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紫背金盘草中木犀草素的定性分析



全 文 :CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药
2011 年 3月第 18卷第 7 期 论 著
紫背金盘草为唇形科筋骨草属紫背金盘(Ajuga nipponen-
sis Makino)的全草或根,又名白毛夏枯草,筋骨草。 其味苦、
辛,性寒。具有清热解毒,凉血散瘀,消肿止痛。主治肺热咳嗽
咯血,咽喉肿痛,乳痈,肠痈,疮疖肿毒,痔疮出血,跌打肿痛,
外伤出血,水火烫伤,毒蛇咬伤等症 [1-2],其全草含 β-蜕皮素
(β-ecdysone),筋骨草甾酮(ajugasterone)A 和 B,旌节花甾酮
(shachysterone)D 等; 地上部分含筋骨草素(ajugamarin)A1、
B1-B3、C1、D1 及筋骨草素二萜-1(ajugarin-1)等;叶含筋骨
素(ajugamarin),二氢筋骨草素(dihydroajugamarin)和断-氯代
筋骨草素(seco-chlorohydrin ajugamarin)等。 现代药理研究表
明紫背金盘草有抑菌、抗感染和消肿止痛的作用,而筋骨草
属植物活性成分木犀草素同样具有抑菌、 抗感染等作用,有
文献记载紫背金盘草中含有木犀草素[4-6],本文采用硅胶薄层
色谱法和高效液相色谱法对紫背金盘草中是否含有木犀草
素进行了定性研究。
1 仪器与试药
1.1 仪器
高效液相色谱仪(LC-10ATVP,日本导津),超声波清洗器
(SK3300H,KUDOS),电子天平(ES-600,长沙湘平科技发展
有限公司),ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂),电
热恒温鼓风干燥箱(DHG-9145A,上海一恒科技有限公司),水浴
锅(BDS1,北京市医疗设备厂),SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵
(巩义市英峪予华仪器厂),微孔滤膜及实验室其他常用设备。
1.2 试药
紫背金盘(由民间赤脚医生在湖南省宁乡县采集,经湖
南中医药大学药学院彭菲教授鉴别),木犀草素标准品(中国
药品生物制品检定所,批号:111520-200504),甲醇(光谱纯
和分析纯),乙酸乙酯(分析纯),乙醚(分析纯),重蒸馏水,磷
酸,0.5%CMC-Na,硅胶 G,95%乙醇(AR),苯(AR),甲酸(AR)。
2 试验方法
2.1 硅胶薄层色谱法
2.1.1 样品的制备
2.1.1.1 称取紫背金盘草的粗粉 13.5 g 于 1 000 ml 圆底烧瓶
中,加 95%乙醇浸没药材,第 1 次回流提取 40 min,趁热滤
过,药渣第 2次回流提取 30 min同上;第 3次 20 min同上,合
紫背金盘草中木犀草素的定性分析
李云耀,易刚强 *,李晓龙,何桂霞,范冰舵,陈春茗
(湖南中医药大学中药现代化重点实验室(湖南省中药学重点学科 国家中医药管理局药性与药效三级科研实验室),
湖南长沙 410208)
[摘要] 目的:确定紫背金盘草中是否含有木犀草素,为紫背金盘草中活性成分的确定和药理作用的研究提供参考。
方法:采用薄层色谱法和高效液相法。条件,色谱柱为 KromasilC18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸
溶液(56∶44,pH3);流速 0.8 ml/min;进样量 20 μl;紫外检测波长 254 nm;柱温 25℃。 结果:通过薄层色谱法和高效液
相法可得出紫背金盘草中不含木犀草素。结论:木犀草素可能不是紫背金盘具有抑菌、抗感染、消肿止痛的活性成分。
[关键词] 紫背金盘;木犀草素;薄层色谱;高效液相色谱;定性分析
[中图分类号] R931.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2011)03(a)-009-03
The qualitative analysis of whether luteolin is included in Ajuga nipponensis
Makino
LI Yunyao, YI Gangqiang*, LI Xiaolong, HE Guixia, FAN Bingduo, CHEN Chunming
(TMC University of Hunan, Hunan Province, Changsha 410208, China)
[Abstract] Objective: To determine whether Ajuga nipponensis Makino contains luteolin and provide a reference for the
research of the active ingredients of Ajuga nipponensis Makino and their pharmacological effects. Methods: Used thin-lay-
er chromatography and high performance liquid chromatography. Results: The HPLC method was employed by taking Kro-
masilC18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm) as fixed phase and methanol-0.2% phosphoric acid as the mobile phase at flow
rate of 0.8 ml/min. The injection volume was 20 μl. The detective wavelength was 220 nm. The column temperature was
25℃. Results: The active ingredients of Ajuga nipponensis Makino didn′t contain luteolin. Conclusion: The active ingre-
dients of Ajuga nipponensis Makino with the antibacterial, anti-inflammatory, detumescent and acesodyne function is not
luteolin.
[Key words] Ajuga nipponensis Makino; Luteolin; Thin-layer chromatography; High performance liquid chromatography;
The qualitative analysis
[基金项目] 湖南省教育厅科研项目(08C629);2008 年湖南省大学生研究
性学习和创新性实验计划项目。
[作者简介] 李云耀(1978-),男,湖南沅陵人,实验师,硕士研究生,主要从
事中药新药开发研究。
*通讯作者:易刚强(1965-),男,副教授。
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中国当代医药 CHINA MODERN MEDICINE
2011 年 3月第 18卷第 7期论 著
并滤液并减压浓缩至 50 ml;取其中 40 ml制成浸膏,加 20 ml
水溶解,先用 60 ml乙醚萃取 3 次 20 ml/次,合并乙醚层并减
压浓缩至 10 ml,然后用乙酸乙酯萃取同上。
2.1.1.2 精密称取木犀草素标准品 5 mg,加甲醇溶解并于 10 ml
的容量瓶定容成 0.5 mg/ml 的木犀草素对照品。
2.1.2 薄层色谱法鉴别
硅胶 G-0.5%CMC-Na 板(4 cm×20 cm),105℃活化 1 h,
展开剂为苯-乙酸乙酯-甲酸(3∶2∶0.5),将乙酸乙酯萃取液,
对照品,乙醚萃取液与乙醇提取液依次点于同一薄层板上,展
开,晾干,喷 5%AlCl3的乙醇溶液显色,置于紫外灯(254 nm)
下分别观察供试品和对照品的斑点。供试品中没有与对照品
颜色相同并且比移值相同的斑点,表明乙醇提取液中不含木
犀草素(图 1)。 为排除因含量少而显色不明显,以下又对紫
背金盘草提取液中是否含有木犀草素进行了高效液相色谱
法定性。
图 1 薄层色谱法鉴别
2.2 高效液相色谱法
2.2.1 色谱条件
色谱柱为 KromasilC18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相
由甲醇-0.2%磷酸溶液(56∶44,pH3)组成,流速 0.8 ml/min,进
样量 20 μl,紫外检测波长 254 nm,柱温 25℃。
2.2.2 样品溶液的制备
2.2.2.1 取乙醇提取液、乙醚和乙酸乙酯萃取液各 1 ml,分别
置于 10 ml容量瓶中,稀释至刻度摇匀得供试品。
2.2.2.2 取 0.1 ml 0.5 mg/ml 的木犀草素对照品置于 10 ml 容
量瓶中,稀释至刻度摇匀得对照品。
2.2.3 高效液相色谱鉴别
将供试品和对照品用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,分别精
密吸取 20 μl 注入高效液相色谱仪,按上述色谱条件依次测
定。 结果见图 2~5。
3 实验结果
在上述色谱条件下, 木犀草素的标准品的保留时间为
19.7 min,而紫背金盘草乙醇提取液,乙醚萃取液和乙酸乙酯
萃取液的色谱图在保留时间为 19.7 min 时无对应的吸收峰。
4 结论
通过对紫背金盘草的粗粉提取液进行薄层层析及高效
液相色谱分析, 笔者认为紫背金盘草中木犀草素的含量较
低,木犀草素可能不是紫背金盘草抑菌、抗感染和消肿止痛
作用的活性成分。
5 讨论
木犀草素属于黄酮化合物类,易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙
酯、乙醚等有机溶剂中,因此紫背金盘草用 95%乙醇提取,乙
醚和乙酸乙酯分别萃取[7-9]。
硅胶薄层色谱中展开剂用苯-乙酸乙酯-甲酸 (3∶2∶0.5)
展开分离紫背金盘乙醇提取物效果最好,可为紫背金盘草有
效成分的分离提供参考。
采用高效液相色谱法对紫背金盘草中木犀草素定性分
析,方法简便,结果准确可靠。
[参考文献]
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CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药
2011 年 3月第 18卷第 7 期 论 著
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(收稿日期:2010-11-22)
前切除是治疗低位直肠癌的重要方法之一。随着外科技
术的不断进步该手术已成为较为成熟的治疗方案,多数熟练
的外科医生可以在 1 h左右完成。 但由于乙状结肠及系膜血
管解剖变异使得个别手术在切除后可能无法直接吻合,或吻
合后出现近端肠管张力过高,甚至出现近端结肠缺血,使操
作变得十分棘手,无论是采用开放手术或腹腔镜手术所需时
间可能高达 180~250 min[1]。 笔者通过临床观察,根据乙状结
肠系膜形态不同将乙状结肠系膜分为 1 种常见类型和 3 种
变异类型,统计发现不同类型的乙状结肠长度、乙状结肠系
膜长度及乙状结肠附着点距离变化,并将不同类型的手术操
作体会总结如下:
1 资料与方法
1.1 一般资料
研究对象为 2008 年 6 月~2009 年 6 月在河南省肿瘤医
院普外科接受低位直肠癌前切除手术的 200 例直肠癌患者,
均为开放手术。 年龄 15~89岁,平均 53.6岁。 其中,男性 105
乙状结肠系膜粘连类型在低位直肠癌
前切除手术中的临床意义
韩广森,赵玉洲*,李 智,鲁朝敏,任莹坤,顾焱辉,赵鹏程
(河南省肿瘤医院普外科,河南郑州 450003)
[摘要] 目的:研究不同乙状结肠系膜粘连类型对低位直肠癌前切除手术方式的指导意义。 方法:观察 200 例同期住
院直肠癌手术患者乙状结肠系膜形态, 根据乙状结肠系膜粘连形态不同将乙状结肠分为 1 种常见类型和 3 种变异
类型,统计不同类型乙状结肠长度、乙状结肠系膜长度及乙状结肠附着点距离,并总结不同类型的手术操作体会。结
果:乙状结肠长度Ⅰ型为(13.8±2.9) cm,Ⅱ型为(9.5±2.3) cm,Ⅲ型为(10.2±2.6) cm,Ⅳ型为(15.8±7.1) cm。Ⅰ型与Ⅱ
型和Ⅲ型之间乙状结肠长度及系膜长度之间存在明显差异性, Ⅰ型乙状结肠系膜可安全地运用传统手术方法进行
前切除,而Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ型乙状结肠系膜则需注意边缘血管弓的保护和必要时进行结肠脾曲游离,方可安全快速地完
成手术操作。 结论:乙状结肠系膜分型有助于增进对解剖学变异的防范意识,根据解剖学变异采取不同类型的切除
方式,提高低位直肠癌手术的安全性。
[关键词] 直肠癌;乙状结肠系膜;变异
[中图分类号] R735.3+5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2011)03(a)-011-03
The investigation of sigmoid mesocolon variation and its clinical significances
HAN Guangsen, ZHAO Yuzhou*, LI Zhi, LU Chaomin, REN Yingkun, GU Yanhui, ZHAO Pengcheng
(Department of General Surgery, Henan Tumor Hospital, Henan Province, Zhengzhou 450003, China)
[Abstract] Objective: To investigate the types of sigmoid mesocolon variation and its effects on anterior resection for rectal
cancer. Methods: Applied anatomic study on 200 patients of rectal cancer. The anatomic variations were divided into one
normal type and three varied types. Statistic the lengths of sigmoid colon, sigmoid mesocolon, and the distance of the two
attachment points of sigmoid colon. Concluded the experience of operation. Results: The length of type Ⅰ was (13.8±2.9)
cm, typeⅡwas (9.5±2.3) cm, and type Ⅲ was (10.2±2.6) cm. The differences of lengths between the three varied groups
and the normal group were very significant. We could finish the anterior resection of rectal cancer safely. But for three var -
ied types we should be very careful about the margin blood vassals or surgical divide splenic flexure of colon. Conclusion:
Sigmoid mesocolon variation can indicate the difference operation skills to increase the safety of arterials resection for rec -
tal cancer.
[Key words] Rectal cancer; Sigmoid mesocolon; Anatomical variation
[作者简介] 韩广森,河南省肿瘤医院普外科主任医师,主要研究方向:腹
盆部肿瘤的基础与临床研究。
*通讯作者:赵玉洲,男,外科学博士,主治医师,主要研究方向:胃肠道及
胰腺肿瘤的基础与临床研究。
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