 25土 1℃ .
2　实验结果的观察与分析
2.1　用叶片诱导愈伤组织
实验结果如表 1.2 , 4-D 与 6-BA 组合和 2 , 4-D
与KT组合两种组合相同配比情况下均可诱导长寿
花叶片萌发愈伤组织.但 2 ,4-D与 6-BA组合诱导速
度快 ,大约 13天左右叶片四周均出现淡黄色愈伤组
织 ,30天长势旺盛.2 ,4-D与 KT 组合诱导速度相对
慢 ,约 20天左右叶片四周出现淡黄色愈伤组织且长
势弱.可见 ,相同配比情况下 ,2 , 4-D与 6-BA组合更
易诱导叶片产生愈伤组织.
表 1　不同激素组合对长寿花叶片产生愈伤组织的影响
序号 2 , 4-D/
mg/L
6-BA/
mg/ L
KT/
mg/ L 比例
接种数/
块
萌发愈伤
组织数/块
1 3 0.75 4/ 1 16 14
2 3 0.75 4/ 1 11 7
2.2　用幼茎诱导不定芽
实验结果如表 2.用 6-BA 分别与 NAA 、IAA 组
合 ,诱导长寿花的幼茎 ,结果大不一样.6-BA与 NAA
以 2/1配比诱导幼茎 ,幼茎萌发出暗黄愈伤组织 ,接
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着愈伤组织逐渐褐化.6-BA与 IAA以 2/1配比诱导
幼茎 ,幼茎上部亦先萌发出黄绿色愈伤组织 ,愈伤组
织继续变绿 ,并渐渐形成突起 ,生出许多不定芽.从
接种到生出不定芽 ,培养时间需28 ～ 30天.
表 2　不同激素组合诱导幼茎出芽情况
序号 6-BA/mg/ L NAA/mg/L IAA/mg/ L 接种数/段 出芽数/个
1　　3 1.5 9 0
2　　3 1.5 6 约 37
2.3　花序诱导情况
如表 3.以四种不同比例的 6-BA 与 IAA组合诱
导长寿花的小花序 ,结果均能直接诱导出不定芽.相
同 6-BA 浓度(2.0 mg/L)下 , IAA浓度较低 ,不定芽
较少 ,时间稍长一些;IAA浓度较高 ,不定芽较多;其
中与浓度为 2.0 mg/L 的 IAA 组合诱导不定芽效果
最好 ,诱导时间大约 30天.
表 3　不同激素配比诱导带花花梗出芽情况
序号 6-BA/mg/ L IAA/mg/ L 比例 接种数/块 出芽数/个
1 2 0.5 4/ 1 9 8
2 2 1.0 2/ 1 9 11
3 2 1.5 4/ 3 6 17
4 2 2.0 1/ 1 9 22
3　实验结论与讨论
(1)用长寿花作实验材料 ,取材方便.长寿花在
本地花卉市场有卖 ,还可以进行网上邮购.长寿花比
较耐旱 ,一般沙质土壤均能良好生长 ,生长适宜温度
15 ～ 25 ℃,适合本地实验室内栽培;在室内为多年
生常绿植物 ,一年 12个月尽可采集叶和茎 ,自然花
期从 12月至翌年 4 月 ,花期长达三个月 ,其间可采
集花序.
(2)可以同时培养长寿花不同器官 ,诱导不同产
物.在学生分组实验中 ,可以分别进行不同器官的组
培实验.对叶进行诱导 ,2 ,4-D(3 mg/L)和 6-BA(0.75
mg/L)组合诱导愈伤组织较好一些.对幼茎进行诱
导 ,可直接诱导出不定芽 ,若想进行快繁 ,诱导幼茎
产生不定芽相对较快.对花序进行诱导 ,既有新花芽
的继续发育 ,又能诱导不定芽的萌发.
(3)可以研究不同种类 、不同比例组合的激素对
长寿花组织培养的影响.对叶来说 ,2 , 4-D(3 mg/L)
和6-BA(0.75 mg/L)组合对比 2 ,4-D(3 mg/L)和 KT
(0.75 mg/L)组合诱导愈伤组织更有效一些.对茎来
说 ,当 6-BA浓度为 3 mg/L 时 , IAA和 NAA均为 1.5
mg/L时 ,与 IAA组合较易诱导出不定芽.对花序来
说 ,相同激素组合 ,不同比例情况下 ,诱导情况也有
差异.当6-BA与 IAA 之比较大时 ,可看到花芽继
续发育 ,诱导不定芽较少 ,随着其比例下降 ,诱导不
定芽较多.
(4)改用长寿花作实验材料 ,有利于激发学生的
实验热情和创新能力.长寿花是一种花卉植物 ,和生
产实践密切相关 ,又有一定的经济价值;学生通过组
织培养实验可能实现快速繁殖 ,还可能培育出更有
价值的新类型.这样不仅能促进学生对理论知识的
掌握 ,还会激发学生实验的创造性.
参　考　文　献
[ 1] 张志良 ,翟伟菁.植物生理学实验指导(3版)[ M] .北京:高等教育出版社 ,2004.
[ 2] 李浚明 ,朱登云.植物组织培养教程(3版)[M] .北京:中国农业大学出版社 , 2005.
[ 3] 汤　洁.长寿花叶片的组织培养与快速繁殖研究[ J] .北方园艺 , 2007 ,(10):188～ 189.
[ 4] 林秀莲 ,赖钟雄 ,黄双龙 ,等.红花长寿花茎段及叶片的离体培养与快速繁殖[ J] .亚热带农业研究 , 2005 ,(5):1～ 5.
[ 5] 李凤兰 ,胡国富等.长寿花花序芽培养及植株再生[ J] .东北农业大学学报 ,2003 , 34(3):314～ 317.
[ 6] 王瑞军.花叶俱佳长寿花[ J] .花木盆景.1994 ,(5):18～ 21.
[ 7] 赵宝林.重瓣长寿花[ J] .中国花卉盆景 , 2008 ,(2):7～ 9.
A Kind of Experimental Material Suitable for Plant
Tissue Culture—Kalanchoe Blossfeldiana
CHENG Jun ,LIU Chun-ming ,YUAN Jing , ZHAO Xue
(College of Biological Sciences , Ji lin Normal Universi ty , Siping 136000, China)
Abstract:In experimental teaching ,with tender leaves , young stem and flower as explants and take MS as basic medium
in tissue culture to investigate the effect of the marching of different hormone on the induction.The experimental result
shows that different concentrations and different kinds of hormone have induced products differently.
Key words:kalanchoe blossfeldiana;plant tissue culture;experimental material
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