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新疆准噶尔乌头及其炮制品的急性毒性和镇痛作用实验研究



全 文 :基金项目:国家自然科学基金项目(30960514);新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2011211A092);新疆维吾尔自治区中医药管理局中医民
族医药青年科技人才专项课题(2010ZMY03)。
作者简介:吴 超(1987-),男,硕士,研究方向:中药材资源开发及质量标准研究。
通信作者:赵翡翠,女,副主任中药师,硕士生导师,研究方向:中药材资源开发及质量标准研究,E-mail:zzffcc@126.com。
新疆准噶尔乌头及其炮制品的
急性毒性和镇痛作用实验研究
吴 超1,赵翡翠2,姜 林2,刘 晶3,卢 军3,李 娟3
(新疆医科大学1中医学院,2附属中医医院药学部,3附属中医医院药理实验室,乌鲁木齐 830000)
摘要:目的 研究新疆准噶尔乌头生品及其炮制品的急性毒性和镇痛作用。方法 对小鼠腹腔注射不同浓
度的准噶尔乌头生品和3种炮制品水煎液,采用改进寇氏法获得准噶尔乌头及其炮制品对小鼠的半数致死量
(LD50)。采用辐射热刺激法和醋酸致小鼠扭体实验,考察准噶尔乌头及其炮制品高、中、低不同剂量的镇痛活性。
结果 (1)新疆准噶尔乌头生品及其炮制品毒性:生品>文献法>药典法>哈族法,新疆准噶尔乌头生品、药典法、
文献法、哈族法炮制品的LD50分别为3.079 2、26.219 1、10.587 3、39.870 2g/kg。(2)与对照组相比,药典法、哈族
法炮制品的低剂量组痛阈值无明显差异 (P>0.05),镇痛效果弱;其余给药组的痛阈值增大 (P<0.05~0.01),具
有镇痛效果,能明显延长由小鼠辐射热刺激所引起的小鼠甩尾潜伏期。与盐酸曲马多组比较,准噶尔乌头生品及
其各炮制品的高剂量组差异无统计学意义。(3)与对照组相比,盐酸曲马多组、生品、药典法炮制品、文献法炮制品
的高剂量组与中剂量组以及哈族法炮制品的高剂量组均可以减少小鼠扭体次数 (P<0.05~0.01),具有一定的镇
痛作用。结论 新疆准噶尔乌头生品及其炮制品具有一定的毒性,应引起临床用药的注意;同时,新疆准噶尔乌
头生品及其炮制品具有不同程度的镇痛作用。
关键词:新疆准噶尔乌头;炮制品;急性毒性;镇痛作用
中图分类号:R965  文献标识码:A  文章编号:1009-5551(2012)02-0197-05
The Study on acute toxicity and analgesic action of Aconitum soongaricum
Stapfand its processed products from Xinjiang
WU Chao1,ZHAO Fei-cui 2,JIANG Lin2,LIU Jing3,LU Jun3,LI Juan3
(1 College of Traditional Chinese Medicine,2 Medicine Department of
Affiliated Traditional Medical Hospital,3 Pharmacology Laboratory of
Affiliated Traditional Medical Hospital,Xinjiang Medical University,Urumqi 830000,China)
Abstract:Objective To study the acute toxicity and analgesic effects of different processed products of
Aconitum soongaricum Stapf.Methods The LD50of mice was measured by the improved Karber method
with intraperitoneal injection of different concentrations of different processed products of Aconitum
 第35卷 第2期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Vol.35 NO.2
 2012年2月 Journal of Xinjiang Medical University Feb.2012
soongaricum Stapf.At the same time,used radiant heat stimulation and acetic acid induced writhing test
and studied the analgesic activity of different processed products of Aconitum soongaricum Stapfin high,
middle,low dose.Results  (1)The toxicity order of different processed products of Aconitum
soongaricum Stapf:product>Literature method>Pharmacopoeia method(2010)>Kazakh method;
The result shows that the LD50are 3.079 2g/kg,26.219 1g/kg,10.587 3g/kg and 39.870 2g/kg re-
spectively.(2)Compared with contrast group,there is no difference of pain threshold between the low
dose from Pharmacopoeia method(2010)and Kazakh method;the pain threshold of other administration
groups increased,which have analgesic effects and prolong the tail-flick latency significantly,caused by ra-
diant heat stimulation.Compared with Tramadol group,there is no difference of the high dose of different
processed products of Aconitum soongaricum Stapf.(3)Compared with contrast group,the Tramadol
group and the high dose and middle dose of product,Pharmacopoeia method(2010),Literature method
and high dose of Kazakh method can reduce rat torsion times(P <0.05~0.01),which have analgesic
effects.Conclusion The product and different processed products of Aconitum soongaricum Stapfhave
certain toxicity,which should be concern in clinical application.Meanwhile,the product and different pro-
cessed products of Aconitum soongaricum Stapfal have different degrees of analgesic action.
Key words:Aconitum soongaricum Stapf;processed products;acute toxicity;analgesic effects
   准 噶 尔 乌 头 为 毛 茛 科 植 物 准 噶 尔 乌 头
(Aconitum soongaricum Stapf.)的干燥块根,主要
分布于新疆天山山脉海拔1 600~2 400m的山坡
草地、灌丛和林缘,产于我国新疆北疆地区,民间常
作为草乌的代用品使用,同时也是哈萨克族、回族等
少数民族传统民族药的重要药材。其性味辛、苦、大
热,有毒,具祛风散寒、止痛消肿、通经活络的功效。
新疆地域辽阔,干旱高寒,生态环境恶劣,使风湿类
疾病成为新疆地区常见病、多发病,且缠绵难愈。
准噶尔乌头在治疗风湿性关节炎、半身不遂、跌打
损伤、肋间神经痛、腰脚冷痛、心腹冷痛、肠胃虚寒
痛、牙痛等新疆地区常见疾病方面,有其独特的优
势。国外曾有人从原苏联中亚地区产该种植物中
分离得到准噶尔乌头碱、准噶尔碱、新乌碱、乙酞
新乌碱等二萜生物碱,国产该种植物的化学成分
未见报道[1-5]。目前对新疆准噶尔乌头的炮制、急
性毒性、镇痛等方面的研究均未见报道。本研究
旨在探讨新疆准噶尔乌头及其炮制品的急性毒性
和镇痛作用,为新疆准噶尔乌头的临床应用提供
参考依据。
1 材料与方法
1.1 实验药物 新疆准噶尔乌头于2010年秋季采
自新疆伊犁州尼勒克县,经新疆医科大学附属中医
医院李永和主任中药师鉴定为毛茛科植物准噶尔乌
头的干燥块根。
1.2 实验动物 昆明种小鼠,清洁级,雌雄各半,
870只,体质量18~22g,由新疆维吾尔自治区实验
动物研究中心提供[许可证号:SCXK(新)2003-
0002]。饲养温度20~25 ℃,相对湿度40%~
70%,自由饮水,进食普通饲料。鼠笼垫料与饮水壶
定时换洗,保持清洁。
1.3 试药及仪器 甘草、黑豆(新疆奇康哈博维药
有限公司,批号:20100902、20100823),醋酸地塞米
松片(浙江仙琚制药股份有限公司生产,批号:
H33021207),盐酸曲马多(德国格兰泰有限公司,批
号:H20050224),冰醋酸(天津市百世化工有限公司
试剂厂,批号:20100107)。PL-200热刺痛仪(成都
泰盟科技有限公司)。
891 新 疆 医 科 大 学 学 报 第35卷 
1.4 方法
1.4.1 新疆准噶尔乌头生品及其炮制品提取物的
制备 (1)(2010版药典炮制法炮制品)药典法[6]:
取净准噶尔乌头,大小个分开,用水浸泡7d至内无
干心,取出,加水煮沸5h,取大个切开内无白心、口
尝微有麻舌感时,取出,晾至六成干后切薄片,干燥,
粉碎过三号筛,即得。(2)(文献炮制法炮制品)文献
法[7-8]:准噶尔乌头清洗、闷润后,固定温度为
126℃,压力为0.15MPa,蒸制90min,70℃低温烘
干,粉碎过三号筛,即得。(3)(哈萨克族炮制法炮制
品)哈族法[9]:将准噶尔乌头泡在水里,每天换2次
水至15d后除去苦味,然后取8%甘草和10%黑豆
浆与乌头一起用水煮沸5h至内无白心、口尝无麻
或微有麻舌感为度,取出晾干后切成片状或其他形
状晒干或烘干后,粉碎过三号筛,即得。(4)取准噶
尔乌头生品及其3种炮制品各300g,加10倍量水
浸泡1h,煮沸后煎50min,4层纱布过滤。二煎加
8倍量水,煮沸后煎30min,4层纱布过滤,合并2
次滤液,按每100mL水煎液加入40mL 95%的乙
醇溶液,置 4℃ 冰箱内 48h,2 000 r/min 离心
10min,取上清液置65℃恒温水浴锅内,浓缩成
300%的药液。
1.4.2 急性毒性实验[10] (1)最小全致死量、最大
全不致死量的测定:小鼠250只,随机分组,每组4
~6只。各药液的每个浓度组选择1或2组小鼠(4
~6只)进行实验。每只小鼠均按0.2mL/10g腹
腔注射给药1次,分别观察小鼠7d内出现的死亡
时间,最后计算出各药物的最小全致死量、最大全不
致死量,供测定半数致死量(LD50)时参考。(2)半数
致死量(LD50)的测定:小鼠200只,分别按质量分层
后再随机分为20组,给药前均禁食24h,不禁水。
新疆准噶尔乌头生品、药典法、文献法、哈族法4个
样品依据最小全致死量和最大全不致死量的值,等
比设5个剂量组。每只小鼠均按0.2mL/10g给
药,分别观察小鼠腹腔注射后的中毒症状,7d内死
亡情况及死亡时间、体重变化情况。用改良寇氏
(Karber)法计算小鼠腹腔注射各药物的半数致死量
(LD50)及其95%可信区间。
1.4.3 镇痛实验 (1)辐射热刺激法[11]:取质量
(20.0±2.0)g的小鼠280只,雌雄各半。随机分成
14组,每组20只,分别给盐酸曲马多(2mg/mL)、
新疆准噶尔乌头生品(0.153g/mL)、药典法(1.311
g/mL)、文献法(0.529g/mL)、哈族法(1.994g/
mL)5个药液,灌胃给药(0.2mL/10g),对照组给
同体积生理盐水。给药2w,测定末次给药后30、
60、90、120min的痛阈值。(2)醋酸致小鼠扭体反
应[12]的影响:取质量(20.0±2.0)g的小鼠140只,
雌雄各半。随机分成14组,每组10只,分别给盐酸
曲马多(2mg/mL)、新疆准噶尔乌头生品(0.153g/
mL)、药典法(1.311g/mL)、文献法(0.529g/mL)、
哈族法(1.994g/mL)5种药液,灌胃给药(0.2mL/
10g),对照组给同体积生理盐水。每日给药1次,
连续2w,于末次给药后30min,每只小鼠腹腔注射
0.6%冰醋酸溶液0.1mL/10g,注射后开始观察30
min内的扭体反应(腹部收缩内凹,臀部抬高,尾椎
上翘,伸展后肢,蠕行)的次数及时间,计算扭体次数
抑制率(扭体次数抑制率达50%以上才认为有镇痛
作用[13])。
扭体次数抑制率(%)=(对照组平均扭体次数
-给药组平均扭体次数)/对照组平均扭体次数×
100%。
1.5 统计学处理 采用SPSS17.0统计软件包进
行统计分析。各实验数据以均数±标准差(珔x±s)表
示。两样本均数比较采用t检验,检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 新疆准噶尔乌头生品及其炮制品的急性毒性的
实验结果 新疆准噶尔乌头生品及其炮制品毒性大
小顺序为:生品>文献法>药典法>哈族法。新疆准
噶尔乌头生品LD50=3.079 2g/kg,95%可信区间为
2.14~4.39g/kg;药典法LD50=26.219 1g/kg,
95%可信区间为24.77~27.75g/kg;文献法LD50=
10.587 3g/kg,95%可信区间为9.95~11.26g/kg;
991 第2期 吴 超等:新疆准噶尔乌头及其炮制品的急性毒性和镇痛作用实验研究
哈族法 LD50=39.870 2g/kg,95%可信区间为
38.28~41.52g/kg(表1~4)。
表1 新疆准噶尔乌头生品的急性毒性实验结果
组别
剂量/
(g·kg-1)
对数 动物数 死亡数
死亡率/
%(p)
存活率/
%(q)
p·q
生品1  2.492  0.397  10  2  0.2  0.8  0.16
生品2  2.864  0.457  10  4  0.4  0.6  0.24
生品3  3.292  0.517  10  6  0.6  0.4  0.24
生品4  3.784  0.578  10  8  0.8  0.2  0.16
生品5  4.350  0.638  10  9  0.9  0.1  0.09
表2 新疆准噶尔乌头药典法炮制品的急性毒性实验结果
组别
剂量/
(g·kg-1)
对数 动物数 死亡数
死亡率/
%(p)
存活率/
%(q)
p·q
药典法1  23.180  1.365  10  1  0.1  0.9  0.09
药典法2  24.920  1.397  10  5  0.5  0.5  0.25
药典法3  26.782  1.428  10  6  0.6  0.4  0.24
药典法4  28.644  1.457  10  7  0.7  0.3  0.21
药典法5  30.786  1.488  10  9  0.9  0.1  0.09
表3 新疆准噶尔乌头文献法炮制品的急性毒性实验结果
组别
剂量/
(g·kg-1)
对数 动物数 死亡数
死亡率/
%(p)
存活率/
%(q)
p·q
文献法1  7.000  0.845  10  1  0.1  0.9  0.09
文献法2  8.000  0.903  10  2  0.2  0.8  0.16
文献法3  10.000  1.000  10  5  0.5  0.5  0.25
文献法4  12.000  1.079  10  6  0.6  0.4  0.24
文献法5  14.000  1.146  10  8  0.8  0.2  0.16
表4 新疆准噶尔乌头哈族法炮制品的急性毒性实验结果
组别
剂量/
(g·kg-1)
对数 动物数 死亡数
死亡率/
%(p)
存活率/
%(q)
p·q
哈族法1  34.000  1.531  10  1  0.1  0.9  0.09
哈族法2  38.000  1.580  10  3  0.3  0.7  0.21
哈族法3  40.000  1.602  10  5  0.5  0.5  0.25
哈族法4  42.000  1.623  10  7  0.7  0.3  0.21
哈族法5  44.000  1.643  10  9  0.9  0.1  0.09
2.2 新疆准噶尔乌头生品及其炮制品对小鼠辐射
热刺激法的影响 与对照组比较,给药30min后,
药典法、哈族法的低剂量组的痛阈值无变化 (P >
0.05),无镇痛效果;其余各给药组的痛阈值增大 (P
<0.05~0.01),有镇痛效果。给药60、90min后,
各给药组的痛阈值均增大 (P<0.05~0.01),镇痛
作用开始起效。给药120min后,药典法、哈族法
的低剂量组的痛阈值无变化 (P>0.05),镇痛效
果减弱;其余各给药组的痛阈值与对照组比较增
大 (P<0.05~0.01),仍具有一定的镇痛效果。
给药30min后,生品、药典法、文献法的高剂量
组的痛阈值与曲马多组比较差异无统计学意义 (P
>0.05);给药60min后,生品、文献法的高剂量组
的痛阈值与曲马多组比较差异无统计学意义 (P>
0.05);给药90、120min后,生品高、中剂量组及药
典法、文献法、哈族法的高剂量组的痛阈值与曲马多
组比较差异无统计学意义 (P>0.05)(表5)。
2.3 新疆准噶尔乌头生品及其炮制品对醋酸致小
鼠扭体反应次数的影响 与对照组比较,盐酸曲马
多组、生品高剂量组与中剂量组、药典法高剂量组与
中剂量组、文献法高剂量组与中剂量组、哈族法高剂
量组均可以减少小鼠扭体次数 (P<0.05~0.01),
从而产生镇痛作用,但是镇痛效果不如盐酸曲马多
(表6)。
3 讨论
准噶尔乌头为剧毒药材,炮制后方能入药。因
此,如何保证准噶尔乌头在临床应用中的安全有效
是研究的重点。本文研究急性毒性实验结果表明准
噶尔乌头各炮制品毒性均较生品降低,其中哈族法
炮制品毒性最低,可能与哈族法炮制方法中使用甘
草汁与黑豆汁作为炮制辅料有关。
镇痛实验中的辐射热刺激法致痛实验结果表
明,新疆准噶尔乌头生品及其炮制品高剂量组在给
药后均起效,与曲马多组比较,差异无统计学意义
(P>0.05)。给药120min时除药典法和哈族法低
剂量组痛阈值与正常痛阈值比较,差异无统计学意
义 (P>0.05)以外,其余各给药组与对照组比较仍
有镇痛作用,并且准噶尔乌头生品及其各炮制品的
高剂量组与曲马多组比较,差异无统计学意义 (P
>0.05)。提示准噶尔乌头生品及其炮制品具有一
定的镇痛作用,起效及维持时间与曲马多相似。
镇痛实验中的醋酸致小鼠扭体反应实验结果表
明新疆准噶尔乌头及其各炮制品有镇痛效果。
002 新 疆 医 科 大 学 学 报 第35卷 
表5 准噶尔乌头及不同炮制品对小鼠辐射热刺激法的影响(珔x±s)
组别 动物数
剂量/
(mg·kg-1)
给药后不同时间痛阈值/s
30min  60min  90min  120min 
对照组 20  0.00  4.98±1.22  4.84±1.02  4.77±1.01  4.90±1.15
盐酸曲马多 20  20.00  7.43±1.38** 8.55±2.10** 7.40±1.96** 7.14±1.68**
生品低剂量组 20  15.32  6.12±0.71**▲▲ 6.64±0.74**▲▲ 6.32±0.63**▲▲ 6.06±0.50**▲▲
生品中剂量组 20  30.64  6.43±0.77**▲▲ 6.81±0.74**▲▲ 6.61±0.71** 6.33±0.87**
生品高剂量组 20  61.28  7.87±1.30** 8.11±1.24** 7.97±1.26** 7.81±1.31**
药典法低剂量组 20  15.32  5.25±0.40▲▲ 5.57±0.30**▲▲ 5.31±0.29*▲▲ 5.21±0.35▲▲
药典法中剂量组 20  30.64  6.08±0.48*▲▲ 6.45±0.48**▲▲ 6.04±0.49**▲▲ 5.98±0.43*▲▲
药典法高剂量组 20  61.28  7.18±0.81** 7.48±0.78**▲ 7.12±0.75** 7.09±0.72**
文献法低剂量组 20  15.32  5.74±0.63*▲▲ 6.10±0.54**▲▲ 5.94±0.54**▲▲ 5.77±0.53**▲▲
文献法中剂量组 20  30.64  6.05±0.46**▲▲ 6.87±0.40**▲▲ 6.78±0.37**▲ 6.48±0.38**▲▲
文献法高剂量组 20  61.28  7.44±0.72** 7.81±0.84** 7.54±0.76** 7.42±0.72**
哈族法低剂量组 20  15.32  5.45±0.19▲▲ 5.76±0.22**▲▲ 5.56±0.20**▲▲ 5.44±0.32▲▲
哈族法中剂量组 20  30.64  5.91±0.25**▲▲ 6.28±0.29**▲▲ 6.04±0.14**▲▲ 5.77±0.28**▲▲
哈族法高剂量组 20  61.28  6.58±0.38**▲ 6.41±0.61**▲▲ 6.20±0.52** 6.03±0.39**
  注:与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与盐酸曲马多比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01。
表6 准噶尔乌头及不同炮制品对醋酸致小鼠扭体
反应次数的影响(珔x±s)
组别 动物数
剂量/
(mg·kg-1)
扭体反应次数 扭体抑制率/%
对照组 10  0.00  155.70±19.28  0.00
盐酸曲马多 10  20.00  59.30±15.93* 61.91
生品低剂量组 10  15.32  85.20±18.39  45.28
生品中剂量组 10  30.64  70.50±9.29* 54.72
生品高剂量组 10  61.28  63.40±22.84** 59.28
药典法低剂量组 10  15.32  96.40±17.17  38.09
药典法中剂量组 10  30.64  76.10±9.49* 51.12
药典法高剂量组 10  61.28  71.20±20.45* 54.27
文献法低剂量组 10  15.32  90.90±9.31  41.62
文献法中剂量组 10  30.64  73.40±12.62** 52.86
文献法高剂量组 10  61.28  69.60±20.80** 55.30
哈族法低剂量组 10  15.32  99.00±9.44  36.42
哈族法中剂量组 10  30.64  87.40±10.39  43.87
哈族法高剂量组 10  61.28  76.50±17.11* 50.87
  注:与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
本实验首次对准噶尔乌头及不同炮制品的急性
毒性、镇痛进行了初步研究,表明新疆准噶尔乌头及
其炮制品具有一定的毒性,同时具有不同程度的镇
痛作用。研究结果与新疆准噶尔乌头及其炮制品在
民间用药具有祛风散寒、止痛消肿的作用相吻合,为
准噶尔乌头的临床安全用药提供了一定的参考。准
噶尔乌头及其不同炮制品的药理作用及其作用机制
还有待进一步的深入研究。
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[收稿日期:2011-08-12]
102 第2期 吴 超等:新疆准噶尔乌头及其炮制品的急性毒性和镇痛作用实验研究