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蕨麻各极性部位抗缺氧活性初步研究＊
赵　赤 1 ,张　岭 1 ,董　培 2 ,李广策 1 ,朱　毅 1 ,李灵芝 2
(1.中国人民武装警察部队医学院药学 4队 ,天津　300162;　2.中国人民武装警察部队医学院 , 天津　300162)
摘　要　目的:研究蕨麻不同极性部位的抗缺氧活性。方法:采用常规液 -液萃取法分离蕨麻不同极性部位 , 并通过
小鼠常压缺氧模型研究各部位的抗缺氧活性。结果:与溶媒对照组相比 , 乙醇总提物 、水溶部位 、乙醇部位 、正丁醇部位和
石油醚部位使小鼠在常压缺氧条件下的存活时间分别延长了 33.83%、45.50%、 38.61%、36.91%和 67.52%,具有显著性
差异 , 其中水溶部位和石油醚部位还能同时降低小鼠整体耗氧量(P<0.05)。结论:蕨麻乙醇总提物 、水溶部位 、乙醇部
位 、正丁醇部位和石油醚部位均具有抗缺氧活性。
关键词　蕨麻 ,缺氧
中图分类号:R965　　　文献标识码:A　　　文章编号:1006-5687(2008)04-0008-03
Studyontheactivityofanti-hypoxiaineveryfractionwithdifferentpolarityofPotentilaanserinaL
ZhaoChi, ZhangLing, DongPei, LiGuangce, ZhuYi, LiLingzhi
(MedicalColageofChinesePeoplesArmedPoliceForces, Tianjin, 300162)
ABSTRACTOBJECTIVETostudytheactivityofanti-hypoxiaineveryfractionwithdiferentpolarityofPotentillaanserinaL.
METHODSTheeveryfractionwithdiferentpolarityofPotentillaanserinaLwasextractedwithroutinefluid-fluidmethodand
theiractivitiesofanti-hypoxiawerestudiedbythemodelofnormobarichypoxiainmice.RESULTSComparedwithcontrolgroup,
thesurvivaltimeofmiceexposedtonormobarichypoxiawasrespectivelyprolongedfor33.83%、 45.50%、 38.61%、 36.91%、
67.52% bythealcoholextractofPotentilaanserinaL., thewatersolublefraction, theethanolfraction, thebutanolfractionorthe
petroleumetherfraction.Theoxygenconsumptionofthemicewassignificantlydecreasedbythewatersolublefractionorthepetro-
leumetherfraction.CONCLUSIONThealcoholextractofPotentillaanserinaL., thewatersolublefraction, theethanolfraction,
thebutanolfractionandthepetroleumetherfractionalshowtheactivitiesofanti-hypoxia.
KEYWORDSPotentillaanserinaL, hypoxia
　　蕨麻(PotentilaanserinaL),为蔷薇科植物鹅绒委
陵菜的块根 ,俗称人参果 ,始载于 《西藏常用中药材》 ,
广泛分布于我国青海 、西藏 、四川 、甘肃 、宁夏 、陕西等
地 ,始载于《西藏常用中药材 》,已收录于 《青海省药品
标准》(1992版)。蕨麻具健脾益胃 、生津止渴 、益气补
血 、止咳利痰功效 ,主治脾虚腹泻 、病后贫血 、营养不良
等症 ,民间用作营养保健或药用 。本文系统研究了其
不同极性部位的抗缺氧活性。
1　材料与方法
1.1　药品 、材料及动物　蕨麻购自青海。各极性部位
由本实验室自提 , 使用前以 0.3%羧甲基纤维素钠
(CMC-Na)溶液配成所需浓度的混悬液 。心得安片
(盐酸普萘洛尔 ,天津力生制药股份有限公司 ,批号
0405007)。
常压缺氧装置参照文献报道方法 [ 1]进行改装 ,由
一只 125ml广口瓶(预先用水校正体积)和带有一根
8 天津药学　Tianjin　Pharmacy　2008年 8月　第 20卷第 4期
＊ 收稿日期:2007-09-28
基金项目:国家自然科学基金项目(No.30672774)
长 2 m的硅胶管的橡胶塞组成 ,每 5 cm长度的硅胶管
可容纳 1 ml水 ,预先在管上标出刻度 。实验动物为昆
明种小鼠 ,雌雄各半 ,体重 20 ～ 22 g(中国人民解放军
军事医学科学院实验动物中心提供)。
1.2　蕨麻各极性部位提取　取蕨麻 2 kg,粉碎后加 5
倍量 60%乙醇搅拌回流提取 2次 ,每次 2 h,合并提取
液 ,减压除净乙醇 ,得浸膏 660 g(每 g相当于生药 3
g)。取 500 g浸膏加水悬浮后 ,依次用石油醚(60 ～ 90
℃)、乙醚 、乙酸乙酯 、正丁醇萃取 ,然后将水层减压浓
缩成膏状 ,再加乙醇搅拌提取得乙醇部位 ,剩余即为水
溶部位 。各部位浓缩后分别得各部位浓缩浸膏如下:
石油醚部位 20.2 g(每 g相当于生药 75 g),乙醚部位
25.2g(每 g相当于生药 60 g),乙酸乙酯部位 5.1 g
(固体 ,每 g相当于生药 300 g),正丁醇部位 15.1 g,
(每 g相当于生药 100 g),乙醇部位 252.5g(每 g相当
于生药 6.0 g),水溶部位 292.5 g(每 g相当于生药
4.4g)。
1.3　各极性部位抗缺氧活性研究　小鼠 180只 ,随机
分为 9组 ,灌胃给药。第一组给予 CMC-Na溶液 , 第
二组给予心得安 0.03g/kg,其他各组分别给予蕨麻乙
醇总提物 10.0 g/kg,水溶部位 6.8g/kg,乙醇部位 5.0
g/kg,正丁醇部位 0.3 g/kg,乙酸乙酯部位 0.05g/kg,
乙醚部位 0.5 g/kg,石油醚部位 0.41 g/kg,各组给药
量均为每 g相当于生药 3g。给药 50min后 ,将小鼠置
于瓶中 ,瓶内放置 5 g钠石灰 ,盖紧瓶塞 ,长管另一端
没入装满水的平盘 ,保持瓶与长管及平盘在同一水平
面 。以呼吸停止为标志 ,记录小鼠存活时间 ,并读出每
分钟小鼠的耗氧体积 。实验结果用 x±s表示 ,用 t检
验方法比较差异 。
2　结果
与溶媒对照组相比 ,乙醇总提物 、水溶部位 、乙醇
部位 、正丁醇部位 、石油醚部位均使小鼠在常压缺氧条
件下的存活时间分别延长了 33.83%、 45.50%、
38.61%、36.91%和 67.52%,具有显著性差异 ,其中乙
醇总提组 、水溶部位和石油醚部位还能显著降低小鼠
整体耗氧量 。见表 1。
3　讨论
蕨麻富含淀粉 、多糖 、蛋白质 、脂质 、维生素 、甾醇 、
胆碱 、甜菜碱以及人体必需的多种氨基酸和微量元素 ,
并含有蕨麻苷 [ 2] 、委陵菜苷及黄酮类成分 [ 3] 。有文献
报道 ,蕨麻生药 [ 3]及其水煎剂 [ 1]有抗缺氧作用 ,但其抗
缺氧机制及其各不同极性部位的抗缺氧作用尚未见报
道 。笔者曾在研究中证实蕨麻乙醇提取物能够延长常
压缺氧状态和异丙肾上腺素致心肌特异性缺氧状态下
小鼠的存活时间 ,并提高减压缺氧状态下小鼠的存活
率 [ 4] 。本实验对其不同极性部位的抗缺氧活性进行了
研究 ,结果显示:石油醚部位 、正丁醇部位 、乙醇部位及
水溶部位均能延长常压缺氧状态下小鼠的存活时间 ,
仅乙酸乙酯部位未显示出此作用。提示蕨麻抗缺氧作
用可能并非仅仅源于其中某一种或某一类成分 ,而很
可能是多种成分的综合作用 。
肌体缺氧时 ,自由基含量增加 ,清除自由基的能力
下降 ,自由基大量堆积 ,导致肌体氧化损伤。陈炅然
等 [ 5]研究发现 ,蕨麻多糖在体外具有清除自由基的活
性。多糖是水溶部位的主要成分 ,推测水溶部位的抗
缺氧活性可能与多糖清除自由基的活性有关 。此外 ,
青海蕨麻中维生素 C含量较高[ 6] ,也是存在于水溶部
位中的一个有效的自由基清除剂。蕨麻中含有黄酮类
成分 ,可能是正丁醇部位及乙醇部位抗缺氧作用活性
成分之一 。目前研究发现 ,石油醚部位含有长链脂肪
酸 、不饱和脂肪酸 、β -谷甾醇 、豆甾 -3, 5-二烯 -7-
酮 、苯二甲酸二异辛基酯和邻苯二甲酸 -2-乙基己基
二酯等 ,目前尚无法判断究竟何种成分与该部位的抗
缺氧活性有关 ,但笔者此前已经证实石油醚部位能够
对抗 O2·-对红细胞膜的氧化作用 [ 7] ,故可以推测石油
醚部位的抗缺氧作用至少与其抗自由基的活性有关。
关于各部位所含化学成分及其抗缺氧活性以及抗缺氧
机制尚待进一步研究。
表 1　蕨麻不同极性部位对常压窒息性
缺氧小鼠存活时间的影响( x±s, n=20)
组别 剂量(g/kg体重) 死亡时间(min)
耗氧量
(ml/min· m2)存活延长率(%)
溶媒对照组 - 17.12±2.98 198.28±31.04 -
心得安组 0.03 26.11±2.10＊＊ 159.46±13.73＊＊ 52.15
乙醇总提组 10.00 22.91±2.22＊ 168.09±16.33＊ 33.83
水溶部位 6.80 24.91±3.18＊＊ 158.94±25.37＊＊ 45.50
乙醇部位 5.00 23.73±3.92＊＊ 175.25±26.11 38.61
正丁醇部位 0.30 23.44±2.63＊＊ 177.94±25.37 36.91
乙酸乙酯部位 0.10 18.63±4.12 211.00±32.77 8.82
乙醚部位 0.50 19.15±5.49 196.75±59.12 11.86
石油醚部位 0.41 28.68±4.53＊＊ 157.17±25.07＊＊ 67.52
　　注:与对照组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
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牛蒡子水煎液 、牛蒡苷和牛蒡苷元体外抗菌实验＊
刘　堃
(天津市安定医院 ,天津　300074)
摘　要　目的:对照研究牛蒡子水煎液 、牛蒡苷和牛蒡苷元的体外抗菌作用。方法:采用系统溶剂提取法提取牛蒡
苷 , 再用水浴水解法制得牛蒡苷元 , 以双黄连粉针为对照 ,用纸片扩散法进行抗菌实验。结果:牛蒡苷元和双黄连粉针的
抑菌圈直径均大于 15mm,对 5种菌株均有高度敏感 , 具有很强的抑菌能力。牛蒡苷的抑菌圈稍小 , 直径为 10 ～ 14 mm,但
也比较明显 , 属于中等敏感 , 抑菌能力良好。 浓度为 2∶1、1∶1和 1∶2的牛蒡子水煎液的抑菌圈较小 , 直径均小于 10
mm, 属于低度敏感 ,抑菌能力较差。稀释至 1∶4的牛蒡子水煎液 , 对试验菌株基本无抑菌效果。结论:牛蒡子具有一定
的抗菌作用 , 可以开发为一种新型的抗感染药物。
关键词　牛蒡子 ,牛蒡苷 , 牛蒡苷元 ,抗菌实验
中图分类号:R915　　　文献标识码:A　　　文章编号:1006-5687(2008)04-0010-02
　　牛蒡子(FructusArcti)为菊科植物牛蒡 (Arctium
lappaL)的干燥成熟果实 ,主产于河北 、浙江等地 ,具有
疏散风热 、宣肺透疹 、解毒利咽的功能 [ 1] 。牛蒡子主要
含有木脂素类化合物 ,即牛蒡苷(arctin)和牛蒡苷元
(arctigenin)等 [ 2] ,药理活性研究结果表明 ,牛蒡苷在体
内被分解为牛蒡苷元 [ 3]而产生多种药理作用。本实验
制得牛蒡苷 ,并经水解制得牛蒡苷元。实验表明 ,牛蒡
苷元的抑菌能力很强 ,牛蒡苷抑菌能力良好。
1　材料与仪器
1.1　试药　双黄连冻干粉针(哈药集团中药二厂 ,批
号 0303232), 牛蒡子 (天津市中药饮片厂 , 批号
070417213);蛋白胨(北京双旋微生物培养基地制品
厂 ,批号 000404);营养琼脂 (上海市医学化验所试剂
厂 ,批号 950804);牛肉膏(北京红星生物化学制品厂 ,
批号 940714);以上均为 BR级。所用试剂 ,均为分析
纯 。水为灭菌蒸馏水 。
1.2　菌种　金黄色葡萄球菌 [ CMCC(B)26003] 、绿脓
杆菌 [ CMCC(B)27853] 、白色念珠菌 [ CMCC(F)
98001] 、枯草杆菌 [ CMCC(B)63501]和大肠杆菌 [ CM-
CC(B)44102]均为黑龙江省防疫站提供。
1.3　仪器　SW-CJ-2FD超净工作台(苏州净化设
备厂);R-201旋转蒸发器(上海申胜生物技术有限公
司);AS3120A超声波震荡器(天津自动科学仪器有限
公司);HHB11.420医用培养箱(江苏省连云港墟沟电
器厂)。
2　方法与结果
2.1　供试品制备
2.1.1　牛蒡苷　用系统溶剂提取法提取 ,用大孔吸
附树脂法分离 ,并经硅胶 H减压柱层析法纯化后制得
牛蒡苷[ 4] 。
2.1.2　牛蒡苷元　采用水浴水解法 ,使牛蒡苷经水解
萃取制得牛蒡苷元 [ 4] 。
2.1.3　牛蒡子水煎液　取牛蒡子药材 200 g,恒温(60
℃左右)干燥 8 h,将牛蒡子碾碎外壳 ,置入煎煮锅中 ,
加水 1 000ml,浸泡 0.5h后煎煮 2h,滤过 。滤渣再加
水 1 000ml,煎煮 1.5h,过滤。合并两次滤液 ,浓缩至
100 ml,使成每 1 ml相当于原生药 2 g(即 2∶1)的水
煎液 。冷却 ,离心(3 000 r/min)15 min。取上清液密
封冷藏 ,备用。
2.2　含药纸片的制备 　选用定性滤纸 ,制成直径 6
mm圆片若干 ,置洁净干燥培养皿 ,干热灭菌(140 ℃)2
h,备用。将牛蒡子水煎液的上清液用灭菌蒸馏水稀释
配制 2∶1、1∶1、1∶2和 1∶4四种浓度药液。再将牛
蒡苷 、牛蒡苷元和双黄连粉针 ,用灭菌蒸馏水配制成
1∶1水溶液 。将上述 7组溶液分别置入 7只灭菌培养
皿 ,将灭菌纸片按每组 50片分别置入药液培养皿 ,浸
泡 15 min,取出置洁净干燥培养皿 ,密封冷藏 ,备用 。
2.3　培养基的配制　照《中国药典 》二部(2005年版)
附录ⅪH[ 5] “培养基制备”页下 ,配制营养肉汤培养基
和营养琼脂培养基 。
2.4　试验菌的培养　在无菌室内 ,取金黄色葡萄球
菌 、绿脓杆菌 、白色念珠菌 、枯草杆菌和大肠杆菌 5种
10 天津药学　Tianjin　Pharmacy　2008年 8月　第 20卷第 4期
＊ 收稿日期:2007-09-03