全 文 ：收稿日期：２０１５－１０－２２ 基金项目：吉林省科技发展计划项目（２０１４０２０４０３４ＹＹ，２０１３０７２７０７１ＹＹ）
＊ 通信作者：郭建鹏（１９７１—），男，教授，研究方向为中药新剂型与新技术．
文章编号：１００４－４３５３（２０１５）０４－０３５６－０３
长白山地区野生兴安升麻中升麻素的
含量测定
刘贺１， 关琪轩１， 金成山１， 郭建鹏１，２＊
（１．延边大学药学院，吉林 延吉１３３００２；
２．延边大学长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室，吉林 延吉１３３００２）
摘要：采用高效液相色谱法对长白山地区的野生兴安升麻中升麻素的含量进行测定，检测条件为：检测波长
为２５４ｎｍ、色谱柱为Ｔｈｅｒｍｏ ＯＤＳ－２ＨＹＰＥＲＳＩＬ（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）、流动相为甲醇 －水（体积比为
４２∶５８）、线性度（ｒ）高于０．９９９ ９、平均回收率为１００．４５％．测定结果表明，不同样品间升麻素含量的差异较
小，平均含量为０．２４ｍｇ／ｇ．该方法简便、灵敏、准确可靠、重复性好，可用于兴安升麻中升麻素的含量测定．
关键词：兴安升麻；升麻素；高效液相
中图分类号：Ｒ９２７．２ 文献标识码：Ａ
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｉｍｉｆｕｇｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｗｉｌｄ Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａｄａｈｕｒｉｃａ
ｏｎ Ｃｈａｎｇｂａｉ Ｍｏｕｎｔａｉｎｓ
ＬＩＵ Ｈｅ１， ＧＵＡＮ Ｑｉｘｕａｎ１， ＪＩＮ Ｃｈｅｎｇｓｈａｎ１， ＧＵＯ Ｊｉａｎｐｅｎｇ１，２＊
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｊｉ １３３００２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ
Ｃｈａｎｇｂａｉ Ｍｏｕｎｔａｉｎ ＆Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ），Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｙａｎｊｉ １３３００２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＨＰＬＣ）ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｃｉｍｉｆｕｇｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｗｉｌｄ Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａ ｄａｈｕｒｉｃａ ｏｎ Ｃｈａｎｇｂａｉ Ｍｏｕｎｔａｉｎｓ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｉｓ ２５４ｎｍ，ｔｈｅ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｉｓ Ｔｈｅｒｍｏ ＯＤＳ－２ＨＹＰＥＲＳＩＬ（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），ａｎｄ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｉｓ
ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ（４２∶５８）．Ｔｈｅ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ（ｒ）ｉｓ ０．９９９ ９；ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｉｓ １００．４５％．
Ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｉｓ ｎｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ Ｃｉｍｉｆｕｇｉｎ ｉｎ ｔｈｅ Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａ ｄａｈｕｒｉｃａ ｏｎ Ｃｈａｎｇｂａｉ
Ｍｏｕｎｔａｉｎｓ，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ０．２４ｍｇ／ｇ．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ｒｅｌｉａｂｌｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ
ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ｔｈｕｓ ｉｔ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｃｉｍｉｆｕｇｉｎ ｉｎ ｔｈｅ Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａ ｄａｈｕｒｉｃａ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａ ｄａｈｕｒｉｃａ；Ｃｉｍｉｆｕｇｉｎ；ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
升麻为毛茛科植物大三叶升麻Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａ
ｈｅｒａｃｌｅｉｆｏｌｉａ Ｋｏｍ．、 兴 安 升 麻 Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａ
ｄａｈｕｒｉｃａ （Ｔｕｒｃｚ．）Ｍａｘｉｍ 或升麻Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａ
ｆｏｅｔｉｄａ Ｌ．的干燥根茎，是常用的中药材，主要产
于东三省、山西、河北、四川等地．升麻主要用于风
热头痛、麻疹不畅、齿痛口疮、咽喉肿痛等多种症
状［１］．升麻还是朝医学传统方剂习用药材，为“太
阴人”药，主要用于中气虚弱或气虚下陷所致久
泻脱肛、子宫脱垂以及因气虚不能摄血所致的妇
女崩漏不止等病症［２］．
目前，在升麻药材质量标准中的含量测定项，
有异阿魏酸含量［３］等检测指标．升麻素是升麻药
材的特有成分之一［４］，也是升麻中色原酮类的有
效成分［５］，具有抗菌、降压、镇静、抑制心肌、减慢
DOI:10.16379/j.cnki.issn.1004-4353.2015.04.017
第４期 刘贺，等：长白山地区野生兴安升麻中升麻素的含量测定
心率、抑制过敏性炎症的药理作用［６］．本文采用高
效液相色谱法［７－８］建立了兴安升麻药材中升麻素
含量的测定方法，并测定了长白山地区野生兴安
升麻样品中的升麻素含量，为了解兴安升麻药材
质量信息以及制定药材标准提供参考．
１ 仪器与试药
仪器有Ｐｒｉｍａｉｄｅ高效液相色谱仪（日立），超
声波清洗机ＪＰＳ－４０（深圳市洁泰超声洗净设备有
限公司），Ｒ２０６旋转蒸发仪（广州华生仪器厂）．
升麻素对照品由中国药品生物制品检验所提
供（批号为１１１７１０－２００６０２），甲醇为色谱纯，水为
超纯水，其余试剂均为分析纯．
兴安升麻采收于长白山地区山地林缘地带
（表１），均经延边大学药学院吕慧子研究室鉴定．
表１ 兴安升麻药材来源
样品编号 采集时间 药材产地
样品１ ２０１５－０９ 敦化市
样品２ ２０１５－１０ 敦化市
样品３ ２０１５－０９ 安图县
样品４ ２０１５－１０ 安图县
样品５ ２０１５－０９ 和龙市
样品６ ２０１５－１０ 和龙市
样品７ ２０１５－０９ 临江市
样品８ ２０１５－１０ 临江市
２ 方法与结果
２．１ 升麻药材的采收及加工
秋季采挖，除去泥土，晒至须根干时，除去须
根，晒干．
２．２ 溶液的制备
２．２．１ 对照品溶液的制备 取升麻素对照品，
精密称定，加甲醇制成０．１５ｍｇ／ｍＬ溶液．
２．２．２ 供试品溶液的制备 称取升麻粗粉４ｇ，
加入蒸馏水１００ｍＬ，超声提取３０ｍｉｎ；提取液过
滤，离心，取上清液浓缩，定容至２５ｍＬ，０．４５μｍ
微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液．
２．３ 色谱条件
色谱柱为 Ｔｈｅｒｍｏ ＯＤＳ－２ＨＹＰＥＲＳＩＬ（４．６
ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），柱温为３０℃；流动相为甲
醇 －水（４２∶５８，体积比）；检测波长为２５４ｎｍ，流
速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ，进样量为１０μＬ．以外标法定
量．对照品及供试品溶液的色谱图如图１所示．
图 １ 升麻素对照品（Ａ）和升麻药材（Ｂ）的色谱图
２．４ 线性关系
量取对照品溶液５、１０、１５、２０、２５、３０μＬ，注
入色谱仪，测定峰面积，以峰面积（Ｙ）对进样量
（Ｘ）进行回归，结果得升麻素线性回归方程为
Ｙ ＝３．８Ｅ＋５ Ｘ－６２ ３２３，ｒ＝０．９９９ ９．升麻素
进样浓度在０．７５～４．５μｇ范围内，升麻素进样量
与峰面积呈良好的线性关系．
２．５ 精密度
取对照品溶液，按２．３中色谱条件测定升麻
素峰面积值，结果显示升麻素峰面积的ＲＳＤ值为
０．５２％（ｎ＝６），表明仪器精密度良好．
２．６ 重复性
取同一供试品溶液，按２．３中色谱条件测定，
结果显示升麻素峰面积的ＲＳＤ值为０．９０％（ｎ＝
６），表明本方法重现性良好．
２．７ 稳定性
分别在０、２、４、８、１２、２４ｈ，按２．３中色谱条件
测定供试品溶液，结果显示升麻素峰面积的ＲＳＤ
值为０．９６％（ｎ＝６），表明供试品溶液在２４ｈ内相
对稳定．
２．８ 加样回收率
量取已知含量升麻素的供试品溶液９份，分
７５３
延边大学学报（自然科学版） 第４１卷
别精密加入对照品适量，按２．２．２中方法制备供试
品溶液，按２．３中色谱条件测定，结果如表２所示．
２．９ 样品测定
按上述测定方法对不同批次样品进行测定，
以外标法计算升麻素含量，测定结果见表３，样品
来源见表１．测定结果表明，长白山地区野生兴安
升麻样品中的升麻平均含量为０．２４ｍｇ／ｇ．
表２ 加样回收率考察结果
样品中升麻
素含量／μｇ
加入量／
μｇ
测得量／
μｇ
回收率／
％
平均回收率／
％
ＲＳＤ／
％
４３．２ ３４．５６ ７６．８１ ９８．７８
４３．２ ３４．５６ ７６．８６ ９８．８５
４３．２ ３４．５６ ７６．９１ ９８．９１
４３．２ ４３．２ ８５．７５ ９９．２５
４３．２ ４３．２ ８７．０４ １００．７４ １００．４５ １．８５
４３．２ ４３．２ ８５．９９ ９９．５２
４３．２ ５１．８４ ９８．６９ １０３．８４
４３．２ ５１．８４ ９６．５４ １０１．５８
４３．２ ５１．８４ ９７．４６ １０２．５５
表３ 样品中升麻素含量 ｍｇ／ｇ
样品
编号
升麻素含量
１ ２ ３
平均值
样品１ ０．２３ ０．２４ ０．２２ ０．２３
样品２ ０．２３ ０．２３ ０．２４ ０．２３
样品３ ０．２６ ０．２３ ０．２３ ０．２４
样品４ ０．２５ ０．２４ ０．２３ ０．２４
样品５ ０．２４ ０．２５ ０．２６ ０．２５
样品６ ０．２５ ０．２５ ０．２３ ０．２４
样品７ ０．２５ ０．２５ ０．２４ ０．２５
样品８ ０．２４ ０．２３ ０．２４ ０．２４
平均含量 ０．２４
３ 讨论
３．１ 药材前处理条件的选择
分别采用水、６０％ 乙醇和无水乙醇为提取溶
剂进行超声提取，结果表明，以水为提取溶剂时升
麻素的提取率最高．在此基础上，对料液比及提取
时间进行了考察，结果表明：料液比为１∶２５，提取
时间为６０ｍｉｎ时提取率最佳．
３．２ 流动相与流速的选择
对比考察甲醇 －０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸水溶液（４０∶
６０，体积比）、甲醇 －水（４０∶６０，体积比）、甲醇 －水
（４２∶５８，体积比）以及乙腈 －水等流动相［９－１０］，其
中甲醇 －水（４２∶５８，体积比）为流动相时被测物质
能够达到基线分离，分离效果较理想，且重现性良
好，故确定其为流动相．考察不同流速对被测物质
分离度的影响［１１－１３］，结果表明流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ
时的分离效果最好．
４ 结论
本文所建立的升麻素含量测定方法简便可
行，定量准确，专属性强，具有良好的重复性，可以
为升麻药材中升麻素的含量测定提供参考．测定
结果显示，在长白山地区范围内，不同产地样品中
升麻素的含量无显著差异．
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