全 文 :第 40 卷第 21 期
2012 年 11 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 40 No. 21
November. 2012
细基丸叶和茎总三萜含量测定*
刘冰晶1,李 超1,江智伟1,宋鑫明2
(1 赣南医学院药学院,江西省脑血管药理重点实验室,江西 赣州 341000;
2 海南师范大学化学与化工学院,“省部共建”热带药用植物教育部重点实验室,海南 海口 571158)
摘 要:测定细基丸叶和茎中总三萜的含量。以乌苏酸为对照品,以质量分数 5%香草醛 -冰醋酸和高氯酸系统为显色剂,
采用紫外分光光度法在 546 nm波长处测定样品的吸光度。乌苏酸对照品在 20 ~ 100 μg /mL 范围内呈良好线性关系,回归方程为
Abs = 0. 1548C + 0. 0286,r = 0. 9993。细基丸叶和茎中总三萜的含量分别为 1. 684%和 0. 5439%. 本法操作简便,结果稳定,重复性
好,易于推广。
关键词:细基丸;三萜;紫外分光光度法
中图分类号:TQ914. 1 文献标识码:B 文章编号:1001 - 9677(2012)21 - 0109 - 03
* 基金项目:赣南医学院校级项目 (YB201116)。
作者简介:刘冰晶 (1985 -) ,男,硕士,助教,主要从事药用植物化学研究。
Ultraviolet Spectrophotometric Determination of Total Tritepenoidic
in the Leaves and Stems of Polyalthia cerasoides*
LIU Bing - jing1,LI Chao1,JIANG Zhi - wei1,SONG Xin -ming2
(1 College of Pharmacy,Gannan Medical University,Jiangxi Provincial Key Lab of Cerebrovascular
Pharmacology,Jiangxi Ganzhou 341000;2 College of Chemistry and Chemical
Engineering,Hainan Normal University,Key Laboratory of Tropical Medicinal Plant
Chemistry of Ministry of Education,Hainan Normal University,Hainan Haikou 571158,China)
Abstract:To determine the content of the tritepenoidic acid in the leaves and the stems of Polyalthia plagioneura
Diels,the experimental conditions including ursolic acid as the reference,5% vanillin - acetic acid and perchloric acid as
color system,the content of triterpenoidic acid in the leaves and stems of Polyalthia plagioneura was determined by ul-
traviolet spectrophotometric method at 546 nm. The calibration curve was linear (r =0. 9993)in the range of 0. 2 ~1. 6 μg /mL,
and the curve was Abs = 0. 1548C + 0. 0286,the content was 1. 684% and 0. 5439% . The result was stable,and had
good repeatability. This method operated conveniently and spread easily.
Key words:Polyalthia cerasoides;total tritepenoidic;ultraviolet spectrophotometric method
细基丸 (Polyalthia cerasoides Roxb)隶属番荔枝科 (Annon-
aceae) ,暗罗属 (Polyalthia)植物,分布于云南、广西、广东、
海南,国外分布于东南亚[1]。国内外学者从暗罗属的 20 多种
植物中得到了多种萜类[2 - 3]、生物碱类[4 - 5]等多种类型化合
物。在前期的预实验中,作者发现细基丸叶和茎中含有大量的
三萜类化合物。三萜具有广泛的生物活性,可以降低胆固醇、
降血糖、免疫活性、抗炎、抗菌和抗病毒、抗肿瘤活性等[6]。
本文以乌苏酸为对照品,以质量分数 5%香草醛 -冰醋酸和高
氯酸系统为显色剂,采用紫外分光光度法测定细基丸叶和茎中
总三萜的含量,为细基丸的开发提供科学数据。
1 仪器、试剂与材料
1. 1 仪器
UV2600紫外分光光度计,上海国美科学仪器有限公司;
EYEL4OSB -2100旋转蒸发仪,日本东京理化;索式提取器等。
1. 2 试剂
质量分数 95%乙醇,无水乙醇,香草醛,高氯酸,冰醋酸
等均为国产分析纯;乌苏酸对照品购自上海顺勃生物工程有限
公司 (纯度大于 98. 0%)。
1. 3 材料
细基丸采自海南省昌江县,经霸王岭自然保护区陈庆工程
师鉴定为番荔枝科暗罗属植物 Polyalthia cerasoides,标本现存于
海南师范大学省部共建 -热带药用植物化学教育部重点实验室。
2 实验部分
参照文献[7 - 10]方法并做改进。
2. 1 对照品溶液制备
准确称取 105 ℃干燥至恒重的乌苏酸对照品 20. 0 mg,置
于 50 mL容量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得
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浓度为 0. 400 g /L溶液,精确移取溶液 2. 5 mL,定容至 100 mL,
得浓度为 0. 01 g /L的对照品溶液。
2. 2 供试品溶液制备
将粉碎过的细基丸叶和茎置于 50 ℃烘箱干燥 24 h,各准
确称取 2. 0 g,用无水乙醇浸泡 2 h后,用索式提取器提取 8 h,
提取液用 TLC测定,至渣液与浓 H2SO4 反应不显紫色为止,回
收乙醇后,提取液放冷至室温,用无水乙醇定容至 100 mL,摇
匀。分别准确吸取叶和茎提取液 2. 5 mL和 5. 0 mL于 100 mL容
量瓶中,再用无水乙醇定容,摇匀,制得供试品溶液。
2. 3 测定波长选择
精确量取对照品溶液 5. 0 mL,加入 5%香草醛 -冰醋酸溶
液 0. 2 mL和高氯酸溶液 0. 8mL 显色后,进行全波长扫描,随
行空白对照。结果表明,对照品溶液在 546 nm 处有最大吸收
峰,试验结果见图 1,故选择 546 nm 作为样品测定波长。
图 1 对照品紫外吸收图
Fig. 1 UV absorption spectrum of reference substations
2. 4 标准曲线绘制
准确吸取对照品溶液 0. 2,0. 4,0. 6,0. 8,1. 0,1. 2,
1. 6 mL 分别置于 10 mL容量瓶中,沸水浴挥去无水乙醇,冷却
后,加入 5%香草醛 - 冰醋酸溶液 0. 2 mL 和高氯酸溶液 0. 8
mL,将容量瓶放人 70 ℃水浴中加热 15 min,冷却至室温,用
冰醋酸定容到刻度,摇匀。在 546 nm 波长处测定吸光度值,
随行空白对照液。以乌苏酸含量 (μg /mL)为横坐标,吸光度
值为纵坐标,作图得到标准曲线 (见图 2) ,标准曲线方程为:
A = 0. 1548C + 0. 0286
式中 A为吸光度值,C 为浓度 (μg /mL) ,相关系数 r =
0. 9993,线性范围为 0. 2 ~ 1. 6 μg /mL。
图 2 标准曲线
Fig. 2 Standard curve
2. 5 稳定性实验
取对照品和样品溶液各 5. 0 mL,按照 2. 2 项下方法进行,
每隔 15 min测定一次,结果见表 1,RSD 值较小,表明本法在
1. 5 h内基本稳定。
表 1 稳定性实验
Table 1 Stability test
溶液种类
Solution type
吸光度 (A)Absorbance
0 min 15 min 30 min 45 min 60 min 75 min 90 min
平均值
Average Absorbance
RSD /%
对照品 Reference substance 0. 1225 0. 1183 0. 1194 0. 1168 0. 1254 0. 1204 0. 1216 0. 1206 2. 37
叶提取物 Extract of leaves 0. 1578 0. 1567 0. 1532 0. 1563 0. 1597 0. 1544 0. 1569 0. 1564 1. 367
茎提取物 Extract of stems 0. 1108 0. 1116 0. 1085 0. 1088 0. 11102 0. 11103 0. 1116 0. 1105 1. 17
2. 6 精密度实验
取同一批样品液,进行 5 次平行实验,测定含量,结果见
表 2,叶和茎的分别为 RSD = 1. 20% (n = 5)和 RSD = 1. 41%
(n = 5) ,精密度良好。
表 2 精密度实验
Table 2 Precision test
提取物
Extracts
吸光度 A
Absorbance
平均值
Average
Absorbance
RSD
/%
叶提取物
Extract of
leaves
0. 1583 0. 1552 0. 1599 0. 1571 0. 1594 0. 1580 1. 20
茎提取物
Extract of
stems
0. 1094 0. 1106 0. 1133 0. 1101 0. 1097 0. 1106 1. 41
2. 7 加样回收实验
准确量取 5 份已知含量的细基丸叶和茎提取液各 5. 0 mL,
准确加入一定量的的乌苏酸对照品,余下部分按 2. 4 项下方法
操作。实验表明,叶提取物平均回收率 99. 43%,RSD =
1. 380%(n = 3) ,茎提取物平均回收率 100. 64%,RSD =
1. 51%(n = 3)。
2. 8 样品含量测定
准确量取各 3 份细基丸叶和茎的样品溶液 5. 0 mL 于
50. 0 mL 容量瓶中,沸水浴挥去无水乙醇,冷却后加入 5%香
草醛 -冰醋酸溶液 1. 0 mL,高氯酸 4. 0 mL,容量瓶放人 70 ℃
水浴中加热 15 min,冷却至室温,用冰醋酸定容,摇匀,余下
部分按 2. 4 项方法操作。实验和计算结果见表 3,细基丸叶中
总三萜含量为 1. 684%,RSD = 0. 53%(n = 3) ,茎中总三萜含
量为 0. 5439%,RSD = 0. 17%(n = 3)。
第 40 卷第 21 期 刘冰晶等:细基丸叶和茎总三萜含量测定 111
表 3 样品测量结果
Table 3 Determination results of samples
样品
Samples
吸光度测定值
Absorbance measurements
平均值
Average
RSD
/%
总三萜含量 /%
The total tritepenoidic acid content
平均值 /%
Average
叶
Leaves
0. 1581 0. 1564 0. 1573 0. 1573
0. 1569 0. 1591 0. 1576 0. 1577
0. 1568 0. 1553 0. 1566 0. 1562
0. 53
1. 686
1. 693
1. 672
0. 1684
茎
Stems
0. 1109 0. 1112 0. 1117 0. 1113
0. 1102 0. 1114 0. 1113 0. 1110
0. 1111 0. 1104 0. 1113 0. 1109
0. 17
0. 54522
0. 54651
0. 54005
0. 5439
3 讨 论
(1)测量总三萜类时,文献报道[8 - 10]显色系统香草醛 -
冰醋酸和高氯酸溶液的是不同的,本文对质量分数为 5%的香
草醛 -冰醋酸溶液与高氯酸溶液的比例进行了调整,结果表
明,本实验显色稳定,重复性好。
(2)试验结果表明,在显色系统香草醛 -冰醋酸和高氯酸
溶液条件下,用紫外光分光光度法测定细基丸中的总三萜有良
好的线性关系,干扰少,方法简便,测定结果准确可靠,是测
定细基丸总三萜类化合物的较佳方法。
参考文献
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檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵
692 - 693.
(上接第 79 页)
则如图 5B所示,采用玻纤增强型材料,材料的缺口冲击强度
有一定的下降,从图 5B上看,150 ℃、1000 h老化实验后,该
材料缺口冲击强度仍然保持了一个很高的水平 (23 kJ /m2)。
2. 4 抗汽油渗透率比对分析
参照国标 GB /T1037 - 1988 对几种常规油箱吹塑或油管挤
出材料进行了抗汽油渗透性能的对比测试,如表 1 所示,本低
渗透率吹塑级尼龙新材料具有突出的抗汽油渗透性;能完全满
足更高的环保和安全要求。
表 1 抗汽油渗透性能的对比测试
材料名称 汽油渗透率 /(g /m2·24 h)
低渗透率吹塑级尼龙新材料
PA6 /PA66X - N系列
≤2. 0
PA11 3. 7
PA12 4
HDPE 270
3 结 论
(1)此低渗透率尼龙吹塑新材料具有优异的吹塑加工性
能,可满足不同厚度,不同几何形状部件的加工要求。
(2)此低渗透率尼龙吹塑新材料可回收利用率相当高,回
收料的添加比例对制品的关键性能 (熔体流动速率,缺口冲击
强度)影响较小,可反复循环使用,既能降低生产成本,又能
减少浪费,利于环保。
(3)此低渗透率尼龙吹塑新材料耐化学腐蚀及抗渗透性能
优异,抗汽油渗透率低于 2. 0 g /m2·24 h,是应用于更高环保
要求燃油箱吹塑的理想材料。
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