全 文 ：藏药雪灵芝不同提取物的体外抑菌作用实验研究
鲍　敏 ,米　琴 ,曾　阳
(青海师范大学 生命与地理科学学院 ,青海 西宁　810008)
摘　要:本文采用滤纸片扩散法对藏药雪灵芝(Arenaria kansuensis Maxim)的水提物和醇提物分别进行体外抑菌实验.结果表
明:雪灵芝的水提物和醇提物对枯草芽孢杆菌 、金黄色葡萄球菌 、梭状杆菌等 9种菌显示程度不同的抑菌作用.雪灵芝水提
物除对痢疾杆菌没有抑菌作用外 ,对其余 8种菌均有抑制作用;醇提物对梭状杆菌、痢疾杆菌 、膨大芽孢杆菌没有作用 , 对其
余 6种菌均有抑制作用.说明雪灵芝水提物的体外抑菌效果比醇提物的效果显著.
关键词:雪灵芝;水提物;醇提物;抑菌作用
中图分类号:R285.5　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1001-7542(2005)04-0087-03
雪灵芝隶属于石竹科(Caryophyllaceae)蚤缀属(Arenaria)甘肃蚤缀(Arenaria kansuensis Maxim),为多
年生垫状草本植物 ,高5-10cm ,成垫状 ,半圆球形 ,直径 17cm 或更大 ,广泛分布于西藏以及青海省的黄
南 、果洛 、玉树 、海东地区及格尔木等地海拔 3 ,500-4 ,500m 的高山草甸和砾石地带.雪灵芝全草系青海
民间常用药 ,藏药名为阿仲嘎保 ,延用历史悠久 ,性凉 、味微甘 ,有清热解毒 、散肿之功 ,用于流感 ,对肺
炎 、黄疸 、胃肠溃疡 、风湿 、癌症 、瘰疬 、淋病 、淋巴及结核 、筋骨疼痛 、肾结石等有独特的药效 ,还可增乳 、
通乳 ,是一味很有发展前途的民间用药[ 1 , 2] .本文分别采用雪灵芝的水提物和醇提物对多种菌进行抑菌
实验 ,拟观察藏药雪灵芝体外的抑菌效果 ,为藏药的开发利用提供理论依据.
1　材料与方法
1.1　材料
雪灵芝 ,采自青海省达坂山海拔3 ,900m的高山草甸 ,由青海师范大学生命与地理科学学院吴学明
教授鉴定.
1.2　供试菌种及仪器
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、梭状芽孢杆菌(Bacterium
fusifomis)、变形杆菌(Bacterium terom Vignal)、大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)、痢疾杆菌(Shigella dysente-
riae)、膨大芽孢杆菌(Bacillus megateriulm)、八叠球菌(Sarcina lutea)、四联球菌(Mycococcus tetragenus
Krasil nikov),由青海师范大学生命与地理科学学院微生物实验室提供.HH.S11-4电热恒温水浴锅 ,
XMT-A7000水夹套培养箱 ,YX-280B手提式压力蒸汽消毒器 ,ZHJH-1115无菌操作台.
1.3　培养基
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基[ 3]
1.4　方法
1.4.1　雪灵芝水提法[ 4]
去土称取阴干雪灵芝全草 50g 剪碎 ,置烧杯中加蒸馏水浸泡 30min 后加热煮沸 ,再用文火加热
30min ,过滤得第一次水提取物 ,将滤渣用同样方法得第二次 、第三次水提取物 ,合并三次滤液 ,置于烧杯
中 ,在 70°C恒温水浴锅中蒸发浓缩至 50mL ,得到雪灵芝水提物(含生药量 1g/mL).
1.4.2　雪灵芝乙醇提法[ 4]
收稿日期:2005-09-25
作者简介:鲍敏(1971-),女(汉族),四川乐至人 ,青海师范大学讲师 ,主要从事微生物的教学与研究.
2005年
第 4期 　　　 　　　　　
青海师范大学学报(自然科学版)
Journal of Qinghai Normal University(Natural Science)　　 　　　　　　
2005
No.4
DOI :10.16229/j.cnki.issn1001-7542.2005.04.026
去土称取阴干雪灵芝全草 50g 剪碎 ,加 70%的乙醇 150mL加热回流提取 1h ,过滤得第一次乙醇提
取物 ,将滤渣用同样方法回流得第二次 ,第三次乙醇提取物 ,合并三次滤液 ,减压蒸馏除去乙醇 ,得到雪
灵芝醇提物(含生药量 1g/mL).
1.4.3　菌种活化培养[ 5]
将各菌株接种到牛肉膏蛋白胨斜面培养基中 ,37°C 培养 24 h后 ,利用血球板计数法将各菌株用无
菌水配制成浓度约为 107个/mL的菌悬液 ,备用.
1.4.4　抑菌试验[ 6]
将上述藏药雪灵芝水提物和醇提物(浓度 100%)用蒸馏水稀释配制成 5%,10%, 30%,50%,70%,
90%的不同浓度梯度 ,以生理盐水作为对照.
分别取各菌的菌悬液 0.5mL ,注入到琼脂平板上 ,用涂布棒涂布均匀 ,待平板表面液体稍干后 ,在培
养皿底用蜡笔分成 7等份 ,每 1等份事先标明所用试剂浓度.用无菌镊子将无菌滤纸片(8mm)浸入上述
各不同浓度溶液中几分钟后 ,取出 ,并在瓶内壁除去多余的药液 ,将滤纸片对号放到平板的小区内.雪灵
芝各浓度水提物和醇提物各重复三次.倒置放入 37°C培养箱中培养 24h ,测定抑菌圈大小 ,计算平均值.
以滤纸片周围刚出现抑菌圈的浓度为最低抑菌菌浓度(MIC),比较雪灵芝水提物和醇提物各浓度对不
同菌的抑菌效果.
2　结果
2.1　雪灵芝水提取液抑菌结果
雪灵芝水提取液抑菌结果见表 1:
表 1　雪灵芝水提物对各种菌的抑菌圈直径(cm)结果
菌种 雪灵芝水提物药物浓度
CK 5% 10% 30% 50% 70% 90%
枯草芽孢杆菌 - 0.90 0.95 1.14 1.32 1.46 1.86
八叠球菌 - - - 0.94 1.13 1.30 1.52
变形杆菌 - 0.92 0.97 1.08 1.20 1.33 1.67
金黄色葡萄球菌 - - - 0.90 0.98 1.20 1.52
梭状芽孢杆菌 - - - 0.91 1.13 1.20 1.55
大肠杆菌 - - - 0.90 1.00 1.12 1.32
痢疾杆菌 - - - - - - -
膨大芽孢杆菌 - 0.90 0.93 0.95 1.09 1.14 1.34
四联球菌 - - - 0.93 1.00 1.03 1.28
　　　　注:“ —”表示抑菌圈不明显
从表 1可见 ,雪灵芝水提物各浓度对枯草芽孢杆菌 、变形杆菌 、膨大芽孢杆菌有较好的抑菌作用 ,它
们的最低抑菌浓度为 5%;对八叠球菌 、金黄色葡萄球菌 、梭状杆菌 、大肠杆菌 、四联球菌的最低抑菌浓
度为 30%,对痢疾杆菌没有抑菌作用.
2.2　雪灵芝乙醇提取物的抑菌结果
雪灵芝乙醇提取物的抑菌结果见表 2 ,雪灵芝醇提物的各浓度对金黄色葡萄球菌杆有较好的抑菌
作用 ,最小抑菌浓度为 5%,对梭状杆菌 、痢疾杆菌 、膨大芽孢杆菌没有抑菌作用 ,对枯草芽孢杆菌和大
肠杆菌的最小抑菌浓度为 50%,对变形球菌的最小抑菌浓度为 30%,对八叠球菌和四联球菌的最小抑
菌浓度为 70%.
由表 1和表 2可见 ,雪灵芝的水提物和醇提物对 9种菌有不同的抑菌效果.雪灵芝水提物和醇提物
对痢疾杆菌都没有抑菌作用 ,雪灵芝水提取物对其它 8种菌的体外抑菌效果比醇提物的效果好.
88　　　　　　　　　　　　　　青海师范大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　　2005年
表 2　雪灵芝乙醇提物对各种菌的抑菌圈直径(cm)结果
菌种 雪灵芝醇提物药物浓度
CK 5% 10% 30% 50% 70% 90%
枯草芽孢杆菌 - - - - 0.900 1.01 1.14
八叠球菌 - - - - - 0.900 1.02
变形杆菌 - - - 092 1.03 1.16 1.24
金黄色葡萄球菌 - 0.90 0.95 1.05 1.15 1.18 1.23
梭状芽孢杆菌 - - - - - - -
大肠杆菌 - - - - 0.92 1.13 1.40
痢疾杆菌 - - - - - - -
膨大芽孢杆菌 - - - - - - -
四联球菌 - - - - - 0.95 1.13
　　　　注:“ —”表示抑菌圈不明显
3　讨论与结论
本实验结果表明 ,藏药雪灵芝的水提物和醇提物对枯草芽孢杆菌 、金黄色葡萄球菌 、梭状杆菌等 9
种菌显示程度不同的抑菌作用 ,且随着抑菌浓度的增大抑菌效果逐渐增强.雪灵芝水提物除对痢疾杆菌
没有抑菌作用外 ,对其余 8种菌均有抑制作用;醇提物对梭状杆菌 、痢疾杆菌 、膨大芽孢杆菌没有抑菌作
用 ,对其余 6种菌均有抑制作用.说明雪灵芝水提物的体外抑菌效果比醇提物的效果显著.
雪灵芝所含的药理成分较多 ,作用也是多方面的 ,不同成分对不同菌种的抑制作用也不同 ,不同提
取方法所含的药理成分发生变化 ,故其药理作用和抑菌机制也会发生变化.因此 ,加强雪灵芝的基础研
究 ,并结合现代药理学方法寻找具有生物活性的新成分 ,深入藏药雪灵芝的全面研究至关重要.
参考文献:
[ 1] 　郭鹏举.青海地道地产药材[M] .陕西:科学技术出版社 , 1966:204-206.
[ 2] 　帝玛尔·丹增彭措.晶珠本草[M] .北京:民族出版社 , 1986.
[ 3] 　沈萍 ,范秀容 ,李广武.微生物学实验[ M] .北京:高等教育出版社 ,2000 , 228-229.
[ 4] 　陈奇.中药药理实验方法学[M] .上海:上海科技出版社 , 1996:67.
[ 5] 　夏稷子.千里光五种中草药的体外抑菌实验[ J] .中国微生态学杂志 ,1997 , 9(4):50.
[ 6] 　黄秀梨.微生物实验指导[M] .北京:高等教育出版社&施普林格出版社 , 2001:62.
In vitro bacteriostasis study of the different extracts from the tibetan
herb arenaria kansuensis maxim
BAO Min , MI Qin , ZENG Yang
(College of Biologic and Geographic Science ,Qinghai Normal University , Xining 810008 ,China)
Abstract:This paper used filter paper dispersion method to study the bacteriostasis in vitro of aqueous extract
and alcohol extract from the Tibetan Herb Arenaria Kansuensis Maxim.The results showed:there were different bac-
teriostasis effects of aqueous extract and alcohol extracr to Staphylococcus aureus , Bacillus subtilis , etc..There was
no bacteriostasis effect to Shigella dysenteriae about aqueous extract , and there were no effects to Shigella dysenteri-
ae ,Bacillus megateriulm and Bacterium fusifomis about alcohol extract.The results showed that the bacteriostasis ef-
fect of aqueous extract was better than of alcohol extract.
Key words:Arenaria kansuensis maxim;aqueous extract;alcohol extract;bacteriostasis
89第 4期　　　鲍敏 ,米琴 ,曾阳:藏药雪灵芝不同提取物的体外抑菌作用实验研究