全 文 ：2以为 年 3 月
第 32 卷 第 2 期
四川师范大学学报 (自然科学版 )
J
o u rn l of S ai e h u n aN
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r ml a U山 ve r sit y (N t au rl aS e ie n e e )
M r a
.,
20 9
V o l
.
32
,
N o
.
雪灵芝抗大鼠运动性疲劳的研究
柳 丽 , , , , 黎 霞` ’ , 张 丽 `
( 1
. 四川师范大学 生命科学学院 , 四川成都 61 0 6 , 2 . 绵阳师范学院 体育与健康教育学院 , 四川 绵阳 62 1侧洲) )
摘要 : 以 W ist ar 大鼠 ( atR t出 on o e g比。 )作为受试动物 ,将其随机分为灌服雪灵芝 ( eH 活 a er an ~ )组和
灌服生理盐水组 ,采用逐级递增负荷使大鼠运动至力竭的方法 ,研究藏药雪灵芝抗疲劳的作用 . 经一个月的
游泳训练 ,通过测试对照组和实验组大脑组织内丙二醛 ( MD )A 、乳酸 ( LD ) 、 一氧化氮 ( NO ) 、 超氧化物歧化
酶 ( s 0 )D 、 N a 十 K 十 · A PT 酶和 c扩气A PT 酶的含量 ,观察并比较两组大鼠疲劳恢复的情况 . 结果表明 :灌服雪
灵芝大鼠组与对照组相比 ,运动至力竭时间显著延长 ;大脑组织 MD A , N O , LD 含量降低 ; SO D , N a 十 一K + 一 APT
酶 、 C犷` ~ AT p 酶的活性提高 . 因此 ,雪灵芝有抗疲劳 、促使疲劳恢复的功效 .
关键词 : 雪灵芝 ; 抗疲劳 ; 运动能力
中图分类号 : 2R 85 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 100 1 一83 95 ( 2X() 9 ) 0 2刁24 6刁 3
运动性疲劳是人体在运动过程中一次强有力
的负荷或持续运动负荷后 ,靠应力集中的运动器官
(关节 、韧带 、骨骼 、肌肉)和与之密切相关的脏器的
协调功能下降 、 能量不足等所引起的一系列生理
性 、功能性的变化 . 它导致运动器官功能下降 ,感觉
不适 , 能量缺乏和代谢产物的堆积等现象川 , 如果
疲劳没有得到及时的恢复而使疲劳累积将导致疲
劳过度 ,从而会严重影响运动成绩 , 对身体的健康
也会造成不良影响 .
雪灵芝肠陌动 a er an urz 。 )又名草灵芝 ,它是一种
传统的藏药 , 其化学成分复杂 , 经化学鉴定雪灵芝
中含有生物碱 、 皂贰 、 黄酮 、 氨基酸 、 香豆素和多糖
等多种成份 [’ 〕 . 目前对雪灵芝抗缺氧作用已有研究
结果 ,但对于抗运动性疲劳的功能却未见报道 .
1 材料和方法
1
.
1 材料 动物选用纯种 W ist a r 大鼠 40 只 , 均为
雄鼠 , 2 0 0 9 左右 , 由四川省医学科学院实验动物研
究所提供 . 试剂盒均购自南京建成生物制剂研究
所 ,其余试剂均系国产分析纯 . 雪灵芝来源于西藏
金珠制药厂制备的全草干粉剂 .
T U
一
18 o 0 S P C 紫外可见 光光度计 , 购 自北京普
析通用仪器有限责任公司 .
1
.
2 实验方法
1
.
2
.
1 分组与负荷安排 将大鼠随机分为 : 对照
组 (生理盐水灌 胃) 20 只 , 实验组 (雪灵芝灌胃 ) 20
只 . 两组大鼠均笼养 ,正常饮食 . 在正式实验前进行
适应性训练 Z d ,每天下午 4 : o 游泳一次 , 每次 10
m in
. 正式开始试验时 , 两组分别采用逐级递增负荷
训练 (第一周负重为体重的 2% ,第二周为体重的
3%
,第三周为体重的 4% ,第四周为体重的 5% . ) ,
负重方法为每只大鼠尾上缠绕一定重量的铅丝 . 均
于每天下午 4 : 0 0 开始训练直到大鼠力竭 , 力竭的
标准是 :大鼠游泳动作明显失调 ,不能再坚持或沉
人水底超过 5 5 不能回到水面为力竭 ,捞起放于地
面 ,不能做翻正动作 . 训练结束后 30 m in 灌胃 ,连续
训练 4 周 .
1
.
2
.
2 训练过程中重要情况的观察 每天观察大
鼠的精神状态 、饮食情况 ;每周末测定一次力竭游
泳时间 .
1
.
2
.
3 指标测定 大鼠处死安排在最后一次训练
结束后 36 h , 以避免急性训练因素对测试数据的影
响 . 方法是迅速断头处死大鼠 ,取出脑组织 ,用冰生
理盐水冲洗掉血液 ,用滤纸吸干水分 . 在生理盐水
冰盘上分离双侧大脑皮层 ,称重后放在含有冰生理
盐水的离心管中 (离心管置于冰浴中 ) . 用超声波细
胞粉碎机制成质量体积分数 10 % 的组织匀浆液 ,置
于离心机中 , 以 3 0 0 0 r/ m in 离心 or m in , 提取上清
收稿日期 : 2 0 7 一 09 一 18
基金项目 : 四川省教育厅自然科学重点基金 ( 2 (X峙 A 09 2) 资助项目
, 联系作者简介 : 黎 霞 ( 19 6 0一 ) , 女 ,副教授 , 主要从事神经生物学和药理学的研究
第 2期 柳 丽等 : 雪灵芝抗大鼠运动性疲劳的研究
液用于丙二醛 ( MD A )、乳酸 ( L D )、一氧化氮 ( N O )、
超氧化物歧化酶 ( o s D )、 N a` 一K ` 一 T A p酶和 C a, + -
AT P 酶以及蛋白质的测定 .
1
.
2
.
4 实验数据处理 实验数据均以 无士 : 表示 ,
组间采用 t 检验进行统计 .
2 实验结果
2
.
1 实验期大鼠状态观察
2
.
1
.
1 一般情况的观察 试验组在整个实验过程
中始终神态安静 , 活泼好动 , 皮毛光整 , 眼睛有神.
对照组在训练至第二周后 , 明显烦躁不安 , 易怒 . 第
三 、 四周均出现反应迟钝 ,精神萎靡不振 , 眼神暗淡
无光 , 毛发脱落 . 实验组的饮食无明显改变 ,对照组
饮食量在第三 、 四周明显减少 .
2
.
1
.
2 游泳时间的变化 对照组大鼠游泳时间逐
渐下降 , 第四周与第一周相 比有显 著差异 ( 尸 <
0
.
0 1)
. 实验组大鼠游泳时间逐渐延长 ,第四周与第
一周相比游泳时间显著增长 ( 尸 < 0 . 01 ) . 实验组与
对照组相比 ,第二周就有明显差异 ( 尸 < 0 . 05 ) , 与第
三周、第四周比较有显著差异 (尸 < 0 . 01 ) ,见表 1 .
表 1 递增负荷训练大鼠游泳时间 (而 n) 的比较
T a b le 1 C o m P aasr iou
o f p r鲍 r已弥 iv e l y i n c r eas 运 g
Io a d an d
s衍 m tiar 扭 n g o n 而 c e
对照组 实验组
第一周 25 . 1 11 士 2 . 9 35 一 25 . 333 士 3 . 00()
第二周 23 . 4 27 士 0 . 7 85 3 2 . 642 士 1. 75 3 ’
第三周 22 . 53 8 土 1 . 2 84 4 1 . 4 62 士 4 . 24 3 “
第四周 17 . 1 11 士 0 . 65 5 ` ’ 4 8 . 833 士 1 . 2 18 ”
注 :与对照组相比 , * 为 尸 < 0 . 05 , * * 为 尸 < 0 . 01 .
2
.
2 LD H
,
N o
,
M D A
,
S o n 数据比较 表 2 表明 :
实验组大鼠脑组织的 SO D 与对照组相比 , 活性明
显升高 (尸 < 0 . 01 ) . M DA , LD , N O 实验组 比对照组
明显降低 ( 尸 < 0 . 0 1) .
表 2 递增负荷习1练后 ,脑组织 MDA ,OS D , DL H , NO 含量的比较
T a b le 2 C o m P a asr i
o n o f leI br
a er n a ha
e o n M D A
,
S O D
,
L D H
,
NO o f 而ce aft e r a浦一ex e r d s e · ind u e e d fa t i g u e
对照组 实验组
MD刀 ( n lo · 哪 一 ’ ) 1 8 . 2 06 土 4 . 484 7 . 35 7 士 0 . 6 7 3 ’ `
SO D / ( u
·
m g
一 ’
) 4
.
9 36 士 2
.
868 5
.
30
士 0
.
4 6 3
’ `
L D / ( u
·
g
一 ’
) 1 8
.
20 6
土 4
.
4 84 7
.
357 土 0 . 67 3 ’ `
N ( )/ ( 件L · g 一 ’ ) 6
.玛 士 0 . 865 “ 3 . 5 5 7 士 0 . 4 6 3 ’ `
注 :与对照组相比 , * * 为 P < 0 . 01 .
2
.
3 N a
十 一
K
十 一
ATP 酶 、 C a Z气 A T P 酶数据 比较 表
3 表明实验组大鼠脑组织 N a + 一K 十 一A TP 酶 、 C a Z 十 -
AT P 酶含量比对照组明显升高 ( 尸 < 0 . 01 ) .
表 3 递增负荷训练后 ,脑组织 N a 十 一K 令 一 ATP 酶 、
ca
Z ` 一
A T p 酶含量的比较
T a b le 3 C o m钾asr io n o f eH br a ern a iar e o n N a 十 一K + 一 ArP , e a Z 令 -
ATP as e of 面 cs a rt e r a int · xe er c i se .恤 d cu de af it gU e
对照组 实验组
N a
十 一
K
` ~
AT P酶 /
(卜m ol
·
m g
一 ’ · h 一 ’ )
5
.
532 士 0
.
5 83 6
.
0 10 士 0 . 4 2
aC
, 十 一 A Tp 酶
(林m o l
·
m g
一 ’ · / h
一 ,
) 14
·
427
士 1· 62 1 ` ’ 14
·
35 6 ` 1
·
l卯
注 :与对照组相比 , * * 为 尸 < 0 . 01 .
3 分析
运动性疲劳是运动生理学领域一项重要研究
课题 . 在竞技体育运动中 ,疲劳的消除和体力的恢
复与运动训练有着同等重要的意义 . 疲劳可能发生
的两个部位 : 一是发生在中枢神经系统 , 称为中枢
疲劳 ;一是发生在外周 (即脊髓运动神经 、 神经肌肉
接点和骨骼肌 ) , 为外周疲劳 . 近年来 , 随着新技术
的应用和神经生物学研究的发展 , 运动性中枢疲劳
的研究取得了突破性进展 , 研究领域已从细胞 、 亚
细胞水平研究细胞的结构与功能 , 深人到各种神经
递质 、神经调质以及酶促反应相关的分子水平研究 .
3
.
1 运动性疲劳与酶促反应的关系 近年来研究
已经证实 ,氧自由基的生成与线粒体的氧利用率成
正 比 . 运动时 ,脑组织线粒体氧利用率增加 ,介导自
由基增多 , 自由基的增多使脂肪过氧化代谢产物丙
二醛 ( MD A )增多毛’ 〕 . M DA 作为过氧化反应的重要
代谢产物对细胞有严重的毒性作用 ,从而最终引发
中枢疲劳的发生 t` ] . 超氧化物歧化酶 ( s o D )是体内
主要自由基清除酶 , 能够有效地清除并终止超氧阴
离子引发的连锁反应 t ’ l . N 。 ` 一K ` 一A TP 酶富含脯氨
酸 、赖氨酸 ,它们易发生 自由基介导的修饰反应 , 其
结构发生改变 , 从而使酶活性降低 ,所以升高 N a ` -
K
+ 一
AT P 酶活性对 于中枢疲劳的恢复具有重 要意
义 : 6了. c a , ` 一 ATP 酶主要功能是通过消耗 AT P 酶提
供的能量 ,将细胞内 aC , + 泵至细胞外或泵人细胞
内 . c a , ` 一 A TP 酶活性降低会影响 c a , ` 的转运 而导
致细胞内 c a Z ` 浓度增高 , 胞内过高的 c a , ` 又可激
活磷脂酶使膜磷脂降解 ,使细胞膜通透性进一步增
加 ,胞外 C a Z 十 浓度顺差又大量内流继而加重神经细
四川师范大学学报 ( 自然科学版 ) 32 卷
胞结构和功能的损害以致死亡 [ ’ 〕.
本研究中 , 实验组和对照组脑组织中的 S OD
呈显著性差异 , 实验组高于对照组 ,可见雪灵芝能
显著提高 SO D 清除自由基的能力 . M DA 可间接反
映机体受氧自由基损伤的程度 ,实验组含量显著低
于对照组 ,这充分说明了雪灵芝能显著性的提高机
体淬灭自由基 ,减少脂质过氧化作用 ,减少 M DA 的
生成 ,提高机体抗氧化的能力 . 实验组 N a 干 一 K 十 一A TP
酶 、 C a , 十 一 APT 酶含量比对照组明显升高 , 说明雪灵
芝能提高 N a ` 一K 十 一A TP 酶 、 C a Z 于 一 ATP 酶活性 .
3
.
2 运动性疲劳与神经调质的关系 运动负荷过
大会影响大鼠大脑组织一氧化碳合酶 ( N O )S 和内
皮素 ( E D . m R N A ) 的表达 . 大强度运动中 N OS 和
E n
.
M m a 表达减弱 ,而 E T 一 I Mm a 表达增强 ,从而弓!
起局部血管持续收缩导致相应局部缺血 L` ] . 脑缺
血 、缺氧时由于兴奋性氨基酸 ( E A A )大量的释放 ,
激活 N M DA 、 K A/ AM P A 等代谢受体和钙蛋白结合
使一氧化氮 ( No )生成增加 , 介导 E AA 的毒性 [’ ] .
本研究中 ,两组脑组织中 N O 的含量表现显著性差
异 ,实验组较对照组的 NO 含量大大降低 , 说明雪
灵芝能改善力竭性运动训练后 N O 的毒性作用 ,对
机体淬灭 自由基抗氧化作用有显著积极的作用 .
3
.
3 运动性疲劳与某些小分子物质的关系 持续
大强度运动至力竭导致中枢疲劳 , 乳酸显著增高 ,
提示运动性中枢疲劳发生时出现乳酸累积 ,乳酸增
高可能在中枢疲劳发生中起重要作用 [ ’ 。一川 . 本研究
中 ,实验组脑组织中的乳酸 ( LD ) 含量明显低于对
照组 ,说明雪灵芝有促进堆积在大脑中 L D 的代谢 ,
加快中枢疲劳的恢复 .
本实验表明雪灵芝能有效提高大鼠运动能力 ,
明显延长力竭运动时间 ,且具有协同运动训练 ,提
高运动能力的作用 ;雪灵芝能有效的提高大鼠抗氧
化能力 , 明显促进大鼠中枢性疲劳的恢复 .
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