全 文 ：收稿日期:2013-06-21 接受日期:2013-10-21
基金项目:右江民族医学院 2013 年度自治区级大学生创新训练计
划立项项目(2012-23)
* 通讯作者 Tel:86-013517761115;E-mail:wenquantai521@ 163． com
天然产物研究与开发 Nat Prod Ｒes Dev 2014，26:662-665
文章编号:1001-6880(2014)5-0662-04
土人参提取液对 D -半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化作用研究
文全泰1，潘廷啟1，黄礼德2，李芸达1，赵善民3* ，何显教3，黄彦峰3，晋 玲3
1右江民族医学院临床学院;2 百色市人民医院;3 右江民族医学院 生理学教研室，百色 533000
摘 要:本文研究了土人参提取液对 D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化作用的影响。取昆明种小白鼠 50 只，随
机分为 5 组(正常对照组、衰老模型组、土人参提取液低、中、高剂量组)。除正常对照组外，其余各组每天于颈
背皮下注射 D-半乳糖 125 mg /kg，连续 42 d，造成亚急性衰老模型。在注射 D-半乳糖的同时，三个不同剂量实验
组每天分别灌胃土人参提取液 5、10 和 15g /kg，正常对照组及衰老模型组给予等量生理盐水。于 42 d后测定小
鼠体内超氧化物歧化酶(Super Oxide Dismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase，GSH-PX)等
酶的活性，及丙二醛(Maleic Dialdehyde，MDA)的含量。结果显示:与正常对照组相比，衰老模型组小鼠心脏、肝
脏组织 SOD及血清中 GSH-PX活性降低(P ＜ 0． 01)，MDA含量增加(P ＜ 0． 01)。与衰老模型组相比，土人参提
取液低、中、高剂量组小鼠心脏、肝脏组织 SOD及血清中 GSH-PX活性明显升高(P ＜ 0． 01);中、高剂量组小鼠心
脏、肝脏组织中 MDA含量降低明显(P ＜ 0． 01)，低剂量组小鼠肝脏的 MDA 含量明显降低(P ＜ 0． 01)。上述结
果表明:土人参提取液对 D-半乳糖所致衰老小鼠有抗衰老作用。
关键词:土人参提取液;D-半乳糖;衰老模型;抗氧化作用
中图分类号:Ｒ965 文献标识码:A
Antioxidant Effect of Talinum crassifolium
Extract on D-Galactose Induced Aging Mice
WEN Quan-tai1，PAN Ting-qi1，HUANG Li-de2，LI Yun-da1，ZHAO Shan-min3* ，
HE Xian-jiao3，HUANG Yan-feng3，JIN Ling3
1Department of Clinical Laboratory Medicine，Youjiang Medical University for Nationalities;2Baise City People＇s Hospital;
3Physiology Teaching and Ｒesearch Section，Youjiang Medical University for Nationalities，Guangxi Baise 533000，China
Abstract:In the present study，the effect of Talinum crassifolium Extract on antioxidation in aged mice induced by D-ga-
lactose was investigated． Fifty male Kunming mice were randomly divided into five groups，namely control group，model
group，and T． crassifolium low-，medium-and high-dose groups． Except the control group，all other groups were given with
125 mg /kg of D-galactose by subcutaneous injection at neck nape for 42 d． At the same time，mice in the three sample
groups were gavaged with 5，10 and 15 mg /kg of T． crassifolium extract;and mice in control group and model group were
gavaged with the same volume of normal saline． The activities of Super Oxide Dismutase (SOD)，Glutathione peroxidase
(GSH-PX)，and the content of Maleic Dialdehyde (MDA)in mice were then determined． The resulted showed that the
levels of GSH-PX in blood serum and SOD in liver，heart of the model group were significantly lower than these of normal
control group (P ＜ 0． 01)． The activities of MDA in liver and heart of the model group significantly increased compared
with these of normal control group (P ＜ 0． 01)． The levels of GSH-PX in blood serum and SOD in liver，heart of T． cras-
sifolium low-，medium-and high-dose groups were significantly higher than these of model groups (P ＜ 0． 01)． The levels
of MDA in liver and heart of T． crassifolium medium and high doses groups were significantly lower than these of model
groups (P ＜ 0． 01)． The of activity of MDA in liver of T． crassifolium low dose group was significantly lower than that of
normal control group (P ＜ 0． 01)． Based on these results，it was concluded that T． crassifolium extract had antiaging
effect on D-galactose induced aging mice．
Key words:Talinum crassifolium extract;D-galactose;aging model;antioxidant
土人参［Talinum paniculatum (Jacq．)Gaertn．］
为马齿苋科土人参类植物，别名为栌兰、假人参等。
有补中益气，养阴润肺，消肿止痛，主治脾虚、食少乏
DOI:10.16333/j.1001-6880.2014.05.006
力、泄泻、脱肛、肺痨咳血、潮热、盗汗，产后乳汁不足
等症［1］，研究表明土人参含有的成分为齐墩果酸、
蔗糖等［2］，而其中多糖具有免疫调节、抗肿瘤、降
糖、保肝、抗感染、抗消化道溃疡、抗衰老、降血脂、抗
凝血等作用［3］。也有研究表明土人参含环烯醚萜，
有类似地黄养阴、生津、益精填髓的作用，同时含三
萜皂苷，亦有类似人参大补元气，补脾益气、生津、安
神、增强免疫机能之功效。此外尚含香豆素类、挥发
油等［4］。目前国内外关于土人参抗氧化的研究仅
有张健，刘关艳通过测定土人参叶和根中的抗氧化
物质的含量和抗氧化酶的活性，得出土人参中 SOD
活性较高，总抗氧化能力较强［5］，但其未对动物进
行任何实验研究，因此在动物方面的研究尚存欠缺，
为此本次实验以不同浓度的土人参提取液对 D-半
乳糖所致衰老小鼠心、肝组织中 SOD 和 MDA 含量
以及血清中 GSH-PX活性的影响来研究其抗氧化能
力，这样即进一步探讨土人参的抗氧化作用，也为土
人参的临床药物应用提供参考依据。
1 材料与方法
1． 1 材料与仪器
昆明种 3 月龄清洁级小白鼠 50 只，雌雄各半，
体重 35 ～ 45 g，由广西右江民族医学院动物实验中
心提供(许可证号:SYXK桂 2011-0010)。土人参采
摘于广西天等县高州山，由右江民族医学院民族医
学教研室覃道光副教授鉴定为马齿苋科土人参类植
物;D-半乳糖(批号 20120718)，购自美国 Amresco
公司，用生理盐水配成 1． 25%的浓度。超氧化物歧
化酶 (SOD)试剂盒 (批号 20121120)、丙二醛
(MDA)试剂盒(批号 20121118)、考马斯亮兰试剂
盒(批号 20121120)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-
PX)试剂盒(批号 20121122)均购自南京建成生物
工程研究所。
电热恒温水浴锅(江苏金坛宏凯仪器厂);
TDZ4A-WS低速台式离心机(长沙湘仪离心机仪器
有限公司);FSH-2A 可调高速电动匀浆机(金坛市
金南仪器厂);电热煮沸消毒器(100 度恒温水浴锅)
(上海市化工进出口有限公司);722 型分光光度计
(上海精密科学仪器有限公司);SW-80A 型旋涡混
合器(上海医大仪器厂);AＲll40 /C 电子天平［奥豪
斯(上海)公司生产］。
1． 2 实验方法
1． 2． 1 土人参提取液制备
称取 500 g土人参干品，先用适量蒸馏水浸泡 1
h，再加入部分蒸馏水，两次共为干品 10 倍，煮沸 30
min，自然冷却至室温后过滤，保存为滤液 1;同法再
加入 8 倍的蒸馏水，煮沸 30 min 后过滤，保存为滤
液 2。将 1、2 液混合，减压浓缩至 100%(1 mL含生
药 1 g)，作为原药液，置于 5 ℃冰箱保存备用，临用
前按比例配制成高剂量为 15 g /kg，中剂量 10 g /kg，
低剂量为 5 g /kg。
1． 2． 2 动物的分组及造模
取体重 35 ～ 45 g 的昆明种小白鼠 50 只，适应
性饲养 7 d后，将小鼠随机分为 5 组，每组 10 只，即
为正常对照组、衰老模型组、土人参提取液高、中、低
剂量组。D-半乳糖衰老小鼠模型的建立及给药方法
参照文献［6］方法制备亚急性衰老小鼠模型。即土
人参提取液低、中、高剂量组及衰老模型组每日定时
颈背部皮下注射(125 mg /kg［7］体重)的 D-半乳糖灭
菌生理盐水溶液(新鲜配制，其浓度为 1． 25%)，正
常对照组颈背部皮下注射等量的生理盐水，连续 42
d。同时，将土人参提取液分别配成剂量为 15、10、5
g /kg 依次给高剂量组、中剂量组、低剂量组灌胃，正
常对照组和衰老模型组给予等量的生理盐水灌胃，
每天灌胃 1 次，连续给药 42 d，并于每周称量体重
后，根据体重准确调整给药量及 D-半乳糖注射量，
并保持给药的连续性和准确性。
1． 2． 3 血清及组织匀浆液的制备
于 42 d 后对各小组小鼠采用摘除眼球法，取血
0． 5 ～ 1． 0 mL 放入容积为 1 mL 的三角试管中，以
3500 rpm，离心 10 min，取上清液备用。随即采用颈
椎脱臼法处死小鼠，迅速取出其心、肝组织，用冰冻
生理盐水洗净，滤纸吸干称重，用匀浆机匀浆
(15000 rpm，连续 3 ～ 5 次)制备成 10%的组织匀浆
液，备用。并根据试验要求取部分 10%的组织匀浆
液用生理盐水按 1 ∶ 9 稀释成 1%的组织匀浆液，加
药并离心(3000 rpm，10 min)，制备成 1%的组织匀
浆液，备用。
1． 2． 4 生化指标检测
小鼠血清中的 GSH-PX 和心、肝组织中的蛋白
量、SOD、MDA含量的测定均按南京建成生物工程
研究所提供的试剂盒说明书方法进行操作。
1． 2． 5 统计学分析
所有数据均用 SPSS 17． 0 统计软件包进行处
理，计量资料数据以均数 ±标准差(x ± S )表示，资
366Vol. 26 文全泰等:土人参提取液对 D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化作用研究
料进行正态性检验;多组计量资料采用 one-way
ANOVA，方差齐时采用 LSD，方差不齐时采用 Dun-
nett＇s C法。P ＜ 0． 05 有统计学意义。
2 结果与分析
2． 1 土人参提取液对 D-半乳糖所致衰老小鼠血清
GSH-PX和心、肝组织 SOD含量的影响
与正常对照组相比，衰老模型组小鼠血清中
GSH-PX和心、肝组织中的 SOD含量明显降低，具有
显著差异(P ＜ 0． 01);与衰老模型组相比，土人参提
取液低、中、高剂量组小鼠血清中的 GSH-PX 和心
脏、肝脏中的 SOD 含量均明显升高，具有显著差异
(P ＜ 0． 01)，结果见表 1、2。
表 1 土人参提取液对 D-半乳糖所致衰老小鼠心、肝组织
SOD含量的影响(x ± S，n = 10)
Table 1 Effects of T． crassifolium extract on SOD in heart and
liver tissue of aged mice induced by D-galactose (x ±
S，n = 10)
组别
Group
SOD (U /mgprot)
心脏 Heart 肝脏 Liver
正常对照组
Normal control group 153． 347 ± 19． 693 76． 560 ± 6． 802
衰老模型组
Model group 36． 845 ± 10． 775
2) 26． 135 ± 4． 3972)
土人参低剂量组
T． crassifolium
low-dose group
74． 969 ± 21． 3324) 46． 877 ± 11． 5724)
土人参中剂量组
T． crassifolium
medium-dose group
126． 630 ± 24． 3084) 49． 840 ± 5． 7994)
土人参高剂量组
T． crassifolium
high-dose group
96． 109 ± 26． 4074) 43． 477 ± 2． 6874)
注:与正常对照组比较，1)P ＜ 0． 05，2)P ＜ 0． 01;与模型组比较，3)P
＜ 0． 05，4)P ＜ 0． 01。
Note:Compared with normal control group，1) P ＜ 0． 05，2) P ＜ 0． 01;
Compared with model group，3)P ＜ 0． 05，4)P ＜ 0． 01．
表 2 土人参提取液对 D-半乳糖所致衰老小鼠血清中 GSH-
PX含量的影响(x ± S，n = 10)
Table 2 Effects of T． crassifolium extract on GSH-PX in serum
of aged mice induced by D-galactose (x ± S，n = 10)
组别
Group
GSH-PX (U /mgprot)
血清 Serum
正常对照组
Normal control group 481． 415 ± 64． 696
衰老模型组
Model group 330． 283 ± 43． 866
2)
土人参低剂量组
T． crassifolium low-dose group 456． 226 ± 74． 185
4)
土人参中剂量组
T． crassifolium medium-dose group 489． 906 ± 80． 873
4)
土人参高剂量组
T． crassifolium high-dose group 393． 396 ± 50． 381
4)
注:与正常对照组比较，1)P ＜ 0． 05，2)P ＜ 0． 01;与模型组比较，3)P
＜ 0． 05，4)P ＜ 0． 01。
Note:Compared with normal control group，1) P ＜ 0． 05，2) P ＜ 0． 01;
Compared with model group，3)P ＜ 0． 05，4)P ＜ 0． 01．
2． 2 土人参提取液对 D-半乳糖所致衰老小鼠心、
肝组织 MDA含量的影响
与正常对照组相比，衰老模型组小鼠心脏、肝脏
的 MDA含量明显升高，具有显著差异(P ＜ 0． 01);
与衰老模型组相比，土人参提取液中、高剂量组小鼠
心脏、肝脏中的 MDA含量明显降低，具有显著差异
(P ＜ 0． 01)，但是土人参提取液的低剂量组中的心
脏的 MDA降低不明显(P ＞ 0． 05)，而土人参提取液
低剂量组小鼠肝脏 MDA 含量明显降低，具有显著
差异(P ＜ 0． 01)，结果见表 3。
表 3 土人参提取液对 D-半乳糖所致衰老小鼠心、肝组织
MDA含量的影响(x ± S，n = 10)
Table 3 Effects of T． crassifolium extract on MDA in heart and
liver tissues of aged mice induced by D-galactose (x
± S，n = 10)
组别
Group
MDA (U /mgprot)
心脏 Heart 肝脏 Liver
正常对照组
Normal control group 37． 965 ± 7． 168 30． 711 ± 5． 404
衰老模型组
Model group 54． 052 ± 9． 198
2) 40． 056 ± 7． 7142)
土人参低剂量组
T． crassifolium
low-dose group
48． 582 ± 4． 268 26． 418 ± 4． 2534)
土人参中剂量组
T． crassifolium
medium-dose group
41． 347 ± 6． 0694) 25． 416 ± 4． 2464)
土人参高剂量组
T． crassifolium
high-dose group
38． 409 ± 5． 7484) 28． 957 ± 2． 9754)
注:与正常对照组比较，1)P ＜ 0． 05，2)P ＜ 0． 01;与模型组比较，3)P
＜ 0． 05，4)P ＜ 0． 01。
Note:Compared with normal control group，1) P ＜ 0． 05，2) P ＜ 0． 01;
Compared with model group，3)P ＜ 0． 05，4)P ＜ 0． 01．
3 讨论
自上世纪二十年代自由基学说创立以来，对于
自由基损伤的研究就不断深入。许多研究证实，体
内自由基含量是随着年龄增长而积累的，但体内产
生抗氧化剂和氧化酶能力却随年龄增加而逐渐下
降。自由基的氧化可出现肌肤衰老，色斑，松弛，免
疫系统衰退及全身性老化等一系列现象，因此，减少
466 天然产物研究与开发 Vol. 26
自由基的产生及寻找有效的抗氧化性药物，对人类
的生命与健康有着重要意义。本实验通过与 D-半
乳糖所致衰老模型相对比，来研究土人参提取液的
抗氧化作用。
研究表明大剂量 D-半乳糖可引起多组织基因
表达与调控异常、细胞增殖分化能力下降及细胞退
行性改变等表现，其机制可能是 D-半乳糖诱导活性
氧增多，脂质过氧化亢进，产生超氧阴离子自由
基［8］。同时脂质过氧化分解产物 MDA 能使 DNA、
蛋白质发生交联，影响细胞的分裂，破坏蛋白和酶的
结构和功能［9］，因此，测试 MDA 的量常可反映机体
脂质过氧化的程度，同时也可间接地反映出细胞损
伤程度。从实验结果可知，与正常对照组小鼠相比，
衰老模型组小鼠中的心、肝脏组织中 MDA 的含量
明显的升高，说明由 D-半乳糖所致衰老模型组小鼠
已经出现细胞损伤，并达到一定程度，同时也表明衰
老模型是制备成功的。而土人参提取液中、高剂量
组小鼠心脏、肝脏中的 MDA 含量与衰老模型组相
比也明显降低，土人参提取液低剂量组小鼠肝脏
MDA含量同样明显降低。说明土人参提取液具有
抑制 MDA生成，减少细胞损伤的作用。
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)是机体内广泛
存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异
的催化还原型谷胱甘肽对过氧化氢的还原反应，可
以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。超氧化
物歧化酶(SOD)对机体的氧化与抗氧化平衡起着至
关重要的作用，此酶能清除超氧阴离子自由基保护
细胞免受损伤。从实验结果可知:土人参提取液三
个剂量组小鼠血清中的 GSH-PX 和心脏、肝脏中的
SOD活性与衰老模型组相比均有明显升高，说明土
人参提取液可以通过提高 SOD 和 GSH-PX 的活性，
从而达到抗自由基氧化及保护细胞膜结构的作用。
土人参对抗衰老与提高免疫力、抗疲劳有紧密联系，
对中枢神经系统的调节，控制内分泌，延缓细胞衰老
进程，全面提高人体免疫等起明显的作用，是一种难
得的滋补强壮剂，有促进人的食欲、睡眠、疲乏等症
状的改善，这种功效可能是土人参中的环烯醚萜、三
萜皂苷及糖类等成分起作用。因此综合以上分析证
明土人参提取液具有抗氧化，延缓衰老的作用。
研究表明土人参是比较安全且无毒性的植
物［10］，同时在价格上相对便宜，并且野外生长资源
丰富，因此可以根据土人参的抗氧作用，将其由原来
的野生植物变成预防衰老的保健产品，这样不仅可
以充分发挥土人参的药用功效，而且也为人类的健
康做出贡献，同时也展示出我国中草药的独特魅力。
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