全 文 ：C h i n a P h a rm a c i s t 2 0 1 3 ，中 国 药 师 年第 卷第 期
产生的二价铁也与 络合 ； 采用
硫酸铜溶液 样品产生的杂质峰能与 峰达
到较好的分离 ，故选用硫酸铜作螯合 ， 并对硫酸铜用
量进行筛选 ， 采用本文条件比较适合 。
曾 试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ， 螯
合剂 为硫酸铜 流动相与文献 相 同 ， 峰
保留 时间较小 。 本文采用 柱
为杂化颗粒硅胶为 填充剂 是通过强极性 固定性 ， 并
结合高比例有机相 低 比例水相组成的 流动相来实
现 适用于普通反相色谱柱难 以保 留 的物质 ，
峰保留 时间为 左右 。
采用梯度洗脱 ， 使干扰组分被充分洗脱 提高
了 检测 的准确性 ， 曾 试验流动相为 — 的
乙酸铵 （ 用冰醋酸调节 至 乙腈 （ 发
现样 品 中的 峰的保 留时间有漂移现象 可
能是样品 中有其他成分 的影响 ， 使用本文梯度后无
漂移现象 。
参 考 文 献
郑虎 药 物化 学 北京 ： 人民 卫生 出版社 ，
韩继永 ， 张秋香 反相髙效液相色谱法测定注射用奥美拉唑钠中
乙二胺四 乙 酸二钠 含量 医 药 导报 ， ，
刁岩忠 ，韩继永 法测定注射用 泮托拉唑钠 中 乙二胺四乙
酸二钠的含量 药物分析杂志 ， ， ：
屈蓉 ， 钱桂英 ， 陈佳 反相离子 对高效 液相色谱法测定盐酸林可
霉素注射液中 乙二胺 四 乙 酸二钠 的含量 药 学 与 临 床研 究 ，
：
丨 收稿 修 回 ）
法 同 时测定直缘乌头 中 草乌 甲 素及滇乌 碱的 含量
熊 耀嘉 字淑慧 ’ 吴静 熊娇 吕 丹 李晓波 杨生超 沈勇 “ 滇 虹 药业 集 团 股 份有 限 公 司 昆
明 云 南 农 业 大学 农学 与 生 物 技 术 学 院 ； 云 南 农 业 大 学云 南省 优势 中 药 材规 范 化 种植工程研 究 中 心 ）
摘 要 目 的 ： 建立 同 时测 定直缘乌 头 中 草 乌 甲 素 和 滇乌 碱两种 二 萜 生 物 碱类 化合物含 量的 高 效液相 色谱方 法 。 方法 ：
采用 色谱枉 ； 流动相 为 三 乙胺水容液 用 辨 酸调 节 至 ± 乙腈
流速 为 ； 检测 波 长 为 柱温 为 。 结果 ： 草乌 甲 素和 滇乌 碱分別 在 闷和
范 围 内 呈 良好 线 性 关 系 （ 「 草 乌 甲 素和 滇 乌 碱的 平 均 回 收 率分 别 为 ， 分别 为
， 卜 。 结论 ： 该方 法 简 便 、 准 确 ， 分 离 效果好 ， 可 用 于直缘乌 头 中 草乌 甲 素及 凑 乌碱的含量测 定 。
关键词 直缘乌 头 ； 草乌 甲素 ； 滇乌 碱 高 效液相 色谱 法 ； 含量测 定
中 图分类号 文献标识 码 文章编号
， ， ， ，
， ； ；
：
：
±
：
， ： ，
； ； ； ；
直缘乌 头 （ 为毛莫
科乌头属植物 ， 主要分布于云 南西北部 （ 丽江玉龙
山 ） ， 民间用于治疗风湿骨痛 、 跌打损 伤等症⑴ 。 直
缘乌头的化学成分已 有报道 ， 主要为 二萜生物碱
基金项 目 ： 云南 省社会发展科技计 划项 目 （ 编号
通讯作者 ： 沈勇 ：
类化合物 … ， 是工业生产草乌 甲 素的 主要原料之
一
。 草乌 甲 素具有显著的镇痛及抗炎等生理活性 ，
以草乌甲 素为原料制成 的片剂 、 注射剂等多种 剂型
广泛用于治 疗各 种急 、 慢性疼 痛及风 湿性关节 炎
w w w . z g y s . o r g
研 免 板告
、类风湿性关节炎 （ 、肩 周炎等症 … 。 滇
乌碱同 为 二萜生物碱 ， 与 草 乌 甲 素结构相似 具
有镇痛 、抗 炎 及免疫调节等作用 “ 。 目 前 ， 尚 未
见 对直缘乌头中特征成分草乌 甲 素和滇乌碱含量研
究的报道 。 本试验首次建立了 同时测 定该植 物中
种化合物含量的高效液相色谱法 ， 用 于直缘乌头的
质量控制 与评价 。
仪器与试药
系 列高效液相色谱仪 （ 四
元泵 、 自 动进样仪 、 柱温箱 、
二极管阵列检测 器 ） 和 工作站 ，
梅特勒托利多 型 电子天平 （ 瑞士
公 司 ） ， 超纯 水 机 （ 美 国
公 司 ） ， 中 药高速粉碎机 （ 浙江永 历制 药机
械有限 公司 ） 。
草乌甲 素 （ 批号 〗 〉 和滇乌碱 批号 ：
对照品 购 于 中 国科学院昆 明 植物研究
所植物化学与西部植物资源持续利用 国家重点实验
室 （ 纯度均 。 乙腈 为 色 谱纯 ， 水 为 超纯
水 ， 其余试剂 为分析纯 。
直缘乌 头样 品 采 自 云南 省丽江市 玉龙县 经 中
国科学院昆 明植物研究所雷立功副研究员鉴 定为直
缘乌头 拉丁学名为 〖 。
方法与结 果
色谱条件
色 谱 柱 ：
； 流动 相 三乙 胺水溶液 （ 用
磷酸调 节 至 ± 乙 腈 （ 流速 ：
； 检测 波长 柱温 ； 。 对
照品及直缘乌头 样品色谱 图见 图 。 滇 乌碱及 草乌
甲 素色 谱峰 的保留 时间 分别 为 。
对照品 直缘乌 头样 品提取液 滇乌碱 草乌 甲 素
图 色谱 图
对照品溶液的 制 备
精密称 取草 乌 甲 素及滇乌碱对照品 适量 用 甲
醇 制 成 每 含 草 乌 甲 素 和 滇 乌 碱
的溶液 作为对照品溶液 。
供试品溶液的 制 备
取本品粉末 过 目 ） ， 精密称定 精密 加
入 甲 醇 称定重量 ， 超声处 理 （ ，
放至室温 ， 用 甲 醇补足 减失 的重
量 ， 摇匀 滤过 ， 取续滤液 ， 即得 。
线性关 系 考察
精密量取 “ ” 项下对 照 品溶液 ， ， ， ，
… ， 注入高效液相色谱仪 ， 以 色谱峰 峰 面积 （
为纵坐标 ， 进样量 （ ， 网 ） 为横坐 标绘制 标 准曲 线 。
结果见表 。
表 种生 物碱的线性方程
化合物 线性范围 （ 线性 方程
草乌 甲 素
滇乌碱
精 密度试验
精密吸取对照品溶液 按 “ ” 项下色谱
条件 连续进样 次 ， 草乌 甲 素和滇 乌 碱峰 面积 的
分别 为 ， 。
稳 定性试验
取待测 供试品溶液按 “ ” 项下 色谱条件分别
在 ， ， 分别 进样测 定 ， 滇乌 喊 和草乌
甲素 峰面积的 分 别 为 ， 表 明 供试
品溶 ？仪在 内稳定
重 复性试验
精密称取直缘乌 头药 材粉末 ？ ： ， 平行称定
份 ， 按 “ ” 项 下方 法操作 ， 制 备供试品 溶液 份 ，
每份精密吸 取 … 按 “ ” 项下色谱条件测定 ， 草
乌 甲 素和滇乌碱的平 均含量分别 为
吕 分别为 ，
回 收 率试验
精密 称取草 乌 甲 素 和滇乌 碱适量 配成浓度 为
— 的混合 对照 品溶液 ， 取 已 知 含
量的直缘乌 头药材粉末约 平行试验 份 ， 精
密称定 分别加人混合对 照品 溶液 按 “ ” 项
下方法制 备供试溶液 ， 精密 吸取 注 人 液相 色
谱仪 ， 按 “ ” 项下 色 谱条件测 定 。 草乌 甲 素 和滇
乌碱的平均 回收 率分别为 分
别为 。
样品含量测 定
取 份直缘 乌头药材 粉末 ， 精 密称 定 按
项下制 成供试品溶液 ， 按 “ ” 项下方法制 备
供试 品溶液 ， 依法进样测定 ， 用外标法计算 草乌 甲 素
和滇乌碱的 含量 。 结果见表 。
表 样品 中草 乌 甲 素和 滇乌碱含量测定 结果 （ ％
样品批号 草乌 甲素 滇乌碱
“ “
中 国 葯 师 年第 卷第 期
讨论
草乌 甲 素为 生产草乌 甲 素片剂 和 注射剂 的成
分 ， 有制药企业用直缘乌头来进行该原料的生产 ， 该
药材中草乌 甲 素含量 目 前 尚未报道 ， 本试验首次量
化直缘乌头中草乌 甲 素的 含量 对草乌 甲 素 的 资 源
寻找和生产提供了依据 。 本试验采用高效液相色谱
法首次对直缘乌头特征成分草乌 甲 素和滇乌碱进行
含量研究 经过方法学考察 ， 筛选 出 较 佳的 实验参
数 ， 色谱条件简单 ， 方法可靠 ， 分离效果好 ， 为直缘乌
头的质量评价提供了依据 。
参 考 文 献
中 国科学 院昆明植物研究所 云南植物志 第 丨 卷 北 京 ：
科学 出版社 ，
，
：
陈东林 ， 简锡 贤 ， 陈巧鸿 ， 等 直缘乌头 中新 的 二萜生物碱
的结构研究 化学 学报 ， ，
陈东林 ， 简锡 贤 ， 陈巧鸿 ， 等 直缘 乌头根 中生物碱成分的研究
华西 药学 杂志 ， ：
， ， ，
唐希灿 镇痛抗 炎新药滇西嘟 拉碱 甲 新药 与 临 床 ， ，
；
陈筱云 ， 夏晓玲 ， 熊济民 等 草乌甲 素 片镇 痛抗炎作 用 例临
床观察 云南 中 医 中 药 杂志 ， 丨 ， ：
张源潮 杨清锐 ， 尹宏恩 等 草乌 甲 素治疗骨 关节炎 及类 风湿关
节炎临床观察 中 药 药理与 临 床 ，
林志共 ， 蔡 文 ， 唐希灿 滇乌碱 的抗炎 和镇痛作用 中 国 药理
学与 毒理学杂 志 ， ：
李晓玉 ， 蒋 开明 ， 林子瑛 滇乌碱 的免疫 调节作用 中 国 药 理
学与 毒理学杂 志 ，
收稿 修回 ）
法测定注射用 甲 钴胺在 氯化钠注射液中 的 浓度
夏军 龙 ‘ 王毅刚 王景景 王谦 陕 西 省 核 工 业 二 一 五 医 院 临床 药 学 室 陕 西 咸 阳 陕 西 科 技 大 学 生
命 与 科 学 学 院 药 学 系 ）
摘 要 目 的 ： 建立 氯化钠注射 液 中 甲钴胺 的 含量 测 定 方法 方法 ： 采 用 高 效液相 色谱法 ， 色谱柱 为
流动相为 乙 腈 水 （ 含冰 乙 酸 ： ， 流速为 “ 检测 波长 。 结果 ： 在
氯化钠注射液 中 甲 钴胺在 范 围 内 线性 关 系 良好 ， ， 平 均 加样 回 收 率 为 ，
。 结论 ： 该方法 简便 、 准确 可靠 、 重复性好 ， 可 用 于 氯化钠 注射液 中 甲 钴胺浓度的 测 定 。
关键词 甲钴胺 氯化钠 注射液 ； 高效液相 色谱法 ； 含量测 定
中 图分 类号 文献标识码 文章编号 ： 丨
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：
甲 钴胺又称 甲 基维生素 ， 是维生素 系列
品种中的一种有机钴胺素 ， 临 床主要用于多种疾病
引起的周围 神经病变 的治疗与 预防⑴ 。 甲 钴胺的
化学性质不稳定 ， 对光敏感 ， 尤其在水溶液状态下 ，
由 于甲钴胺分子被水分子所分散 ， 使之对 光的通透
基金项目 ： 咸阳 市基础研究项 目 （ 编号
通讯作者 王毅刚
； ；
性大大增加 再加上水溶液中 的氧气的 氧化作用 ， 甲
钴胺的光解作用 大大加强 ’ 。 也正 因 如 此 ， 注射
用 甲钴胺说明书中规定该药的给药途径应为肌内注
射或静 注射 。 但该药在临床使用过程中 ， 同 样存
在着经验 ‘性静脉滴 注的用法 溶媒 多选择