全 文 ：点地梅(A.umbelate(Lour.)Mer.)别名喉咙草,铜钱草,
报春花科点地梅属一年生草本植物,生于田野潮湿地,南北
各省区也有分布。全草入药,治扁桃体炎,咽喉炎,口腔炎,
急性结膜炎,跌扑损伤,以及咽喉肿痛等症,具极高的药用
价值[1]p258-259。点地梅同时具有较高的观赏价值,其叶丛生,平
铺地面,适宜岩石园栽植及灌木丛旁作地被材料,并有降低
地表湿度,减少尘土飞扬,防止水土流失的功能。因而它是
一种不可多得的草坪草种植物和优良地被植物,对推动园
林事业以及绿地建设具有一定的实用价值[2](p215-216)。目前,传
统的种子繁殖法,繁殖率低,时间长[3](p428),而植物组织培养
2,4-D和6-BA对点地梅愈伤
组织诱导的影响
聂 勇
(绵阳安县界牌中学,四川 绵阳 622651)
【摘 要】以点地梅(A.umbelate(Lour.)Mer.)无菌苗的嫩叶为外植体,研究了不同质量浓度的 2,4-D和 6-BA对愈伤组织
诱导的影响。结果表明:较高浓度的2,4-D(1.0～2.0mg/L)单独使用能促进愈伤组织形成,随着2,4-D质量浓度的增加,愈伤组
织的形成逐渐变弱;在培养基、2,4-D和 6-BA诱导愈伤组织的正交试验中,发现诱导愈伤组织的较优培养基组合为 MS+2,4-
D1mg/L+6-BA0.4mg/L,且产生的愈伤组织多为淡绿色、质地疏松、生长快、褐化时间长,适合于点地梅愈伤组织的诱导。
【关键词】点地梅;2,4-D;愈伤组织
【中图分类号】Q94-33 【文章编号】 A 【文献标识码】1008-4142(2006)04-0126-03
OntheImpactof2,4-Dand6-BAontheInductionof
AndrosaceCalusTissues
NIEYong
(JiepaiHighSchoolofAnxianMianyang,MianyangSichuan622651,China)
【Abstract】BasedontakingthesterilizedyoungleafofAumbelate(Lour.)Mer.asanexplant,thispapermakesastudyofthe
influenceof2,4-Dand6-BAintheinducementofcalustissueswithdiferentmassconcentrations.Theresultrevealsthat2,4-D
withhighermassconcentrations(1.0～2.0mg/L)canpromotetheformationofcalustissueswhenusedalone.Withtheincreaseof
massconcentrationsfor2,4-D,theformationofthecalustissuesisgradualyunstrengthening.Duringtheorthogonalexperimentsof
theculturemedia,2,4-Dand6-BAinductivecalustissues,itisdiscoveredthatthebeterculturemediacombinationforthe
inductivecalustissuesisMS+2,4-D1mg/L+6-BA0.4mg/L,andthattheproducedcalustissuesaremostlygreenish,loosein
texture,fastingrowth,prolongedinbrowningandsuitedfortheinductionofandrosacecalustissues.
【Keywords】androsace;2,4-D;calustissues
【收稿日期】2006—09—15
【基金项目】四川省杰出青年学科带头人培养计划项目(04ZQ026-047);四川省科技厅基础项目(03JY029-021-22)。
【作者简介】聂勇(1976-),男,四川遂宁人,绵阳安县界牌中学教师。
第23卷 第4期 阿 坝 师 范 高 等 专 科 学 校 学 报 2006年12月
Vo1.23 No.4 JOURNALOFABATEACHERSCOLLEGE Dec.2006
与快速繁殖技术可以快速、高效的进行植物的繁殖,并不受
地理、环境和气候条件的影响。本研究以点地梅为材料,讨
论不同调节因子组合对愈伤组织诱导的影响,以期采用组
织培养技术进行大量繁殖,丰富种质资源。
1、材料与方法
1.1外植体的获得
采集野外成熟点地梅种子,在无菌条件下,0.1%HgCl2
浸泡 8min,无菌水冲洗 3-4遍,70%乙醇消毒 1min,无菌
水冲洗2遍,再用次氯酸钠消毒2min,无菌水冲洗 5-6遍,
然后将种子接种在无激素的MS基本培养基上,置25±2℃
,光照12h/d,光照强度1500～2000lx的人工气候箱中培养,
15d后获得无菌苗,采集无菌嫩叶作为实验外植体。
1.2实验方法
1.2.1外植体的接种方法
挑选在基本培养基上长势良好的点地梅嫩叶,在无菌
条件下将叶切成 0.5cm×0.5cm大小,接种到经不同浓度
2,4-D、6-BA处理的诱导培养基上,进行诱导愈伤组织实
验。
1.2.2愈伤组织诱导方法
在MS或LS基本培养基中,分别附加0mg/L、0.25mg/
L、0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L的 2,4-D以及 0mg/L、
0.1mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.8mg/L、1.6mg/L的 6-BA两种
植物生长调节剂,接种点地梅无菌苗嫩叶,进行基本培养基
和2种单一激素对愈伤组织的诱导实验。
通过水平正交实验方法,以 MS/LS培养基+2,4-D(浓
度分别为 0.5mg/L、1.0mg/L、4.0mg/L)+6-BA(浓度分别为
0.1mg/L、0.4mg/L、1.6mg/L)诱导愈伤组织,进行愈伤组织
诱导的最佳培养基和激素组合试验。培养基中的蔗糖浓度
均为30g/L、琼脂8g/L、pH为5.8,光照时间为12h/d、光强
为2000～3000lx,置于人工气候箱中。试验中所用的三角烧
瓶均为50ml,培养基量为25ml/瓶。
1.2.3试验指标的统计
1.2.3.1愈伤组织形态指标的表示方法。本研究中以愈
伤组织形态指标中的颜色、质地、生长势为指标,分别将愈
伤组织的颜色分为绿色和淡绿色,将质地分为疏松和致密,
将生长势分为极好(++++)、好(+++)、较好(++)、一般(+)、抑制
(-)。
1.2.3.2诱导率统计方法。外植体接种后 6～20d开始
产生愈伤组织,在20d后,对诱导的愈伤组织进行形态指标
和诱导率的统计。诱导率=产生愈伤组织的外植体块数/总
接种块数×100%。
2、结果与分析
2.1基本培养基和单一激素对点地梅愈伤组织诱导的
影响 基本培养基和单一激素对点地梅愈伤组织诱导的结
果(表1,2)表明,在不加激素的MS.、LS.2种基本培养基中,
外植体均不能被诱导出愈伤组织;在只附加生长素 2,4-D
的培养基中,均产生了愈伤组织,愈伤组织形成的时间约
8d左右,尤以附加 2,4-D1.0mg/L的基本培养基最为显
著,它们都产生了大量淡绿色疏松愈伤组织,随2,4-D浓度
的增加,抑制了愈伤组织的形成。在只附加分裂素6-BA的
基本培养基中,叶产生愈伤组织的时间约15d左右,外植体
产生的愈伤组织量少,且色深、致密、生长势差,不利于产生
愈伤组织。从所产生的愈伤组织以及继代一次后的愈伤组
织的形态、生长状态、质地以及褐化时间的差异考虑,认为
MS+2,4-D的培养基有利于愈伤组织的形成和继代。
表1 MS培养基中 2,4-D、6-BA单一激素对点地梅
愈伤组织诱导的影响
表2 LS培养基中 2,4-D、6-BA单一激素对点地梅
愈伤组织诱导的影响
聂 勇:2,4-D和6-BA对点地梅愈伤组织诱导的影响第4期 127
2.2基本培养基和激素互作对愈伤组织诱导的影响
经过 2种基本培养基和 2种激素对点地梅无菌苗愈
伤组织诱导的正交试验发现,各种组合对点地梅愈伤组织
诱导的影响差异很大(表3)。
表3培养基组成对愈伤组织诱导的正交试验结果
从表中看出MS培养基有利于愈伤组织的形成,其诱
导率均高于LS培养基,并且在以后的继续培养和继代中发
现MS培养及基中的愈伤组织长势疏松(图 1),且大部分都
比LS培养基中的愈伤组织增殖快。根据观察MS+1.0mg/L
2,4-D+0.4mg/L6-BA较利于点地梅愈伤组织的诱导。
3、意义与进展
3.1小结
点地梅的组织培养取材方便,易于诱导和培养,成本
较低。在MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.4mg/L培养基上
可诱导出愈伤组织,且诱导率高达86.4%。
3.2意义与进展
组织培养与试管快繁广泛的应用于中药材和经济作
物。报春花科植物的组织培养与快速繁殖研究已有零星的
报道[4](p21-23),侯云屏等(2001)利用报春花的叶片和叶柄为外
植体进行了愈伤组织诱导与分化研究[5](p234),但点地梅的组
织培养研究尚未见报道。点地梅具有极高的药用价值和观
赏价值,并且可作为优良的地被植物而倍受关注。自然条件
下主要以种子萌生。由于其采收以花期为主,资源破坏严
重,采用组织培养方法,可获得大量种苗。本文结果可为后
续点地梅离体无性繁殖系的建立提供参考。
【参 考 文 献】
[1]肖培根,杨世林.实用中草药原色图谱(四)草药类
[M].北京:中国农业出版社,2002:258-259.
[2]王莲英.养花实用手册[M].北京:北京林业大学园林
学院花卉教研室编著,2003:215-216.
[3]陈瑛.实用中药种子技术手册[M].北京:人民卫生出
版社,1999:428.
[4]李会宁.仙客来的离体无性试管繁殖研究[J].氨基酸
和生物资源,2001,(3):21-23.
[5]侯云屏,古志渊.报春花的组织培养与快速繁殖[J].
植物生理学通讯,2001,(3):234.
图1点地梅愈伤组织
Fig1CalsfromyoungleavesofAndrosaceumbelate(Lour.)Mer.inMS
阿坝师范高等专科学校学报 2006年128