全 文 ：2.2.8　回收率试验　取已知含量的样品(批号 070424)
约 0.2 g ,共 6 份 ,精密称定 ,分别加入 3.5 mL 胡椒
碱对照品溶液(质量浓度为 0.347 6 g ·L-1),照供试
品制备方法及色谱条件进行测定 ,计算回收率 ,结果
平均回收率为 101.66%, RSD为 2.0%,结果见表 1 。
表 1　胡椒碱加样回收率试验结果
编号 样重/g 对照品的量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/%
1 0.210 7 1.424 1 1.216 6 2.656 5 101.30
2 0.224 5 1.517 4 1.216 6 2.738 4 100.33
3 0.202 9 1.371 4 1.216 6 2.741 5 104.56
4 0.211 2 1.427 5 1.216 6 2.656 5 101.02
5 0.218 9 1.479 5 1.216 6 2.685 0 99.08
6 0.206 9 1.398 4 1.216 6 2.659 5 103.65
2.2.9　样品含量测定　取 3 批样品 ,依法配制供试
品溶液 ,平行操作 2次。分别精密量取对照品和供试
品溶液各 10 μL ,注入液相色谱仪 ,记录色谱图 ,按外
标法以峰面积计算 ,结果见表 2。
从表 2 数据可知 ,样品中胡椒碱的平均含量为
6.76 mg ·g -1 。
表 2　样品中对照品含量测定结果(n=2)
批号 样量/g 椒碱含量/mg · g-1
061026 0.459 5 6.745
0.515 4 6.821
070424 0.502 3 6.798
0.517 9 6.646
071215 0.501 9 6.792
0.519 5 6.749
3　讨论
由于北败酱含山柰素及其苷 、槲皮素及其苷 、蒙
花苷等黄酮类成分 ,厚朴含厚朴酚 、和厚朴酚等 ,荜茇
含胡椒碱等 ,是方中作用的主要化学成分;而薄层色
谱具有指纹性质 ,成本低廉 ,易于操作 ,重现性好 ,故
采用薄层色谱法鉴别之并取得理想的试验结果。方
中荜茇作用强烈 ,地位重要 ,故需进行含量测定 ,确定
的测定方法能够将胡椒碱与其它成分分开 ,阴性无干
扰 ,并且操作简便 、精密度高 、结果准确可靠 ,可用
于本品的质量控制。
参考文献:
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(收稿日期:2008-05-08)
秦岭产 4种乌头块根的生物碱资源
研究
杨长花1 , 王西芳2(1.陕西国际商贸职业学院 , 陕西 咸阳
712046 ;2.陕西中医学院药学系 , 陕西 咸阳 712046)
摘要:目的　测定秦岭产乌头属的松潘乌头 、太白乌头 、甘青乌
头 、铁棒锤块根中的总生物碱及酯型生物碱含量 , 探讨 4 种植
物的化学成分资源状况 , 为该属生药资源开发研究提供依据。
方法　酸碱滴定法测定块根的总生物碱;改良盐酸羟胺-高氯
酸铁比色法测定块根的酯型生物碱。结果　4 种乌头块根总生
物碱及酯型生物碱含量分别为:花期:松潘乌头 1.19%和 0.33%,
太白乌头 0.68%和 0.06%,甘青乌头 2.24%和 0.33%, 铁棒锤
1.31%和 0.52%;果期:松潘乌头 1.22%和 0.17%,太白乌头
1.24%和 0.04%,甘青乌头 2.42%和 0.28%,铁棒锤 1.44%和
0.46%。结论　4 种乌头种的化学成分资源规律为总生物碱含
量果期高于花期 ,酯型生物碱的含量花期高于果期。
作者简介:杨长花 , 女 ,硕士研究生＊通讯作者:王西芳 ,男 , 教授 , 硕士生导师 , Tel:029-33348083 ,
E-mail:wangxifang@vip.sina.com
关键词:松潘乌头;太白乌头;甘青乌头;铁棒锤;总生物碱;酯
型生物碱
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:A　　　
文章编号:1004-2407(2008)05-0303-03
秦岭产乌头属(Aconitum)药用植物 11种及 6变
种[ 1 ,2] ,笔者首次对该属高山(平均海拔 2 800 m以上)珍
稀种甘青乌头 A.tanguticum (Maxim.)Stapf 、铁棒锤
A.pendulum Busch.、太白乌头 A.taipaicum Hand.-
Mzt.和中低山常见种松潘乌头 A.sungpanense Hand.-
Mazz.总生物碱及酯型生物碱含量进行了系统的测定 ,
探讨了 4种植物的化学资源价值 ,为该属生药资源开发
研究提供依据。
1　仪器及试药
1.1　仪器　紫外可见分光光度仪(型号:UV-1100);
A E200电子分析天平(梅特勒-托利多仪器公司);马
沸炉(型号:Catalog Number);多功能振荡仪(型号:
DZD-3)。
1.2　试药　试验用材料均采自秦岭山区 ,经鉴定分
别为松潘乌头 A.sung panense Hand.-Mazz.、太白
乌头 A.taipaicum Hand.-M zt.、甘青乌 头 A.
tanguticum (Maxim.)Stapf 、铁棒锤 A.pend ulum
Busch.的块根 ,洗净 ,除去须根 ,低温干燥 ,作为供试
品 。乌头碱对照品(中国药品生物制品检定所 ,批号
720-9807)。
2　方法与结果
2.1　总生物碱检测[ 3-5] 　分别取块根粉末适量 ,精密
称定 ,置碘量瓶中 ,加氨试液润湿 ,再加乙醚 50 mL ,
密塞 ,摇匀 ,放置过夜;滤过 ,药渣加乙醚 50 mL ,连续
303西北药学杂志　2008 年 10 月　第 23 卷　第 5 期
振摇 1 h;滤过 ,药渣再用乙醚洗涤 3 ～ 4次 ,每次 15
mL ,滤过;洗液与滤液合并 ,低温蒸干 ,残渣加乙醚-三
氯甲烷(3∶1)的混合液 5 mL 使溶解并蒸干;再加乙醇
5 mL 使溶解 ,精密加入硫酸滴定液(0.01 mol·L-1)
15 mL 、水 15 mL 与甲基红指示液 3 滴 ,用氢氧化钠
滴定液(0.02 moL · L-1)滴定至黄色。每 1 mL 硫
酸滴定液(0.01 moL ·L-1)相当于 12.9 mg 的乌头
碱 ,结果见表 1和表 2 。
表 1　花期的乌头类块根的总生物碱含量
品名 取样量/ g 含量/ % 平均含量/ %
松潘乌头 5.088 8 1.17 1.19
5.124 1 1.21
太白乌头 5.067 7 0.65 0.68
5.087 5 0.71
甘青乌头 5.006 9 2.20 2.24
5.126 0 2.27
铁棒锤　 4.953 6 1.28 1.31
5.301 6 1.35
表 2　果期乌头类块根的总生物碱含量
品名 取样量/ g 含量/ % 平均含量/ %
松潘乌头 5.051 3 1.27 1.22
5.021 6 1.18
太白乌头 5.073 5 1.27 1.24
5.004 7 1.22
甘青乌头 5.064 5 2.41 2.42
5.085 1 2.43
铁棒锤　 5.050 3 1.36 1.44
5.040 1 1.52
2.2　酯型生物碱含量检测方法[ 3-8]
2.2.1　对照品溶液的制备　精密称取乌头碱对照品
18.610 mg ,置 10 mL 量瓶中 ,用无水乙醇溶解并稀
释至刻度 。
2.2.2　标准曲线的制备　精密量取对照品0.25 ,0.50 ,
1.0 ,1.5 ,2.0和 2.5 mL ,分别置 25 mL 量瓶中 ,均加
无水乙醇使成 2.5 mL ,各精密加入碱性盐酸羟胺试
液1.5 mL ,摇匀;在60 ～ 65 ℃水浴中保温10 min ,放
冷;加高氯酸铁试液 13 mL ,摇匀 ,放置 5 min;精密加
入高氯酸试液 8 mL ,用高氯酸铁试液稀释至刻度 ,摇
匀 ,放置 15 min;以相应试剂为空白 ,照紫外-可见分
光光度法在 520 nm 的波长处测定吸收度 ,以吸收度
为纵坐标 ,质量浓度为横坐标 ,绘制标准曲线。回归
方程:A =0.001 747×C +0.013 729 ,相关系数 r =
0.995 ,线性范围为 18.610 ～ 186.100 mg · L -1 。
2.2.3　供试品的制备及检测　取本品粗粉适量 ,精
密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,加乙醚 50 mL 与氨试液 4
mL ,密塞 ,摇匀 ,放置过夜;滤过 ,药渣加乙醚 50 mL ,
连续振摇 1 h ,滤过;药渣再用乙醚洗涤3 ～ 4次 ,每次
15 mL ,滤过 ,洗液与滤液合并 ,低温蒸干 。残渣加氯
仿 2 mL 使溶解 ,转入分液漏斗中;用氯仿 3 mL分次
洗涤容器 ,洗液并入分液漏斗;用 0.05 mo l· L-1硫
酸溶液提取 3次 ,每次 5 mL ,酸液依次用同一三氯甲
烷 10 mL 振摇洗涤 ,合并酸液;加氨试液调 pH 值至
9 ,再用三氯甲烷提取 3次 ,每次 10 mL ,三氯甲烷液
依次用同一水20 mL 振摇洗涤;合并三氯甲烷液 ,低温
蒸干 ,残渣加无水乙醇适量使溶解 ,转入 5 mL 量瓶中 ,
用无水乙醇分次洗涤容器 ,洗涤液并入量瓶中;再加无
水乙醇至刻度 ,摇匀。精密量取上述溶液及无水乙醇
空白溶液各 2.5 mL ,分别置 25 mL 量瓶中 ,自各精密
加入碱性盐酸羟胺试液 1.5 mL ,照标准曲线下的方法
实验 ,对照标准曲线计算含量 ,结果见表 3和表4。
表 3　花期的乌头类块根酯型生物碱含量
品名 取样量/ g 吸收度 含量/ %
松潘乌头 1.003 1 0.115 0.33
太白乌头 2.016 4 0.053 0.06
甘青乌头 1.021 0 0.117 0.33
铁棒锤　 1.016 2 0.174 0.52
表 4　果期的乌头类块根酯型生物碱含量
品名 取样量/ g 吸收度 含量/ %
松潘乌头 2.177 4 0.132 0.17
太白乌头 4.340 2 0.070 0.04
甘青乌头 1.158 7 0.116 0.28
铁棒锤　 2.026 2 0.319 0.46
2.2.4　回收率试验　取已知含量的样品 ,加入适量
的乌头碱对照品 ,依 2.2.3项下操作 ,测定吸收度 ,加
样回收率松潘乌头 、太白乌头 、甘青乌头 、铁棒锤分别
为 101.1%, 99.8%, 102.%和 99.5%。结果表明该
测定方法回收率良好 。
2.2.5　稳定性试验　取花期乌头类块根粉末 ,依2.2.3
项下操作 ,每间隔10 min测定1次吸收度 ,共测 5次 ,
5次结果的 RSD 松潘乌头 、太白乌头 、甘青乌头 、铁
棒锤分别为 0.37%, 1.55%, 0.85%和 1.17%,结果
表明该测定方法在 1 h内是稳定的。
2.2.6　重现性试验　取乌头类块根各 3份 ,依 2.2.3
项下操作 ,结果酯型生物碱平均含量松潘乌头 、太白乌
头 、甘青乌头 、铁棒锤分别为 0.33%, 0.06%,0.34%和
0.53%;RSD分别为 3.53%,10.19%,5.88%和 1.88%。
结果表明该测定方法重现性良好。
3　讨论
4种乌头种的化学资源规律显示 ,总生物碱含量
果期高于花期 ,酯型生物碱含量花期高于果期 ,为 4
种乌头块根的药效与药材最适采收期相关性研究提
供了依据。研究结果显示 ,4种乌头块根的生物碱含
量与其生物学特性有一定的相关性 ,但相关性的研究
有待进一步深入。另外 ,铁棒锤酯型生物碱含量较
高 ,与民间镇痛效果好而毒性强的用药经验有较强的
相关性 ,但相关性的药理学基础有待进一步研究。
参考文献:
[ 1] 　中华人民共和国卫生部药政管理局.现代实用本草
[ M ] .上册.北京:人民卫生出版社 , 1997:75-79 , 496-
502 , 519-525.
304 西北药学杂志　2008 年 10 月　第 23 卷　第 5 期
·药理 ·
金视清滴眼液抗炎 、止痒和对微循环影响的实验研究
王养正 ,潘士印 ,肖湘华 ,银　勇 ,朱秀萍(西安市第一医院 ,陕西 西安 710002)
摘要:目的　研究金视清滴眼液抗炎 、止痒和对微循环的影响 , 探讨其治疗干眼病的作用机制。方法　观察金视清滴眼液对角叉
菜胶造成大鼠右足肿胀和磷酸组织胺引起的豚鼠右足痒阈的影响 , 以及对小鼠耳部微循环的影响。结果　金视清滴眼液明显减
轻了角叉菜胶造成大鼠右足肿胀 ,提高磷酸组织胺所致豚鼠致痒阈 , 并改善了小鼠耳部微循环。结论　金视清滴眼液防治干眼
病的作用与其抑制炎症 、止痒和改善微循环作用有关。
关键词:灵芝;抗炎;止痒;微循环
中图分类号:R965　　　文献标识码:A　　　文章编号:1004-2407(2008)05-0305-02
Study on Jinshiqing Eye Drops effects of inflammation , itching and microcirculation
WANG Yangzheng , PAN Shiyin , XIAO Xianghua , YIN Yong , ZHU Xiuping(Xian No.1 Hospital , Shaanxi Xian 710002 , China)
Abstract:Objective To investig ate the mechanism of Jinshiqing Eye Drops on xe rophthalmus via anti-inflammation , itching allevia-
ting and mic rocirculation promotion.Method The effec ts of Jinshiqing Eye D rops on car rageenan-induced rat right paw edema ,
histamine phospha te caused guinea pig right paw itching , and microcirculation o f right ear in mice w ere studied indiv idually.Re-
sult Jinshiqing Eye Drops significantly r eliev ed carrag eenan-induced rat right paw edema , enhanced the itch- thr esho ld in guinea
pigs caused by histamine pho sphate , and promo ted the ear microcirculation in mice.Conclusion The mechanism o f Jinshiqing Eye
Drops on xerophthalmus is ba sed on its effects o f anti-inflamma tion , itching allevia ting and mic rocirculation promotion.
Key words:Ganode rma;anti-inflammation;itching alleviating;micr ocir cula tion
　　干眼病是眼科临床最常见的疾病之一[ 1] 。现代
医学认为干眼与免疫 、炎症等多个因素有关[ 2] 。灵芝
具有调节免疫 、抑制炎症的功效。我们以灵芝水提取
物为主要有效成分 ,制备金明牌金视清滴眼液 ,在临
床上主要用于缓解视疲劳 ,治疗干眼病 ,取得了良好
的疗效。笔者从抗炎 、止痒及改善微循环作用入手探
讨其防治干眼病的作用机制。
1　仪器与材料
1.1　仪器　足趾肿胀测量仪(YLS-7A 型),山东省
医学科学院生产;BI-2000 图像分析系统 ,成都泰盟
科技公司生产。
1.2　试药　金视清滴眼液(批号 070524 ,西安市眼
科研究所生产);角叉菜胶(腾州市通达海藻工程技术
有限公司);双氯芬酸钠(批号 070608 ,杭州国光药业
有限公司);戊巴比妥钠(批号 050103 ,上海化学试剂
采购站);肾上腺素注射液(批号 070413 ,上海禾丰制
药有限公司);奇正消痛贴(批号 070406 ,西藏林芝奇
正藏药厂);2 ,4-二硝基氯苯(批号 070522 ,北京市兴
津化工厂)。
1.3　动物　健康 SD大鼠 ,体质量 180 ～ 220 g ,雌雄
兼用;健康 ICR小鼠 ,体质量 18 ～ 22 g ,雄性 ,均由陕
西省中医药研究院实验动物中心提供。健康豚鼠 ,体
质量 250 ～ 300 g ,雌雄兼用 ,由西安交通大学医学院
实验动物中心提供。
2　方法与结果
2.1　方法
2.1.1　抗炎实验　将 50只 SD大鼠随机均分 5组 ,即
空白对照组 ,阳性对照组 ,含0.15 ,0.09和0.03 g ·mL-1
灵芝水提取物的金视清滴眼液组(以下简称金视清滴眼
液)。用足趾肿胀仪测量其正常容积 ,各组大鼠右后肢
分别涂以生理盐水 、双氯芬酸钠滴眼液 、含金视清滴眼
液各 0.5 mL。除空白对照组外 ,其它各组动物 30 min
后用 0.01 g ·mL-1角叉菜胶 0.1 mL 鼠足趾致炎 , 30
min后测量其肿胀的右后趾容积并记录。给药后的容积
与给药前的容积之差即为该鼠炎症组织肿胀度。
2.1.2　止痒实验　将健康豚鼠 40只 ,随机均分 4组
即对照组和含 0.15 ,0.09和 0.03 g ·mL-1灵芝水提
取物的金视清滴眼液组。实验前 1天 ,各组豚鼠右后
足背部去毛 1 cm2 并分别涂生理盐水和金视清滴眼
液各 0.1 mL。实验当日 ,用粗纱纸将剃毛处擦伤再
用药 1次(方法同上),10 m in后 ,于擦伤部位依次用
0.1 ,0.2和 0.3 g ·L -1的磷酸组织胺溶液涂敷 ,每次
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305西北药学杂志　2008 年 10 月　第 23 卷　第 5 期