全 文 ：的剂量对复方全方药效 、 毒理作用的影
响 , 有助于复方机理的揭示 , 值得深入研
究。
3.5　已有资料说明长期运用西药钙拮抗剂治
疗冠心病发生心肌梗塞的危险性大大增加;
这一问题已引起医学界充分的重视。中药毒
性一般都比较小 , 而且 , 具有钙拮抗作用的
中药 (如活血化瘀药)还具有很多其他的药
理作用 , 这是西药不具有的。因此 , 开发中
药成为新型钙拮抗剂 , 具有很好的前景。
参考文献:
[ 1] 王序.现代生物分析法对常用中药的筛选研究 [ J] .北
京医学院学报 , 1986 , 18 (1):31.
[ 2] Godfraind T.Action of Nifodipine on Calcium Fluxes and
Cont ract ion in Isolated Rat Arteries [ J] .J.Pharmacol.
Exp.Ther., 1983.244.
[ 3] 连秀峰.中药钙拮抗剂治疗心血管病的现状与展望[ J] .
陕西中医 , 1991 , 11:524.
铁筷子多糖抗肿瘤及免疫调节作用的实验研究
刘　昕1 , 杨永建2
(1.兰州医学院 病理生理教研室 , 兰州 730000;2.兰州医学院 药用植物学教研室 , 兰州 730000)
摘要:观察了铁筷子多糖对体内 、 体外生长的肿瘤组织的抑制效应 , 并对荷瘤鼠脾淋巴细胞转化率 、 IL-
2 活性等免疫指标进行了检测。结果显示 , 铁筷子多糖能有效抑制肿瘤细胞在体内 、 体外的生长 , 减少癌细胞
克隆集落形成 , 体内肿瘤生长速度明显减慢 , 抑瘤率达 53.41%;用铁筷子多糖治疗的动物免疫机能有所改
善 , 这可能是其体内抑瘤作用的机制之一。
关键词:铁筷子多糖/药理学;肿瘤细胞 , 培养的/药物作用;肿瘤种植/药物疗法;免疫系统/药物作用
中图分类号:R 285.5;R 979.1　　文献标识码:A　　文章编号:1003-9783 (2000)04-0213-03
　　中药铁筷子的根及根茎有活血散瘀 、消肿
止痛 、清热解毒之功效 ,临床用于泌尿系炎症 、
疮疖肿痛等 。国外曾报道铁筷子根中具有抑
制人上皮癌 KB 细胞体外生长的成分[ 1] ,我们
从铁筷子根中分离得到了铁筷子多糖(Helle-
bo rus thibetanus Franch Poly saccharides , HF-
PS),采用细胞培养技术观察了 HFPS 对小鼠
淋巴细胞性白血病 L1210细胞和人早幼粒细胞
性白血病 HL -60 细胞克隆集落形成的抑制
作用;利用动物模型观察了 HFPS 对体内生
长的实体型 S180肿瘤的抑制效应 , 并从免疫
药理学的角度对其抑瘤机制进行了初步探讨。
1　材料与方法
1.1　药品 　铁筷子多糖 (HFPS)由我院药
学系药用植物学教研室提取并鉴定 , 色棕黄 ,
易溶于水。临用前以生理盐水配成 10%浓度
的溶液 。
1.2　动物与分组　LIBP 种雄性小鼠 30 只 ,
6 ～ 8 周龄 , 体重 18 ～ 22 g , 由兰州生物制品
研究所动物室提供。动物被随机分为 3 组:
正常对照组;肿瘤组 (右腋皮下接种 1×109/
L S180肿瘤细胞悬液 , 0.2 mL/鼠);　HFPS
收稿日期:1999-10-10
作者简介:刘昕 (1955-), 女 , 副教授 , 硕士学位;主要从事抗肿瘤实验性研究
基金项目:甘肃省自然科学基金资助项目 (2R-97-069)
·213·中药新药与临床药理 2000 年 7月第 11卷第 4期
组 [ 同前法接种肿瘤 , 并于接种当日起用
10%HFPS 溶液灌胃 , 剂量为 10 mL/ (kg·
d), 连续给药 2 周] 。对照组和肿瘤组给予等
剂量的生理盐水 。
1.3　实验方法
1.3.1　集落形成试验[ 2] 　取传代的 L1210和
HL-60 细胞 , 分别计细胞数 , 将 1×106/L
细胞 、 20% 新 生小 牛血清 、 PRM I 1640
(GIBCO)培养液和琼脂半固体培养基混合 ,
充分振荡 , 接种于 35 mm 培养皿中 , 分别加
入 0.1g/ L 、 0.01g/ L 、 0.001g/L 的灭菌铁筷
子多糖溶液于 37℃、饱和湿度 、 5%CO2培养
箱中静置 5 ～ 7 d , 倒置光学显微镜下计≥50
个细胞组成的集落数 。
1.3.2　HFPS 对体内 S180生长的抑制作用　
于肿瘤生长的第 13 天处死动物 , 剥离瘤块 ,
称取瘤重和体重 , 计算抑瘤率 。
1.3.3　HFPS 对荷瘤机体免疫功能的影响
1.3.3.1　脾淋巴细胞转化率的测定[ 3 ,4] 　常
规无菌取脾制成 5×108/L 单细胞悬液 , 刀豆
蛋白 A (Con A)刺激浓度为 10 mg/L , CO2
箱中 37℃培养 68 h , 加入噻唑兰 (MTT)
溶液 10μL/孔 , 继续培养 4 h 后 , 在酶标仪
上测定各组 OD值。
1.3.3.2　IL-2 的检测[ 4] 　取 5×108/ L 浓度
的脾单细胞悬液置培养板内加入 ConA 10g/
L , CO2箱中培养 24 h 后离心取上清液待用 。
另收集培养 48 h 的脾细胞仍以 5×108/L 浓
度重悬于 1640 完全培养液中制成 I L-2 反应
细胞 , 将上述上清液和 IL -2 反应细胞各
100μL 加入 40 孔培养板中培养 48 h , 以
MTT 比色法测定 OD值。
1.3.3.3　腹腔巨噬细胞吞噬功能的检测　参
照文献[ 5]检测荷瘤鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指
数和吞噬百分率 。
1.3.3.4　免疫器官指数的测定　肿瘤生长 2
周后处死动物 , 剥离瘤块称体重 , 摘取胸腺
和脾脏 , 分别称重计算指数 。
2　结果
2.1　HFPS对体外肿瘤细胞克隆集落形成的
抑制效应　在相同的培养条件下 , 随着 HFPS
浓度的增加两种肿瘤细胞集落形成明显减少 ,
此抑制效应呈剂量依赖性。见表 1 。
表 1　HFPS 对肿瘤细胞体外生长的抑制效应
药物浓度
(g·L-1)
集落数/( x±s ,个)
　L1210　　　　　HL-60　　
　 集落形成率/ %　L1210　　　　HL-60　
　 杀伤残存率/ %　L1210　　　　　HL-60　
0(对照) 400±49 383±45 　 40.0 　38.4 　　100 　　100
0.001 359±17＊ 304±24＊ 35.9 30.4 90 76
0.01 316±31＊＊ 238±27＊＊ 31.6 23.8 79 62
0.1 216±50＊＊ 177±30＊＊ 21.6 17.7 54 43
　　注:与正常对照组比 , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01。
2.2　HFPS对体内移植性实体瘤 S180生长的
抑制效应
结果表明 , 肿瘤组瘤重为 2.20±0.92g ,
而 HFPS 组瘤重为 1.03±0.56g (N =10),
抑瘤率为 53.41%。HFPS 能明显抑制 S180在
体内的生长 , 且与肿瘤组相比 , HFPS 组之瘤
块相对完整 , 易于剥离 , 瘤体明显小于前者 。
肿瘤周围无显著出血水肿现象 , 动物整体状
态较好 , 精神及食欲等都优于肿瘤组 , 证明
HFPS 具有较好的抑制体内肿瘤生长的作用。
2.3　HFPS 对荷瘤机体免疫系统的影响
2.3.1　对免疫器官的影响　单纯接种肿瘤的
动物 , 胸腺组织有一定程度萎缩 , 其胸腺指
数小于对照组 (P <0.01);而 HFPS 组胸腺
·214· 中药新药与临床药理 2000 年 7 月第 11 卷第 4 期
增生肥大 , 指数增加 , 证明 HFPS 对胸腺组
织有保护作用。结果亦显示 HFPS 并没有增
加脾指数的作用 。见表 2。
表 2　HFPS 对荷瘤鼠免疫器官的影响 ( x±s)
组　别 动物数/只
胸腺指数
(mg·g -1)
脾指数
(mg·g-1)
正常对照 10 2.27±0.78 6.82±1.94
肿瘤组 10 1.44±0.55＊＊ 7.13±2.51＊
HFPS 组 10 2.79±0.93＊＊ 6.66±2.04
　注:与正常对照组比 , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01。
2.3.2　对脾淋巴细胞增殖反应和 IL-2 水平
的影响　如表 3 所示 , HFPS 能有效增强荷
瘤机体脾细胞对 ConA 的反应 , 促进淋巴细
胞分化增殖 , 并诱生较多 IL -2;而不用
HFPS 治疗的荷瘤鼠其淋巴细胞转化率和 IL
-2 水平则均较低 。见表 3。
　　　表 3　HFPS 对荷瘤鼠脾淋巴细胞转化率
和 IL-2 水平的影响 ( x±s)
组　别 动物数/只
脾淋巴细胞
转化率/ % IL-2
正常对照 10 1.24±0.08 0.432±0.098
肿瘤组 10 1.17±0.04＊ 0.174±0.039＊＊
HFPS 组 10 1.88±0.07＊ 0.549±0.113＊
　注:与正常对照组比 , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01。
2.2.3　对腹腔巨噬细胞功能的影响
HFPS 有增强荷瘤鼠腹腔巨噬细胞吞噬功
能的作用 , 从表 4 可知 HFPS 组的吞噬百分
率和吞噬指数均比较高。见表 4 。
表 4　HFPS 对荷瘤鼠腹腔巨噬细胞功能的影响
( x±s)
组　别 动物数/只 吞噬率/ % 吞噬指数
正常对照 10 　41.0±8.1 　　0.49±0.07
肿瘤组 10 42.4±6.9 0.45±0.09
HFPS 组 10 52.4±8.3＊＊ 0.57±0.11
　注:与正常对照组比 , ＊＊P<0.01。
3　讨论
肿瘤是当前对人类健康的最大威胁之一 ,
而许多恶性肿瘤的发生发展又与机体免疫机
能低下有密切的关系 。利用中草药提高免疫
功能则是近年来临床治疗恶性肿瘤所常采用
的免疫辅助疗法之一 。
本实验对分离得到的铁筷子多糖的抗肿
瘤活性作了较系统的研究 , 结果表明 , 在细
胞培养体系中加入不同剂量的 HFPS 后 , 两
种细胞克隆受抑制 , 集落形成率降低 , 剂量
越大此抑制作用越明显 , 说明铁筷子多糖可
干扰肿瘤细胞在体外的生长 , 具体机制尚待
进一步探讨 。实验同时还显示 HFPS 对肿瘤
在体内的生长亦有显著的抑制作用 , 为探讨
此作用机理 , 我们对荷瘤机体的免疫功能进
行了检测 , 实验证实 HFPS 能明显改善机体
的免疫功能 , 逆转因肿瘤生长而造成的免疫
抑制状态 , 其免疫调节作用可表现在提高脾
淋巴细胞转化率 , 诱生较多的 IL-2 , 增加胸
腺指数等诸方面 。巨噬细胞的活化在抗肿瘤
免疫中的作用已为公众所认可 , 用 HFPS 治
疗后荷瘤机体巨噬细胞功能活跃 , 这对其识
别 、结合 、 吞噬肿瘤细胞及产物等起到积极
作用。实验提示 , HFPS 具有较理想的抗肿瘤
作用 , 其在体内的抑瘤机制与免疫调节作用
有关。
参考文献:
[ 1] 郭晓庄主编.有毒中草药大辞典 [ M] .天津:科技翻
译出版公司 , 1992.435.
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·215·中药新药与临床药理 2000 年 7月第 11卷第 4期
(0.25mm×300 mm)in conjunction wi th FID as the detector , high purity N2 as the carrier gas ,
and isopsoralen as internal standard.Results showed that the concentrat ion_t ime ef fect of muscone in
rat plasma and rat brain could be described as the two_compartment model:in plasma , K a =1.
66 h-1 , α=0.58 h-1 , β =0.45 h-1 , T 1/2(β)=1.53 h , T 1/2(α)=1.19 h , T1/2(Ab)=0.42 h , Tmax
=1.5 h , Cmax =3.14 g/L;in brain , K a=1.28-1 ,α=0.74 h-1 , β =0.56 h-1 , T1/2(β)=1.24 h ,
T 1/ 2(α)=0.94 h , T 1/2(Ab)=0.54 h , Tmax =1.5 h , Cmax =2.37 mg/g , It is indicated that muscone
is abso rbed rapidly af ter oral administration and enters brain tissue through the blood_brain barrier
quickly.
Keywords:muscone/pharmacokinetic;plasma;brain;T LC
(o riginal article on page 208)
Effects of Various Combinations of Herbal Medicines on Three Kinds of Calcium Channels
DING Wei_huang , RUAN Xiao_yan , MO Shang_wu , et al.
(1.Sichuan Institute of T raditional Chinese Medicine , Chengdu 610041;
2.Sichuan Joint University , Chengdu 610041)
Abstract:The effects of compound prescript ion in various combinations fo r co ronary heart disease on
three kinds of calcium channels w as observed by 　45Ca transmembrane mobile technique.The re-
sults show ed that:(1)The whole prescription , the individual herb or the herb groups only (or
mainly) act on receptor_operat ing calcium channel (ROC) or pulse_dependent calcium channel
(PDC), which is different from Verapamil in most case;(2)Herbal medicines with the action of
activating blood circulat ion and removing blood stasis mainly act on PDC while Radix Codonopsis Pi-
losulae and Radix Astragali seu Hedysari activ ate ROC;(3)Herbal medicines for removing damp-
ness , tonifying kidney and activating blood circulation and removing blood stasis have a st ronger cal-
cium_antagonist effect.
Keyworsds:Calcium channel blockers/ therapeutic use;compounds;simple recipes
(o riginal article on page 211)
Experimental Study on Anti_Tumor and Immunoregulatory Action of Helleborus
Thibetanus Franch.Polysaccharide (HFPS)
LIU Xin
1 , YANG Yong_jian2
(1.Dept.of Pathophy siolog y , Lanzhou Medical College , Lanzhou 730000;
2.Dept.of Medicinal Bo tany , Lanzhou Medical College , Lanzhou 730000)
Abstract:The inhibitory effect of Helleborus thibetanus Franch.Polysaccharide (HFPS)on the
g row th of tumor w as observed in vivo and in vit ro.The spleen lymphocytes transformation rate and
IL_2 activity in tumor_implanted mice w ere examined.The results show ed that HFPS could inhibit
the g row th of tumo r effectively in vit ro and in vivo(the inhibitory rate of tumor grow th w as 53.41%
in vivo), and inhibi t the formation of tumor cell colony g roup.It is indicated that improving the
immunity function is probably one of the tumo r_inhibting mechanism of HFPS .
Keywords:Helleborus thibetanus Franch.Polysaccharide/pharmacology ;tumor cells , cultured/
drug ef fect;Neoplasm seeding/drug therapy;immune system/drug of fect
(o riginal article on page 213)
·255·中药新药与临床药理 2000 年 7月第 11卷第 4期