全 文 ：? 1 2 1 4 ? 中 国 病理生理杂志 ：
文章编号
野木瓜注射液对炎性疼痛小鼠背根神经节
表达 的影响
杨燕京 ， 李 小 军 ， 刘 力 维 ， 郭 强 ， 李玉桑 奉黎静 ， 唐和域
中南 民族大学药学院药理学研究室 湖北 武汉
摘 要 目 的 ： 探讨野木瓜注射液对炎性疼痛模型小 鼠的消炎镇痛作用及机制 。 方法 ： 采用足底皮 内注射
角叉菜胶制备小鼠炎性疼痛模型 对治疗组小鼠皮下注射 、 和 野木瓜注射液 于 、 、 、 后
测各组小鼠足趾肿胀值和足底热痛 阈值 并取小 鼠第五腰椎 背根神 经节 （ 行免疫组化染色 检测环氧化
酶 蛋 白 的表达 。 结果 ： 造模后 模型组小 鼠足址肿胀持续 明显 足底热痛阈 值持续 降低 。 至 时 与
对照组相 比 ， 模型组足趾肿胀明显 ； 与 对照组相 比 模型 组足底热痛 阈值显著 降低 。 与模型组相 比 ， 低 、 中 、 高 剂量
野木瓜注射液均可 降低小鼠 趾肿胀度 ， 恢复小 鼠的热痛阈值 且下调 中 的蛋 白表达至模型 组的
、 和 。 结论 ： 野木瓜注射液能降低伤害性刺激诱导的 中 蛋白表达 起到抗炎镇痛的 效
果 。
关键词 消炎 ； 镇痛 ； 野木瓜注射液 ； 环氧化酶 ； 背根神经节
中图 分类号 文献标志码 ：
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野木瓜为木通科 （ 野木瓜属 植 ， 是从野木瓜 中提取的有效成分 ， 通过加工
物 ， 拉丁学名 ， 有强心利尿 、 提取精制而成的一种 中药注射液 。 已 有许多文献
驱虫止痛之功效⑴ 。 野木瓜注射液 （ 和 临床试验观察表 明 ， 野木瓜注射液具有抗炎消 肿
收稿 日 期 修回 日 期
基金项 目 国家 自然科学基金资 助项 目 （ 教育部留 学 回国人员启动项 目 （
通 讯作者 ； ：
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和止痛作用 ， 可用于 各种术后 止痛 、 卒 中 后肩 痛 、 臀 足趾容积测量仪测定小 鼠足趾的肿胀体积 。 固定小
上皮神经卡压综合症等⑴ 。 彭小莉等 证实野木瓜 鼠后足 ， 在裸关节处作一标记线 将小 鼠后足浸入测
注射液能预防和缓解大 鼠足底皮下化学组织损伤诱 量仪的液体 中 浸人的深度 以标记线为界 然后取出
致的持续性 自 发痛 ； 刘向 明等 利用微 电极细胞外 小鼠足趾 ， 记录 液体的排出 量 ， 即为小 鼠 的 足趾体
记录技术 观察得 出 野木瓜注射液可 以 在外周 水平 积 ， 计算小鼠造模 、 、 和 后不同时点
上阻滞 大 鼠痛觉信息 的传导 ， 是其产生镇痛 的足趾肿胀程度。 每 只小 鼠均重复 次实验 ， 取
作用的原因之一 。 然而尚 未见野木瓜注射液经治疗 次实验结果 的平均值 。 时点的足址肿胀程度 （ ％
炎性疼痛反应与环 氧化酶 时点的足趾体积 注射前足趾体积 注射前足趾
表达有关的研究报道 。 是前列腺素合成 的 体积 。
一种诱导型 限速酶 催化前列腺素合成参与 炎症反 小 鼠行为 学测试方 法 热痛阈值的测定 ： 将小
应 。 本文从疼痛行为学和细胞生物学角 度 出 发 ， 鼠放置于足底测痛仪玻璃板上 的格 子里 待其安静
研究野木瓜注射液对足底慢性炎症疼痛模型小鼠背 后 开启玻璃板下方的红外辐射灯照射其足底 依据
根神经节细胞 内 的表达干预及抗炎镇痛 的作 记录仪器上所显示的时间 ， 测定小鼠足底热痛 阈值。
用 ， 为其临床应用和推广提供理论依据 。 每只小 鼠均重复 次实验 ， 每次至少 间隔 ， 取
次实验结果的平均值 。
‘ 小 鼠 背根神 经 节 细胞 中 的表
材料与仪器 达 断头处 死小 鼠 后取小 鼠第 腰椎 （
级昆明小鼠由 湖北省 实验动物研究 中 心提 背根神经节 （ 固定并且
供 体质量 ， 雄性 ， 许可证号 鄂 ） 石蜡包埋 进行 蛋 白 的 免疫组织化学染色。
野木瓜注射液 （ 广东 和平制药 蛋白 阳性表达 时呈棕黄 色片状或颗粒状 ， 根
含总黄酮不少于 角叉菜胶 （ 据阳性细胞分布情 况 每张切 片选取 个不 同 的视
蛋 白免疫组化试剂 盒 武汉博士德生物工程有限公 野 ， 采用 图 像分析系统 半定量 计算
司 ） ； 足底测痛仪 。 蛋白 的表达 。
动物分组 统计学处理
动物的饲养环境为温度 ° 湿度 数据采用 科学统计绘图
。 小鼠适应性饲养 后 ， 将 只小 鼠随机均 软件分析 ， 数据以均数 ± 标准误 （ ± 表示 ，
分为 组 每组 只 ： （ 对照组 （ 模型组 ； （ 组间和组 内 比 较 均采用双 因 素方差分析 （
低剂量野木瓜注射液治疗组 ； （ 中剂量野木瓜注 以 为差异有统计学意义 。
射液治疗组 ； （ 高 剂量野木瓜注射液治疗组 。 所
有动物实验和 处 理均遵照 “
野木瓜注射液对小 鼠足祉肿胀的影响
方法 角叉菜胶造模后 模型小 鼠左后足均 明显红
造模开始前 分别检测各组小 鼠足趾肿 胀程度 肿 。 小鼠组织肿胀 程度统计结果如 图 可见 在角
和热痛阈值 ， 与各组小鼠 （ 除对照组注射 生理 叉菜胶注射后 模型组小 鼠 的足趾肿胀程度相 对于
盐水 左后足一次性皮 内 注射 角叉菜胶 ， 造模前持续显著升高 注射角 叉菜胶后 ， 与对照
建立小鼠慢性炎性疼痛模型 造模后 ， 即 刻采取背部 组 （ ± 相 比 ， 模型组 （ ± 足趾肿
皮下注射方式给药 其中治疗组小 鼠 分别 给予 胀明显 。 可见角 叉菜胶皮内 注射引 发小鼠组织明显
相应剂量的野木瓜注射液 ； 模型组和对照组给 水肿 、 炎症反应 。 注射角叉菜胶后 ， 与模型组相
予等剂量 的注射用水 。 在造模后 、 、 和 比 ， 野木瓜注射液低 、 中 、 高剂量治疗组小 鼠 的 足趾
检测各组小 鼠足趾肿胀程度和热痛阈值 并取 肿胀度 显 著 降低 （ ± 、 ± 和
小 鼠背根神经节进行 免疫组化染色 。 ± 表明野木瓜注射液可以 有效减轻角叉
小 鼠足趾大体观察方 法 足址肿胀测量 ： 采用 菜胶诱导的炎症反应 。
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3 0 0 「 令 蛋 白 表达 。 模型组小 鼠 细胞中□
蛋 白 表达明显 。 治疗组经过治疗后 小 鼠
三 细胞中 蛋 白表达有所下调 。 在角叉菜胶注射
—
后 、 和 模型组小 鼠的 细胞 中厂 的 表 达 （ ± 、 ± 和
± 较对照组 （ ± ±
和 ± 显著增加 ， 见 图 。 而在 注射角 叉
菜胶后 ， 低 、 中 、 高剂 量野木瓜注射液治疗组小
— 鼠 细 胞 中 的 表达 （ ± 、
± 和 ± 较模型组显著降低 ， 有
剂 量依赖性 。 由 此我 们 推断 野木 瓜注射液可 目 巨 是
± 通过干预背根神经节中 蛋 白 表达来抑制 炎症
； 进而阻止疼痛的传导 。
图 各组小鼠足底肿胀程度变化 讨 论小鼠足底热痛阈值
由 图 可见 ， 皮 内 注射角 叉 菜胶后 ， 与 对照组 炎性疼痛是 由 于 创伤 、 外科手术 以及细菌或病
± 相 比 模型组小 鼠 足底热痛 阈值显 毒感染等引 发外周 组织损伤而导致的 炎症反应 ， 表
著降低 ± ， 在注射后 降到最低 表明 现为局部的红 、 肿 、热 、 痛与功能障碍 ， 是临床常见的
角 叉菜胶注射后 ， 模 型组小 鼠对 热痛的 敏感性明 显 疾病之一⑷ 。 在炎症的早 期 ， 某些炎症介质 刺激 血
升高 。 注射角叉菜胶后 相对于模型 组 （ 管 ， 使血管扩张 ， 血管 内 皮间 隙扩 大 ， 血管壁通透性
± 野木瓜注射液低 、 中 、 高剂量治疗组小鼠 的 增强 血浆 内 的液体 、 蛋 白 质和 白 细胞等渗 出 到 组织
足底热痛阈值 （ ± 、 ± 和 间 隙 ， 造成组织肿胀 ， 因此 ， 炎症渗出 、 组织肿胀是炎
± 明显升高 ， 其 中高剂 量野木瓜注射液治疗 症早期的重要指标… 。 本研究采用的 角 叉菜胶
组小鼠的 足底热痛 阈值恢复 到对照组 的 丨 。 这 诱导的小 鼠足底疼痛模 型 可 以有效地 产生 炎性应
表明 ， 野木瓜 注射液可 以有效抑 制 角 叉菜胶皮 内注 答 。 根据形态学结果分析 ， 野木瓜 注射液具有抗炎
射引 发的痛觉过敏 ， 并且其药物作用时间持久。
与炎症反应 、 疼痛信号转导等密切相关 ，
— □ 其在 中枢和周边神经系统的蛋 白 表达水平因组织损
伤和 由此产生的炎症诱导而增加 。 表达增
加使前列 腺素合成增 加 后者通过激活环磷酸腺苷
和蛋 白激酶 通路 加强脊髓疼痛信号 以及 突触传
递 引起外周伤害性神经末梢敏化 ， 炎症局部出 现痛
觉过敏 。 近年的研究表 明 ， 通过下调 蛋 白
表达可 阻碍 物质的合成和 释放 进 而产生抗炎 镇
痛的作用 。 本实验中角叉菜胶处理小鼠用药治疗
° 前后足底热痛 阈值对 比 ， 显示 野木瓜注射液具有 良
好的镇痛作用 。 同时 ， 蛋 白 免疫组织化学染
色结果显示 ， 时 ， 治疗组 各组小 鼠背 根神经节
± 汀
“
■ 、 ，
…蛋白 的 表达均低于模型组 ， 并且 高剂 量野木
；
图 各组小鼠足底热痛随变化 瓜注射液治疗组背根神经节 蛋 白 的表达降低
到正常水平 。 这些 实验数据显示 野木瓜注射液可小鼠背 根神经节 表达 以通过干预 蛋 白表达 减轻角叉菜胶引 起 的小 鼠背根神经节 蛋白 免疫组织化学染色 炎症水肿 ， 从而达到抗炎镇痛的 良好效果 。结果如图 。 在对照 组 ， 小 鼠 细胞中 无明 显
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C o n t r o l M o d e l L o w - d o s e o f l S M i d d l e - d o s e o f I S H i g h - d o s e o f I S

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图 各组小鼠 细 胞中 的 表达变化
注射液对大鼠 足底皮 下化学组织损 伤诱致 自 发痛 、 痛“ ° 敏和炎 症 的 作用 生 理 学报 ，
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一 刘 向 明 ， 郭学 芹 ， 陈 素 野 木 瓜注射液 对大 鼠 外周
痛觉信息传导 的影响 中 南民族大学学报 ： 自 然科
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朱天琦 ， 郑声星 ， 金胜威 脂 氧素 八 抑 制 内 毒素诱导
““ 的人支气管上皮细胞 环 氧合酶 及前列 腺 素 的 表
达 中 国病理生理杂志 ， ，
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± 丨 巧 哲 ， 杨 取 祥 丝 裂原 活化蛋 激 豕族 与病 理性
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疼痛 国际麻醉学与 复苏杂志 ， ， ：
图 各组小 鼠 细胞中 表 达 的变化 吴 虹 ， 魏 伟 ， 宋 礼华 栀子总 苷 的抗炎 镇痛 作用
研 究 中国 中 医药信息杂志 ， ， ：
参 考 文 献 二 ， ，
陈 琪 ， 李 锦 ， 吴英 良 野木瓜 化 学成 分及 其药理 ：
和 临 床 研 究进 展 沈 阳 药 科大 学 学报 ， 丨
陈 刘 向 明 ， 张 凡 ， 等 野木瓜注繼镇痛作用 ⑴ ： 燹 ’ 王睿， 李，佳 ’ 等 隱 对神经病理性疼
的細机制研究 中 国 中西 医 结合杂志 ， 補 大 鼠 存 和 背 根 神经 表 达 的 影 响“
中 国应用生理学杂志 ， ，
彭小莉 ， 高喜玲 ， 陈 军 ， 等 鸡矢藤注射液 和野木瓜