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山蜡梅叶中总黄酮提取工艺的研究



全 文 :科技信息 2010 年 第 29期SCIENCE & TECHNOLOGY INFORMATION
山蜡梅叶为我国特有的蜡梅科蜡梅属植物, 药用部分为其干燥
叶,主要分布于江西德兴大茅山区及安徽徽州地区齐云山一带,为山
坡,路旁,溪边,疏林中的野生品,具有解表祛风,清热解毒之功效,民
间习惯用叶泡茶饮以防治感冒;据中医推荐,山蜡梅叶颗粒是目前较
有效果的预防药物,它富含生理活性因子,具有解表祛风,清热解毒之
功能,是人们防治病毒的优选良药,对病毒感染有极好的防治作用 [1];
目前有关山蜡梅叶活性成分的相关研究报道很少,开展山蜡梅叶化学
成分的很有必要。 许多研究已表明黄酮类化合物具有多种生物活性,
除利用其抗菌、消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静、利尿等作用外,在
抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有显著效果。 山蜡梅叶中总
黄酮含量的提取为研究其活性成分及开发利用山蜡梅叶地方资源提
供科学依据。
1 实验部分
1.1 主要仪器和试剂
仪器:植物粉碎机,恒温鼓风干燥箱,HHS 型电热恒温水浴锅(上
海博讯实业有限公司医疗设备长),722 可见分光光度计(上海精密科
学仪器有限公司),Sartorius BS210S 电子分析天平,KQ—250DE 型数
控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
试剂:山蜡梅叶(产地浙江丽水);芦丁、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化
钠及无水乙醇等均为分析纯国产试剂。
1.2 实验方法
1.2.1 提取溶剂的确定
黄酮类化合物的提取通常采用水提取和极性溶剂提取两种方法[2]。
极性溶剂易渗入至原料的内部,提取效果要好于水提取法;极性溶剂
中,乙醇的食用安全性高,价格较低,可回收再利用。 所以本研究选定
乙醇作为山蜡梅叶中黄酮类化合物的提取溶剂。
1.2.2 提取工艺条件的确定
溶剂提取效果受溶剂浓度、提取温度及提取时间等因素影响 [2]。本
试验采用单因素试验和正交试验来确定山蜡梅叶中黄酮类化合物最
佳提取工艺条件。最后在最佳条件下用超声波代替水浴来提取山蜡梅
叶中的黄酮类化合物,看哪个提取率更好。
1.2.3 标准工作曲线的制备
采用 NaNO2—A1(NO3)3—NaOH 显色法[3、4]。铝盐在碱性条件下与黄
酮类化合物形成络合物,其最大吸收峰的波长为 510nm,在此波长下
可以进行比色分析。 加入的亚硝酸起还原剂作用,防止黄酮类化合物
受氧化而损失。
准确称取经 105℃干燥至恒重的芦丁 0.1100g,用体积分数为 30%
的乙醇溶液微热溶解,冷却后移入 100mL 容量瓶中,摇匀,定容,此标
准溶液的浓度为 1.1000g/L。 分别吸取标准液 0、0.50、1.00、1.50、2.00、
2.50、3.00mL 于 25mL 容量瓶中 , 分别加入浓度为 48g/LNaNO2 溶液
0.70mL,摇匀,放置 5min,加入浓度为 91g/LAl(NO3)3 溶液 0.70mL,摇
匀,放置 6min,再加入 1mol/L 的 NaOH 溶液 5.00mL,再用体积分数为
30%的乙醇溶液定容加,摇匀,静置 10min,于波长 510nm 处测定吸光
度,以试剂空白作为参比液。以芦丁浓度为横坐标、吸光度为纵坐标作
标准工作曲线,见图 1。
1.2.4 提取液中黄酮类化合物含量的测定
准确吸取提取液 1.00mL, 用与提取时同浓度的乙醇溶液稀释至
25mL。 取稀释液按按与标准曲线相同的方法测定提取液的吸光度,计
算提取率 e。
提取率的计算公式[5]为:e=YaV /W
式中 Y——黄酮类物质的质量浓度,mg/mL
V——原提取液体积,mL
W——提取用山蜡梅叶的质量,mg
a——稀释倍数
根据所测定溶液的吸光度,用曲线方程计算出 Y.
图1 芦丁标准曲线
2 结果与分析
2.1 单因素实验
2.1.1 乙醇浓度对提取率的影响
精确称取 5 份(0.5000g)山蜡梅叶于圆底烧瓶中,分别加入体积分
数为 0.20%、40%、60%、80%、100%的乙醇各 15.00mL, 在 60℃恒温水
浴锅中提取 2h,趁热过滤,冷却后分别取 1.00mL 提取液置于 25mL 容
量瓶中,用同浓度的提取液定容至 25mL,然后按照 1.2.4 条的方法进
行黄酮类化合物的测定。
图 2 表明,随着乙醇体积分数 C 的提高,黄酮的提取率呈上升的
趋势,但体积分数达到 40%以后上升幅度减缓,浓度大于 60%后随着
体积分数的进一步升高,黄酮提取率反而有所下降。 这可能是因为山
蜡梅叶中黄酮为多种化合物的混合物,包括各种黄酮苷和苷元,这些
物质由于极性和化学结构不同,在不同极性的提取溶剂中的溶解度也
不相同。本实验表明,体积分数为 40%~60%的乙醇溶液相对于其他浓
度能更好地提取出山蜡梅叶中的黄酮类化合物。
山蜡梅叶中总黄酮提取工艺的研究
于鑫州 陈巳红 沈秋仙
(丽水学院 浙江 丽水 323000)
【摘 要】山蜡梅叶中黄酮类化合物的提取效果与外界条件有关。通过单因素试验分析了提取液浓度、提取温度、提取时间及料液比等 4 个
主要因素对提取率的影响。 在单因素的基础上,通过正交试验,得到最佳提取工艺如下:超声波作用下,乙醇浓度为 50%,料液比为 1:40 ,提取
温度为 80℃,提取时间为 3h。
【关键词】山蜡梅叶;黄酮类化合物;提取
Study on Falconoid Extraction From Chimonanthus-nitens
YU Xin-zhou CHEN Si-hong SHEN Qiu-xian
(Lishui Institute,Lishui Zhejiang,323000)
【Abstract】The effect of extracting flavonoids from Chimonanthusnitens is influenced by external condition. During the extracting process, four
main factors including the concentration of extracting solution, temperature, time and ratio of solid to liquid are studied influence extraction ratio by
using single factor analysis method. The optimal process conditions are obtained by orthogonal analysis as follows: ethanol concentration 50%, ratio of
solid to liquid 1∶40, extracting duration 3h and extracting temperature 80℃under ultrasonic condition.
【Key words】Chimonanthus nitens;Flavonoids;Extracting
○科教前沿○
493
科技信息SCIENCE & TECHNOLOGY INFORMATION2010 年 第 29期
图 2 乙醇体积分数对提取率的影响
2.1.2 料液比对提取率的影响
精确称取 4 份(0.5000g)山蜡梅叶于圆底烧瓶中,分别加入乙醇浓
度为 40%的乙醇 5.00、10.00、15.00、20.00mL, 料液比分别为 1∶10,1∶
20,1∶30,1∶40。 在 60℃恒温水浴锅中提取 2h,趁热过滤,冷却后分别取
1.00mL 提取液 , 置于 25mL 容量瓶中 , 用同浓度的提取液定容至
25mL,然后按照 1.2.4 条的方法进行黄酮类化合物的测定。
图 3 表明,随着料液比 W∶V 的升高,提取率也随之增大,但当料
液比达到 1∶30 后,黄酮类化合物的提取率增加缓慢。 黄酮类化合物的
提取在考虑提取率的同时,还应该考虑提取用量和提取液蒸发浓缩时
的能源消耗,因此需要对料液比进行进一步的研究。
图 3 料液比对提取率的影响
2.1.3 提取时间对提取率的影响
精确称取 4 份(0.5000g)山蜡梅叶于圆底烧瓶中,加入乙醇浓度为
40%的乙醇各 15.00mL, 在 60℃的恒温水浴中分别提取 1、2、3、4h,趁
热过滤,冷却后分别取 1.00mL 提取液置于 25mL 容量瓶中,用同浓度
的提取液定容至 25mL,然后按照 1.2.4 条方法进行黄酮类化合物的测
定。
图 4 表明,提取时间为 1h 时,提取率较低,随着时间的延长,山蜡
梅叶中黄酮类物质的提取率不断上升, 但当时间达到 3h 以后黄酮类
化合物的提取率增加的幅度逐渐变小。
图 4 提取时间对提取率的影响
图 5 提取温度对提取率的影响
2.1.4 提取温度对提取率的影响
精确称取 5 份(0.5000g)山蜡梅叶于圆底烧瓶中,分别加入乙醇浓
度为 40%的乙醇各 15.00mL,分别在 40、50、60、70、80℃的恒温水浴中
提取 3h, 趁热过滤, 冷却后分别取 1.00mL 提取液置于 25mL 容量瓶
中,用同浓度的提取液定容至 25mL,然后按照 1.2.4 条的方法进行黄
酮类化合物的测定。图 5 表明,随着提取温度的升高,提取率呈增加的
趋势。但综合考虑提取温度过高会对提取液中的黄酮类化合物的活性
造成破坏,杂质溶出较多,同时高温提取能耗也较大,因此提取温度以
不超过 80℃为好[6]。
2.2 正交实验
单因素实验对上述不同提取工艺参数进行了初步的筛选,为了分
析参数影响主次因素,得到最佳的提取工艺,进行正交实验。参照单因
素实验结果,以影响黄酮类化合物提取率的乙醇浓度、料液比、提取时
间和提取温度为 4 个影响因素, 取各自的不同水平进行正交实验,实
验设计及结果分析如表 1 所示[7]。
表 1 实验方案及实验结果
由表 1 可知,RD>RB>RC>RA,提取温度之间存在显著差异,最佳提
取工艺为 A3B3C2D3。 在最优化验证试验中,提取率为 5.70%,此结果比
正交试验中所有的提取率都高,证明此结果是合理的,所以取以乙醇
为提取剂的最佳工艺条件为乙醇浓度为 50%,料液比为 1∶40,提取时
间为 3h,提取温度为 80℃。
2.3 超声波提取山蜡梅叶用的黄酮类化合物 [8]
根据正交实验, 我们得到了最佳的提取工艺条件为提取温度
80℃,料液比 1∶40,提取时间 3h,乙醇体积分数 50%。 上面的提取温度
80℃是通过水浴加热实现的,如果用超声波代替水浴加热,使山蜡梅
叶在超声波在里提取,其它条件都一样,即:提取温度 80℃,料液比 1∶
40,提取时间 3h,乙醇体积分数 50%。 最后通过公式 e=YaV /W 计算,
得到提取率为 6.50%,比用水浴提取得到的提取率 5.70%要高。
3 结论
3.1 影响山蜡梅叶中黄酮类化合物提取率的主次因素依次为提取温
度、料液比、提取时间、乙醇浓度。最佳提取工艺条件为提取温度 80℃,
料液比 1∶40,提取时间 3h,乙醇体积分数 50%。
3.2 用超声波提取山蜡梅叶中黄酮类化合物的效果为最佳。
【参考文献】
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节[A] / /第二届浙江中西部科技论坛文集:药学分卷[C].2005.
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国粮油学报,2006,12(04):25.
[4]吴雪辉,江南,梁颖诗,陈丽珊.微波提取板栗花中黄酮类物质的工艺研究[J].食
品工业科技,2006,5(08):34-38. (下转第 442 页)
试验号
A
乙醇浓度
C/ %
B
料液比
W∶V/(g∶mL)
C
提取时间
t/h
D
提取温度
T/℃
X
提取率
e/%
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1(30)
1
1
2(40)
2
2
3(50)
3
3
1(1:20)
2(1:30)
3(1:40)
1
2
3
1
2
3
1(2)
2(3)
3(4)
2
3
1
3
1
2
1(60)
2(70)
3(80)
3
1
2
2
3
1
4.47%
4.01%
5.07%
5.00%
4.76%
4.08%
4.07%
4.90%
4.91%
K1
K2
K3
k1
k2
k3
R
13.55
13.84
13.88
4.517
4.613
4.627
0.11
13.54
13.97
14.06
4.513
4.657
4.687
0.174
13.45
13.92
13.9
4.483
4.64
4.633
0.157
14.14
12.16
14.97
4.713
4.053
4.99
0.937


○科教前沿○
494
科技信息SCIENCE & TECHNOLOGY INFORMATION2010 年 第 29期
(上接第 494 页)[5]马振山.大孔吸附树脂在药学领域中的应用研究.中成药,
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作者简介:于鑫州(1989.10—),男,丽水学院本科在读。
[责任编辑:王静]


本系统主要根据工作需求,在各系统模块下划分目录及案卷著录
两大内容。 目录内容主要是从整个系统内容的角度管理全部档案(如
图表 3),对各种操作进行划分;案卷著录主要是从各个部门子系统中
进行归划管理(如图表 4)。
1)子系统目录:是根据菜单目录各子系统而设置的部门管理内容
目录,大体划分为电子文件管理、统计年报等十四个模块。
2) 案卷著录: 根据各个部门的具体情况对其部门的案卷档案录
入、案卷档案修改、案卷档案打印、编制报表等操作。
(1)电子文件:该模块提供电子文件的新建、原文导入、删除、修
改、下载、打印功能;
(2)多点录入:对文件信息标题、文件号、发送单位、起草人、抄送
单位等信息采用多点录入形式,突显出文件信息的全面性。
(3)案卷归还:此模块主要对到期归还的案卷档案提供信息提示,
如应归还日期、超期等。
(4)案卷借阅:对借出的案卷进行外借人员、案卷等信息记录,可
便于统计及了解外借情况。
(5)案卷整理:整理案卷的过程。 有些案卷由于进行了反复的操
作,可能会引起数据不准确,通过这个过程可以重新整理案卷的数据。
(6)编制案卷:编制的目的是把归档后的大量文件按类别制成案
卷;
(7)插卷:用户在录入案卷的过程中,如果因为各种原因漏录了或
是要补录其中某份案卷时,用手工修改的方式来修改案卷数据,显然
是费时费力,因此系统提供案卷的插卷功能。
(8)拆卷:主要对有关案卷内容进行拆卷调整,如归类不当、装订
错误等。
(9)借阅检索:进入案卷级档案管理系统后点击“借阅”下拉菜单
项。弹出子菜单中选择并单击“借阅检索”,进入借阅检索窗口。按借阅
人或借阅文件,输入相应的检索条件信息,然后单击“借阅检索”即可。
(10)开放管理:主要是面对全院性工作人员的功能设置模块,针
对医院内部人员对所需相找内容提供查询检索,有利于用户查找到信
息后再到档案部门确认。
(11)案卷检索:主要是用户根据需求对相关部门的案卷进行检索
查找。
(12)鉴定销毁:对超过一定时期的档案经过档案管理委员会鉴定
予以销毁的档案目录存根。
(13)打印统计:对用户各种需求档案资料进行统计并打印。
(14)编制报表:报表是对各种需求内容进行选择编制。
1.3.5 数据库设计
在数据库设计方面,首先要特别注意人员基本信息表与各子表的
内在关系。该系统在数据结构及数据组成设计上以通用性、灵活性、易
于修改扩充为目标,包括以下数据库组成:
(1)文件数据库:保存登记文件的基本情况;
(2)档案数据库:保存档案文件的基本情况;
(3)主题词数据库:管理系统常用词组和标题、科目等信息;
(4)代码数据库:文件、档案、单位等名称用代码表示;
(5)其他数据库:保存系统参数、用户参数等信息。
2 系统功能作用
医院档案信息管理系统除了能够完成档案信息的收集、 保管、鉴
定、统计等日常事务工作外,更充分发挥了信息技术的优势,开发利用
档案信息,体现档案信息在医院管理中的作用,使医院档案信息管理
达到新的水平。 因此,在构建医院档案信息管理系统时充分考虑到其
设计目标:
2.1 信息采集功能: 档案信息管理系统建设是一项复杂而细致的系
统工程,在考虑结合办公自动化系统与档案信息管理系统相互融合的
情况下,依托医院网络平台实现信息间的互换,并按照一定的要求对
档案进行收集、鉴定和筛选,特别是在医院办公自动化(OA)系统中产
生的各种红头文件以及电子信息,使有价值的档案信息源源不断地输
入到系统中,形成档案信息管理系统丰富的信息资源;
2.2 信息服务功能: 医院档案信息管理系统以开发利用档案为医院
各项工作服务为目的, 系统应该能够为用户提供必要的决策信息服
务。 通过研究档案利用者及其档案利用需求的具体特点,寻求适应档
案利用需求实际的服务模式。系统根据用户需求对原始信息进行深层
次的提炼、加工而形成再生信息,使用户可以在权限内进行浏览、下载
和打印。
2.3 综合统计功能:通过这个功能,用户按类型、年度、及部门等信
息,在任何时间对系统中的档案信息进行汇总统计,并以图表等形式
表示。
2.4 文档一体化功能: 医院档案信息管理系统以提高办事效率和管
理水平为准则,系统具有文档一体化管理功能,实现从文件生成制发
到归档管理的全过程控制。通过分析系统的诸多方面及医院现代化办
公程序,从合理安排进度、提高工作效率入手,研究系统管理活动的行
为与时间关系,避免重复劳动,使文档工作流程科学化、合理化,并加
强档案部门对文件管理的超前控制,保证档案的质量。
2.5 检索功能:此功能与综合统计都属于统计作用,但功能上有所不
同。 检索是对某一个关键词采取多种检索途径和检索手段,实现档案
文件级目录机检和全文数据传输,使用户能迅速、准确地查找到自己
所需要的档案信息。在对所需查找的资料只有一些不完整或零碎的信
息情况下,如采用单一检索或模糊查询,以确定其信息所在系统模块
位置,方便用户快速得到相关信息。
2.6 实现共享利用:档案管理的目的是提供信息为医院管理服务,构
建医院档案信息管理系统,可以实现对整个档案系统的标准化、科学
化管理,实现各种信息流的通畅,并保障信息在档案管理中的充分共
享和利用。 用户在利用网络中的档案信息时,可以通过计算机网络平
台的优势,按照自己的需求向档案信息管理系统提出检索要求,从而
快速、准确、方便地获取、利用档案信息。
2.7 系统维护:主要是供管理员对系统中各子系统数据进行维护,主
要包括:倒排设置、提示设置、分类管理、地址设置、密级设置、用户管
理、日志管理等,使系统可对任何一个数据库实行初始化和有条件的
删除、备份、恢复以及动态链接。
2.8 系统的其他管理功能:包括输入法设置、数据导入导出、数据字
典等。
医院档案信息管理系统是实现医院档案规范化、科学化、现代化
管理的必然趋势,对提高医院管理水平、提升医院核心竞争力具有非
常重要的意义和作用。医院档案信息管理系统按照发展、统一、适用原
则,在运行过程中不断改进和完善,并基于院内局域网与医院其它管
理系统联网,构建共享平台,实现医院档案管理网络化,有效推进医院
信息化管理进程。
【参考文献】
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※2008 年医院信息推广项目。
[责任编辑:曹明明]

○本刊重稿○
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