全 文 ：跌打红药胶囊质量标准研究
★　罗晓红　(江西省妇幼保健院　南昌 330006)
★　黄慧成　(江西省南昌市食品药品检验所　南昌 330029)
关键词:跌打红药胶囊;质量标准
中图分类号:TQ 460.7+2　　文献标识码:A
　　跌打红药胶囊由三七 、红花 、川芎 、当归 、白芷等六味中
药加工而成。 功能为活血止痛 、祛瘀生新 , 主治跌打损伤 、筋
骨瘀血肿痛 、风湿麻木。为更好地对该药进行质量控制 , 拟
用薄层色谱对三七 、川芎 、白芷 3 种药材进行鉴别 , 用高效液
相色谱法测定三七人参皂苷 Rg1 的含量。现报告如下:
1　仪器与试药
日本岛津 LC-10ATvp 液相色谱仪 , SPD-10Avp 紫外可
见检测器 , shimpack vp-ODS 柱(4.6 mm×150 mm), CS-lig ht
色谱工作站。 KQ-50 型超声 波清洗器 , 德国 Sartorius
DP211D电子天平(十万分之一)。
甲醇为色谱纯 , 其余所用试剂均由分析纯。人参皂苷
Rg1对照品 、欧前胡素对照品 、异欧前胡素对照品 、三七对照
药材 、川芎对照药材均为中国药品生物制品检定所提供。
2　实验与结果
2.1　薄层色谱鉴别
2.1.1　三七　供试品溶液的制备:取本品 5 粒内容物 , 加乙
醚超声处理 2 次(20 , 20), 每次 10 分钟 , 滤过 , 弃去乙醚液 ,
滤渣挥干乙醚后加水 9 滴和水饱和的正丁醇 5 mL , 超声处
理 20分钟 ,离心 , 取上清液 , 加 3 倍量正丁醇饱和的水 , 摇
匀 , 离心 ,取正丁醇层蒸干 , 残渣加甲醇使溶解成 1 mL , 作为
供试品溶液。对照品溶液的制备:取三七对照药材 0.5 g ,同
法制成对照药材溶液。阴性对照品溶液的制备:除三七外 ,
其它各药按处方量投料制成阴性样品。取阴性样品按供试
品溶液的制备条件制成阴性对照品。吸取上述 3 种溶液各 2
μL , 分别点于同一硅胶 G 薄层板上 , 以正丁醇-醋酸乙酯-水
(4∶1∶5)的上层溶液为展开剂 ,展开 , 取出 ,晾干 , 喷以 10%硫
酸乙醇溶液 , 在 105 ℃加热数分钟 , 至斑点显色清晰。日光
下检视 , 供试品色谱中 ,在与对照药材色谱相应的位置上 ,显
相同紫色斑点。
2.1.2　白芷　供试品溶液的制备:取本品 20 粒内容物 , 加
乙醚 30 m L ,超声处理 10 分钟 ,滤过 ,滤液挥干 , 残渣加醋酸
乙酯 0.5 mL 使溶解 ,作为供试品溶液。对照品溶液的制备:
取欧前胡素 、异欧前胡素对照品 , 加醋酸乙酯制成每 1 m L各
含 1 mg的混合溶液作为对照品溶液。阴性对照品溶液的制
备:除白芷外 ,其它各药按处方量投料制成阴性样品。取阴
性样品按供试品溶液的制备成阴性对照品。吸取上述 3 种
溶液各 4 μL , 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅
胶 G 薄层板上 ,以石油醚(30 ～ 60 ℃)-乙醚(3∶2)为展开剂 ,
展开 , 取出 ,晾干 , 置紫外光灯(365 nm)下检视 , 供试品色谱
中 , 在与对照品色谱相应的位置上 , 显相同亮蓝色荧光斑点。
2.1.3　川芎　供试品溶液的制备:取本品 20 粒内容物 , 加
氨试液 2.5 mL 使湿润 ,加氯仿 30 m L ,密塞 , 放置 30 分钟后
超声处理 20 分钟 , 滤过 ,滤液蒸干 , 残渣加醋酸乙酯使溶解
成 1 mL , 作为供试品溶液。对照品溶液的制备:取川芎对照
药材 0.5 g ,同法制成对照药材溶液。阴性对照品溶液的制
备:除川芎外 ,其它各药按处方量投料制成阴性样品。取阴
性样品按供试品溶液的制备成阴性对照品。吸取上述 3 种
溶液各 10 μL ,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的
硅胶 G 薄层板上 ,以环己烷-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂 , 展开 ,
取出 , 晾干 , 喷以碘化钾碘试液 , 日光下检视 ,供试品色谱中 ,
在与对照药材色谱相应的位置上 ,显相同黄棕色斑点。
2.2　人参皂苷 Rg1 的含量测定
2.2.1　供试品溶液的制备　供试品溶液的制备:取本品 10
粒的内容物 , 精密称定 , 研细 , 取 0.8 g ,置索氏提取器中 , 加
甲醇适量 , 水浴回流提取 3 小时 , 甲醇提取液浓缩至约 10
m L ,放冷 , 用甲醇定量转移至 25 mL 量瓶中 ,摇匀 , 即得。
2.2.2　对照品溶液的制备　精密称取人参皂苷 Rg1 对照品
适量 , 加甲醇制成每 1 m L含人参皂苷 Rg1 0.5 mg 的溶液 ,
摇匀 , 即得。
2.2.3　阴性对照溶液的制备　取除三七以外的其余药味 ,
按制备工艺制成不含三七的样品 ,按供试品溶液制备阴性对
照溶液。
2.2.4　色谱条件与系统适应性试验　色谱条件:用十八烷
基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.05%磷酸溶液(24∶76)为
流动相;检测波长为 203 nm;流速为 1.0 mL/min , 柱温 30
℃。系统适应性试验:精密吸取供试液 20μL , 注入液相色谱
仪 , 测定 ,按人参皂苷 Rg1 计算 ,理论塔板数 n =8 713 , 拖尾
因子 T=1.1 ,分离度 R >1.5。分别精密吸取阴性对照溶液
和溶剂各 20 μL ,注入液相色谱仪 , 测定 , 得阴性对照和溶剂
色谱图 , 阴性对照溶液和溶剂在人参皂苷 Rg1保留时间处无
色谱峰 , 表明阴性对照和溶剂无干扰。
2.2.5　标准曲线的制备与线性关系的考察　以人参皂苷
Rg1峰面积(A)为纵座标 , 人参皂苷 Rg1 进样量(μg)为横座
标绘制标准曲线 , 得回归方程为:Y =153 369.528 5X -3
174.749 2 , r=0.999 9(n =6),人参皂苷 Rg1 对照品进样量
在 3.6 ～ 21.6 μg 范围内与其峰面积呈良好的线性关系。
2.2.6　精密度试验　分别精密吸取供试品和对照品溶液各
20μL , 注入液色谱仪 , 重复进样 6 次 , 计算峰面积积分值 ,结
果供试品 RSD 为 0.30%,对照品 RSD 为 0.83%。
2.2.7　稳定性试验　取供试品液 , 在室温下每间隔 2 小时
进样 20 μL ,测定峰面积 ,实验表明 , 在所测的 8 小时内人参
皂苷 Rg1 基本稳定 , RSD=0.28%。
2.2.8　重复性试验　取批号为 20040303 样品 , 按正文所附
条件制备供试品溶液 5份 ,进样 20μL , 分别测定人参皂苷
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江西中医学院学报2 0 0 5 年1 2月第 1 7 卷第6 期
JOURNAL OF JIANGXI UNIVERS ITY OF TCM 2005 Vol.17 No.6
　
○中药现代化○
HPLC法测定鼻炎片中绿原酸的含量
★　车庆珍　苟小军　(江苏省徐州医药高等职业学校制药工程系　徐州 221116)
关键词:鼻炎片;绿原酸;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:TQ 460.7+2　　文献标识码:A
1　仪器与试药
德国诺尔液相色谱仪;K501 泵 , K2501 紫外检测器 , 欧
洲色谱工作站。绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所);
鼻炎片(江苏省徐州医药高等职业学校制剂实验室提供);甲
醇为色谱纯 , 水为重蒸水 ,其余试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　对照品的制备　精密称取绿原酸对照的适量 , 置检色
量 50%甲醇制成每 1μL 含 50 μg 的溶液 , 即得。
2.2　色谱条件[ 1] 　色谱柱:HypersilODSC18柱(250 mm×4
mm , 5 μm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(15∶85∶1);流速:1.0
μL/ min;柱温:30 ℃,检测波长:327 nm。
2.3　供试品溶液的制备[ 2] 　取本品 10 g ,精密称定 , 置具室
锥形瓶中 ,精密加 50%甲醇50μL , 称定重量 ,超声处理 30 分
钟 , 放冷 ,再称定重量 , 加 50%甲醇补足减少的重量 , 摇匀 ,滤
过 , 精密量取续滤液 5 μL ,置 25μL 棕色量瓶中 ,加 50%甲醇
至刻度 , 摇匀 ,即得。
2.4　阴性试验　取缺金银花的阴性对照药 , 按供试品溶液
制备方法制备成空白对照液 , 测定。结果:空白对照液在相
同位置处无与绿原酸相对应的色谱峰 , 表明空白对照无干
扰。
2.5　线性关系的考察　精密称取对照品 5.1 mg , 置 100 μL
量瓶中 , 加50%甲醇至刻度 ,摇匀 , 制成每1 μL 含 51μg的溶
液 , 分别进样 3 、5、10 、15、20 μL ,作线性回归 , 求得回归方程:
A=89.077 2C-0.330 3 , r=0.999 9 , 结果表明绿原酸在
0.153 ～ 1.02 μg 范围内线性关系良好。
2.6　精密度试验　精密吸取对照品溶液重复进样 5 次 , 按
上述色谱条件测定 , 结果绿原酸峰面积积分值的相对标准差
RSD=1.21%。
2.7　重复性试验　取同一批号(批号:050304)样品 5 份 ,分
别按样品测定法测定 , 结果绿原酸平均含量 0.42 mg/片 ,
RSD=2.18%。
2.8　稳定性试验　取供试品溶液 ,每间隔 2 小时进样 1 次 ,
共进样 5 次 , 按上述色谱条件分别测定 , 平均含量 0.43 mg/
片 , RSD =1.88%,表明供试品溶液在 10 小时内基本稳定。
2.9　加样回收率试验　精密称取已知含量的本品(批号:
050304),加入绿原酸对照品 , 按供试品制备方法制备加样回
收率供试品溶液 , 依上述色谱条件测定 , 计算回收率 , 结果平
均回收率 97.87%, RSD=1.17%(n=5)。
2.10　样品测定　分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液
各 10 μL ,注入液相色谱仪 , 测定。结果见 1。
表 1　三批样品测定结果(n=5)
批　号 平均含量(mg/片)
050301 0.43
050304 0.41
050307 0.44
3　讨论
金银花在本方中为君药 , 因此笔者对其进行了含量测
定。根据文献报告 ,目前 ,对于金银花的含量测定 , 主要针对
氯原酸 , 故本品测定氯原酸含量作为质量控制的指标。
试验中采用乙腈-0.4%磷酸溶液(13∶87)、甲醇-水(60∶
40)、甲醇-水-冰醋酸(20∶80∶1)等为流动相进行分析 , 结果以
本文中流动相最为理想 ,供试品中绿原酸与其它成分得到完
全的分离 , 呈峰形对称。
参考文献
[ 1] 李广胜.HPLC法测定银花胶囊中绿原酸的含量[ J] .郑州大学学
报·医学版 , 2003 , 38(4):587～ 589
[ 2] 中华人民共和国国家药典委员会.中国药典(一部)[ M] .北京:
化学工业出版社 , 2000.1
(收稿日期:2005-09-05)
Rg1峰面积 , 计算含量 ,结果 RSD =1.14%。
2.2.9　加样回收率试验　取已知含量的样品 5 份(含量为
人参皂苷 Rg1 3.42 mg /粒 , 即 16.56 mg / g)添加人参皂苷
Rg1对照品溶液(3.02 mg/ mL)2 mL , 待样品干燥后按正文
含量测定项下方法制备供试品液 , 测定 , 结果平均回收率为
96.09%, RSD=0.81%。
2.2.10　样品测定　按上述含量测定方法对三批样品中人
参皂苷 Rg1 进行含量测定 ,结果见表 1。
3　讨论
跌打红药胶囊方中三七 、川芎 、白芷采用薄层色谱鉴别 ,
专属性强 、阴性无干扰;方中三七人参皂苷 Rg1 的含量 , 采
用高效液相色谱法测定 ,人参皂苷 Rg1 含量为 2.64 ～ 3.32
mg/粒。上述方法稳定性 、重复性均较好 , 可以作为该方的
控制质量标准。
表 1　样品中人参皂苷 Rg1 的含量测定
批号 含量/mg·粒-1
A B
平均含量
/mg·粒-1
20040303 3.25 3.23 3.24
20040926 2.64 2.64 2.64
20050224 3.31 3.34 3.32
(收稿日期:2005-09-19)
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江西中医学院学报 2 0 0 5年 1 2月第 1 7卷第 6期
JOURNAL OF JIANGXI UNI VERSITY OF TCM 2005 Vol.17 No.6
　
○中药现代化○