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土人参叶“解毒消痈”疗效及作用机制的实验研究



全 文 :收稿日期: 2008 - 01 - 15
基金项目:福州市科委资助项目 ( 2003 - 06)
作者简介:聂建华 ( 1978 - ),男,山西寿阳人,讲师,硕士研究生, 研
究方向:中草药配伍研究及新药开发。
MAP -2主要分布于成熟神经元内, 而低分子量 MAP - 2
主要分布于发育的神经元内。GFAP是星形胶质细胞的标
志物,在本诱导体系中, 出现了少量 (约 10% )的神经胶质
细胞,原因可能与 M SCs经历多能干细胞、神经干细胞、神
经前体细胞向成熟神经细胞的分化过程有关。因为在体外
培养过程中, 神经干细胞会部分分化产生神经胶质细胞。
另外,在不利于神经元生存的体外培养体系中出现神经胶
质细胞,也许具有支持、营养和保护神经元的意义。
人参总皂苷的抗氧化作用可能是其使 MSC s产生定向
诱导分化的主要机制之一。已有研究表明 [7], 人参皂苷可
增强神经元抗氧化能力,减轻氧自由基对神经元的损害,并
且在氧自由基对培养的胚胎海马神经元三磷酸腺苷酶和生
长抑素含量影响的研究中,发现人参皂苷可激活体内 SOD
或本身就具有 SOD样作用。人参皂苷 Rb1及 Rg1是其作
用于神经系统的主要成分,张均田 [8]研究表明,一方面 Rg1
既能提高突触效能的可塑性, 又能提高突触结构的可塑性。
另一方面,从体内外两个方面观察了 Rg1对神经干细胞增
殖、分化、存活等多项功能的影响, 表明 Rg1具有促进体外
培养的海马神经前体细胞增殖的能力, 可以选择性促进缺
血沙土鼠海马齿状回颗粒下区神经前体细胞的增殖, 其机
制可能的影响因素包括 NMDA受体, 海马区神经元死亡和
脑内局部 NO浓度等。对人参皂苷 Rb1及 Rg1单体诱导体
外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞及与复合
成分人参总皂苷进行比较是今后研究的方向之一。此外,
目前 MSC s的跨胚层分化的机制研究处于初步阶段, 至于
激活哪些转录因子或基因使它跨胚层分化为某些特定的细
胞至今仍不清楚。而使用中药诱导干细胞定向分化的研究
工作更是才刚刚起步,其诱导机制、诱导后用于动物体内是
否具有神经样细胞的功能等均有待进一步深入研究。
参考文献
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中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 No. 6
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学刊
土人参叶 /解毒消痈 0疗效及作用机制的实验研究
聂建华 1,阮时空 2,吴符火2,陈群航 3
( 1.江西赣州卫生学校, 江西 赣州 341000; 2.福建中医学院, 福建,福州 350003;
3. 福州市蔬菜研究所,福建 福州 350000)
摘 要:目的:旨在通过抑菌、抗炎实验评价土人参叶 /解毒消痈0功效和作用机制。为保健中药野菜土人参
叶的食用提供客观的药效学实验依据, 以促其进一步推广应用、种植、研究。方法:从 /痈肿疔疮0疾病入手, 通过
观察土人参叶体外抗菌实验, 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响, 对小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响, 以及对大
鼠棉球肉芽肿的影响, 探讨土人参叶 /解毒消痈0的功效,并对其作用机制初步评价。结果:高中剂量土人参叶水
煎液能显著降低二甲苯致小鼠耳肿胀的肿胀度, 减少小鼠腹腔皮肤毛细血管通透性, 其效果和免疫剂泼尼松无明
显差异;高剂量土人参叶能显著抑制炎症渗出、肉芽组织形成, 其效果和免疫抑制剂地塞米松无明显差异。土人
参叶对金黄色葡萄球菌的 M IC7. 81m g /mL; 对腐生葡萄球菌的 M IC31. 25m g /mL; 对乙型溶血性链球菌耐药。结
论:土人参叶能存在 /解毒消痈0作用, 能显著抗炎、抑菌, 但对乙型溶血性链球菌耐药, 应和其它具有抑制、杀灭
该菌药物协同配伍应用。
关键词:土人参叶;药理学; 解毒消痈;抑菌; 抗炎;野菜
中图分类号: R282. 7 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2008) 06 -1259 - 03
Expe rimenta lS tudies on the cu ra tive e ffec t and principle of the Leaf of
Panicled Fameflow er to p revent bacteria s fu rther grow th and reduce inflamma tion
NIE Jian-hua1, RUAN Sh i-bao2, WU Fu-huo2, CHEN Qun-hang3
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DOI:10.13193/j.archtcm.2008.06.140.niejh.072
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( 1. GanzhouH ea lth S choo l of J iangxi Province, G anzhou 341000, J iangx,i Ch ina; 2. Fu jian Un iversity of Trad itional Ch ineseM ed icine,
Fuzhou 350003, Fu jian, Ch ina; 3. Vegetab les Research ing S tation of Fu zhou C ity Fu jian Province, Fuzhou 350000, Fu jian, Ch ina)
Abstrac:t Ob jective: To assess e ffec tiveness and princ ip le of the lea f o f Panic led Fam eflow er th rough the exper im en-
ta l studies on preventing bacter ia s furthe r g row th and reduc ing inflamm a tiong, and prov ide possibly theo rem s and experi-
m enta l foundations for Panic led Fam e flowe r sed ib lene ss, planting and study. M ethod s: Pharm acodynam ics ob served the
e ffects o f the lea f of Panic ledFame flowe r on de te rm ina ting m inina l inhibito ry concentration (M IC ), swe lling ofm ouse ear,
capillary ve in perm eab ility o fm ouse skin, granulom a in ra.t R esu lts: The h igh andm iddle consistency o f the lea f o f Pani-
c led Fam eflow er can dim in ish mouse ear - swe lling, debase capillary perm eab ility; The high consistency o f the leaf of
Panicled Fame flowe r can restrain g ranulom a in ra;t In the bac terium - repressing, M IC is 7. 81m g /m l to go lden staphy lo-
coccus, 31. 25m g /m l to saprophy te staphy lococcus. U se less to g roupabe ta hem oly tic streptococcus o f second. C onclusion
: The lea f of Panicled Fame flowe r can dim inish inflamm a tion and repress bac terium. But don tw ork on g roupabe ta hem o-
ly tic strepto coccus of second. shou ld do w ith o ther drug s.
Keywords: the lea f of pan icled fam eflow er /pharm acology; bacteriosta;t an tiphlogistic; edib le w ild herbs
土人参叶, 出自 5滇南本草 6, 为双子叶植物药马齿苋
科植物栌兰的叶, 主产于福建, 别名紫人参 ( 5福建民间草
药6 ) ,资源丰富, 具有解毒消痈之功 [ 1]。作为一种可食可
药野菜已广泛出现于闽东南市民餐桌, 但对其实验研究甚
少。本课题组旨在从 /痈肿疔疮0疾病入手, 通过观察土人
参叶体外抗菌实验,对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响,对小鼠
皮肤毛细血管通透性增高的影响, 以及对大鼠棉球肉芽肿
的影响,探讨土人参叶 /解毒消痈 0的功效和作用机制。为
保健中药蔬菜土人参叶的食用提供客观的药效学实验依
据,以促其进一步推广应用、种植、研究。
1 材料和方法
1. 1 实验动物
清洁级 ICR小鼠, 福建医科大学实验动物中心提供,
合格证书: SCXK (闽 ) 2004 - 0002;清洁级 KM小鼠, 上海斯
莱克实验动物有限责任公司提供, 合格证书: SCXK (沪 )
2003) 0003;清洁级 SD大鼠, 由上海斯莱克实验动物有限
责任公司提供,合格证书: SCXK (沪 ) 2003 -0003。
1. 2 实验用药
土人参叶 (由福建省福州市蔬菜研究所提供 )水煎浓
缩液制备:取土人参叶加水 10倍, 浸泡 30m in, 煮沸 20m in,
过滤去渣为 1液,然后同法再加水 8倍煮沸 1次, 为 2液,
将 1、2液混合,减压浓缩至 100% ( 1mL含生药 1g ),作为原
药液,入冰箱保险备用。
1. 3 实验方法
1. 3. 1 土人参叶体外抗菌实验 取灭菌小试管 10只,编
号。按无菌操作原则,每只试管分别加入牛肉膏汤 0. 5m L。
用移液器吸取药物 5mL加入第 1管, 混匀; 然后从第 1管
中吸取 5m L放入第 2管; 依照此法逐管进行稀释至第 9
管;第 10管不加药物,作为空白正常组。
将金黄色葡萄球菌预先以牛肉膏汤培养基在 37e 恒
温培养箱培养 18h; 在无菌的条件下以牛肉膏汤将细菌稀
释至 10- 4 (每 1m L中含 10- 5~ 10 - 6细菌 )。将稀释后的细
菌液每一细管 ( 1~ 10号 )内加入 0. 05mL。
将上述试管置入 37e 恒温箱孵育 24h后, 取出观察细
菌生长情况。无菌生长试管的最小浓度为药物对该细菌的
最低抑菌浓度 (M lC)。记录结果。
换腐生葡萄球菌、溶血性链球菌重复以上步骤, 记录结
果。
1. 3. 2 土人参叶对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 取清洁
级体重 26~ 30gKM雄性小鼠 50只, 称重、标号 , 根据体重
分层随机分成土人参叶高、中、低剂量组 ( 24g /kg、12g /kg、
6g /kg), 醋酸氢化泼尼松注射液组 ( 50mg /kg ), 模型组, 每
组 10只。将二甲苯 ( 0. 1mL /只 )正反两面均涂于全部小鼠
的右耳,左耳不涂留作自身正常对照组。
分别给土人参叶高、中、低剂量组, 醋酸氢化泼尼松注
射液组,模型组灌服相应药物和等量生理盐水,连续灌胃 3
天。于末次给药 30m in后, 按上述方法造模, 涂二甲苯致
炎,致炎 1h后将小鼠颈部脱臼处死,用直径 9mm的打空器
分别在左右耳同一部位打下圆耳片, 称重, 记录。按 (右耳
重 -左耳重 ) /左耳重 @ 100% ,计算肿胀率。
1. 3. 3 土人参叶对小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响
取清洁级 26~ 30gKM小鼠 60只, 称重、标号 , 根据体重
分层随机分成土人参叶高、中、低剂量组 ( 24g /kg、12g /kg、
6g /kg), 醋酸氢化泼尼松注射液组 ( 0. 02g /kg), 每组 10只。
模型组 20只,雌雄各半。分别给前 4组灌服相应的药物,
模型组灌服等量的生理盐水,连续 3天。实验第 3天, 于末
次给药 30m in后, 各组依次尾静脉注射 1% Evans蓝生理盐
水溶液 0. 1mL /10g,并立即腹腔注射 0. 7%冰醋酸 0. 2mL /
只, 20m in脱颈椎处死, 剪开腹腔, 用 5m L生理盐水冲洗腹
腔数次,收集洗涤液, 离心 5m in ( 1000 r /m in) , 取上清液在
752分光光度计 700nm处测光密度 ( OD值 )。
1. 3. 4 土人参叶对大鼠棉球肉芽肿的影响 取清洁级体
重 180~ 220gSD雄性大鼠 60只,称重、标号,根据体重分层
随机分成土人参叶高、中、低剂量组 ( 12g /kg、6g /kg、3g /
kg), 地塞米松组 ( 0. 525mg /kg) ,模型组, 每组 12只。在盐
酸氯胺酮注射液麻醉 ( 0. 05g /mL, 每只 0. 4mL腹腔注射 )
下,经消毒后, 于背部正中各切 1 cm长小口, 用眼科镊子皮
下植入 20m g的高压灭菌棉球, 随即缝合皮肤。从手术当
日开始分别给土人参叶高、中、低剂量组, 地塞米松组灌服
相应的药物,模型组以等量生理盐水灌胃,连续 6天。第 7
天脱臼处死,剥离棉球肉芽肿。置干燥箱 70e 、12h烘干,
称重,减去棉球重量, 即为肉芽重量,记录。
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2 结 果
2. 1 土人参叶体外抗菌实验
见表 1。
表 1 结 果表 明, 土 人参 叶对 金黄色 葡萄 球菌
( ATCC6538)的 M IC为 7. 81mg /mL3对腐生葡萄球菌的 M IC
为 31. 25m g /mL;而乙型溶血性链球菌对土人参叶耐药。
表 1 土人参叶对金黄色葡萄球菌 腐生葡萄球菌 乙型溶血性链球菌最低抑菌浓度 ( M IC)
浓度 ( mg /mL) 1000 500 250 125 62. 5 31. 25 15. 63 7. 81 3. 91 1. 95 0. 98 0. 49 0. 24
金黄色葡萄球菌 - - - - - - - - + + + + +
腐生葡萄球菌 - - - - - - + + + + + +
乙型溶血性链球菌 + + + + + + + + + + + + +
2. 2 土人参叶对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
见表 2。
表 2 土人参叶对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 ( €x ? s )
组别 n 肿胀率 (% )
模型组 10 0. 0044 ? 0. 0024
泼尼松组 10 0. 0015 ? 0. 0014*
土人参叶高组 10 0. 0015 ? 0. 0011* p
土人参叶中组 10 0. 0019 ? 0. 0019* p
土人参叶低组 10 0. 0034 ? 0. 0028
注: t检验, 与模型组比较, * P < 0. 01; 与泼尼松组比较,
* p P > 0. 05;肿胀率 = (右耳重 -左耳重 ) /左耳重 @ 100%。
表 2结果表明,土人参叶高、中剂量组、泼尼松组与模
型组比较,耳廓肿胀率降低, 差异非常显著 ( P < 0. 01);土
人参叶高、中剂量组与泼尼松组比较, 无显著差异 (P >
0. 05), 显示高、中剂量土人参叶水煎液能显著降低二甲苯
致小鼠耳廓肿胀的肿胀率, 其效果和免疫抑制剂泼尼松无
明显差异。
2. 3 土人参叶对小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响
见表 3。
表 3 土人参叶对小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响
组别 n 肿胀率 (% )
模型组 16 0. 230 ? 0. 072
泼尼松组 9 0. 101 ? 0. 054*
土人参叶高组 7 0. 081 ? 0. 037* p
土人参叶中组 9 0. 109 ? 0. 032* p
土人参叶低组 8 0. 132 ? 0. 048* p
注: t检验,与模型组比较, * P < 0. 01;与泼尼松组比较, p P
> 0. 05;动物数目减少为尾静脉注射失败所致。
表 3结果表明,土人参叶高、中、低剂量组、泼尼松组与
模型组比较,光密度值减少, 差异非常显著 ( P < 0. 01);土
人参叶高、中、低剂量组与泼尼松组比较, 无差异 (P >
0. 05),显示土人参叶水煎液可以降低小鼠皮肤毛细血管通
透性,其效果和免疫抑制剂泼尼松无明显差异。
2. 4 土人参叶对大鼠棉球肉芽肿的影响
见表 4。
表 4 土人参叶对大鼠棉球肉芽肿的影响 ( €x ? s )
组别 n 湿重差 (m g) 干重差 (m g)
模型组 9 175. 0 ? 15. 8 20. 9 ? 3. 4
地塞米松组 9 148. 1 ? 13. 4w 12. 2 ? 1. 3*
土人参叶高组 10 154. 7 ? 21. 7w p 14. 1 ? 3. 9* p
土人参叶中组 12 160. 8 ? 29. 5 19. 2 ? 2. 8
土人参叶低组 12 168. 7 ? 20. 8 19. 6 ? 3. 1
注: t检验,与模型组比较, * P < 0. 01, w P < 0. 05;与地塞米
松组比较, p P > 0. 05。动物数目减少为麻醉过渡及灌胃等操作不
慎所致。
表 4结果表明, 土人参叶高剂量组、地塞米松组与模型
组比较, 棉球肉芽肿重量降低, 差异显著 ( P < 0. 01 ~
0. 05), 土人参叶其它剂量组与地塞米松组比较, 无差异 (P
> 0. 05), 显示大剂量土人参叶对炎症渗出、肉芽组织形成
有降低作用,其效果和免疫抑制剂地塞米松无明显差异。
3 讨 论
土人参, 拉丁名称: RadixTaliniPanicu la ti(药材 )、Ta li-
numpanicu la tum( lacq) Gaertn(原植物护兰 )。英文名: Pani-
cledFam enow er。分布于福建、浙江、江苏、安徽、河南、广西、
广东、四川、贵州、云南等地 [2]; 一年生草本, 高达 60cm, 肉
质。茎直立,分枝, 绿色,基部捎带木质。叶互生, 倒卵圆或
倒卵圆状长椭圆形,长 5~ 7cm, 宽 2. 5~ 3. 5cm。圆锥花序
顶生或侧生,多呈 2歧分枝。花瓣多为 5, 淡紫红色。果近
球形, 熟时 3瓣裂,种子多数, 黑色,有光泽, 具有微细腺点。
花期 6~ 7月, 果期 9 ~ 10月 [3 ]。其叶味微甘、性平, 入脾
经。功效 :解毒消痈, 消肿毒, 解毒药; 治疗痈肿、疔疮。鲜
叶,和红糖捣烂敷患处可治疗痈疔 [4 ]。与菠菜类似, 草酸
含量较高,富含钙、磷、铁、抗坏血酸、胡萝卜素、尼克酸、核
黄素、硫胺素等成分, 但较菠菜钙、铁、核黄素等含量丰
富 [5]。作为一种可食可药野菜已广泛出现于闽东南市民
餐桌。
本课题组通过观察土人参叶体外抗菌实验, 对二甲苯
致小鼠耳肿胀的影响, 对小鼠皮肤毛细血管通透性增高的
影响, 以及对大鼠棉球肉芽肿的影响, 表明土人参叶确实存
在显著 /解毒消痈 0的功效, 能显著降低耳肿胀 , 减少腹腔
毛细血管通透性以及抑制炎症渗出、肉芽组织形成, 其效果
和免疫抑制剂无明显差异;对金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球
菌有抑制作用,为其 /解毒消痈0作用机制提供了一定的参
考;但对乙型溶血性链球菌耐药, 提示选用本品治疗痈肿疔
疮时, 应和其它抑制、杀灭乙型溶血性链球菌的药物协同配
伍运用。土人参叶作为一种药食同源的野菜对人体确有益
处,应进一步推广应用、种植、研究。
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