全 文 ：　　　　　　表１　　　　　　　 九种老鹳草原植物抗菌效价表
致病菌种抗菌效价
药用植物名称
实验
部位
金黄色葡
萄球菌
白色葡萄
球菌
大肠杆菌 绿脓杆菌 变形杆菌
志贺氏痢
疾杆菌
福氏痢疾
杆菌
宋内氏痢
疾杆菌
牦牛儿苗（太阳花、狼巴巴草）
Ｅｒｏｄｉｕｍ　ｓｔｅｐｈａｎｉｕｍ　Ｗｉｌｄ．
全草 ５１２　 １２８　 １６　 １６　 １６　 １６　 ５１２　 １２８
粗根老鹳草
Ｇｅｒａｎｉｕｍ　ｄａｈｕｒｉｃｕｍ　ＤＣ．
全草 ２５６　 １２８　 １６　 ３２　 ３２　 １６　 １２８　 ３２
毛蕊老鹳草
Ｇｅｒａｎｉｕｍ　ｅｒｉｏｓｔｅｍｏｎ　Ｆｉｓｃｈ　ｅｔ　ＤＣ．
全草 １２８　 ３２　 ８ — １６　 ６４　 １６　 １６
血见愁老鹳草
Ｇｅｒａｎｉｕｍ　ｈｅｎｒｙｉ　Ｋｕｎｔｈ．
全草 ５１２　 ２５６　 ３２　 ８　 １２８　 １２８　 ３２　 １２８
鼠掌老鹳草（鼠掌草、白毫花）
Ｇｅｒａｎｉｕｍ　ｓｉｂｉｒｉｃｕｍ　Ｌ．
全草 １２８　 １６　 ８　 ３２　 ６４　 ２５６　 １２８　 ６４
陕西老鹳草
Ｇｅｒａｎｉｕｍ　ｓｈｅｎｓｉａｎｕｍ　Ｋｕｎｔｈ．
全草 １２８　 ３２　 ８　 １６　 ３２　 １６　 ３２　 ６４
湖北老鹳草
Ｇｅｒａｎｉｕｍ　ｈｕｂｅｈａｎｕｍ　Ｋｕｎｔｈ．
全草 ６４　 １６　 ８　 ３２　 １２８　 ２５６　 ６４　 ６４
球根老鹳草
Ｇｅｒａｎｉｕｍ　Ｐｙｌｚｏｗｉａｎｕｍ　Ｍａｘｉｍ．
全草 ６４　 １２８　 １６　 ３２　 １２８　 １２８　 ６４　 ６４
老鹳草
Ｇｅｒａｎｉｕｍ　ｗｉｌｆｏｒｄｉ　Ｍａｘｉｍ．
全草 ６４　 ４ — — — ４　 ４　 ４
对照组（清热解毒中药）黄连
Ｃｏｐｔｉｓ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　Ｆｒａｎｃｈ．
根茎 １２８　 ６４　 ３２　 ８　 １２８　 １２８　 １６　 ２５６
金银花
Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　Ｔｈｕｍｂ
花蕾叶藤
２５６
１６
１６
２５６
１６
３２
１６
—
—
６４
—
—
２５６
３２
１６
１２８
—
８
１６
—
—
２５６
—
—
　　注：①表内数字为抗菌效价政策 ②表中“—”为无抗菌作用
　　３　讨　论　作者用采自秦岭９种老鹳草对８种
化脓性细菌及肠道病原菌进行了抗菌实验，以常用的
清热解毒中药黄连和金银花做对照，实验结果证明老
鹳草属药用植物及牦牛儿苗对致病菌皆有不同程度的
抑（杀）菌作用。如以实验中能分别抗两种以上的革兰
氏阳性菌和革兰氏阴性菌为广谱抗菌药物，则９种药
用植物都具有广谱抗菌作用，其中以牦牛儿苗、粗根老
鹳草、血见愁老鹳草、鼠掌老鹳草抗菌作用强，高于黄
连，与湖北老鹳草、陕西老鹳草和球根老鹳草的抑（杀）
菌作用近似，但老鹳草低于黄连。与金银花对比表明，
金银花的花蕾与牦牛儿苗、粗根老鹳草、血见愁老鹳
草、鼠掌老鹳草、陕西老鹳草、湖北老鹳草抑（杀）菌作
用近似，而金银花藤（又称忍冬藤）与叶抑（杀）菌作用
与老鹳草相近。
参考文献
［１］　李万波，任　茜，陈国联．败酱草类植物抑菌作用的初
筛实验［Ｊ］．陕西中医，１９９１，１２（２）：８８－８９．
［２］　李万波，任　茜，陈国联．１７５种秦岭草药体外抗菌作
用的实验研究 ［Ｊ］．国土与自然资源研究，１９９２，２：７８－８０
（收稿２０１２－０４－０６；修回２０１２－０５－１２）
＊ 陕西省自然基金项目ＮＯ：ＳＪ０８－ＺＴ０２
苣荬菜中木犀草素的检测方法研究＊
杨智峰　李彤晖　蒙麦侠　辛智科　陕西省中医药研究院（西安７１０００３）
　摘　要　目的：研究苣荬菜中木犀草素的富集、鉴别和含量测定方法。方法：利用聚酰胺树脂柱层析
的方法进行富集，利用聚酰胺薄层和硅胶薄层层析的进行鉴别，利用高效液相色谱法进行含
量测定。结论：建立了以水、体积分数为３０％乙醇和体积分数为５０％乙醇洗脱去杂，以体积
分数为７０％乙醇洗脱富集的方法，建立了以木犀草素为参照物的薄层鉴别方法和高效液相
测定方法。
　主题词　木犀草素／分析　高效液相色谱法
　【中图分类号】　Ｓ８５３．７５　【文章标识码】　Ａ　【文章编号】　１０００－７３６９（２０１２）０８－１０７６－０３
　　苣荬菜是陕西地方习用药材“北败醬”的主要来
源，１９７７年版《中国药典》一部收载过。在陕西分布
广、产量大，干燥幼嫩全草临床主要用于治疗阑尾炎、
肠炎、痢疾，疮疖痈肿，产后瘀血腹痛和痔疮。多年来
一直缺乏切实可靠的检测手段，使市场监管和临床用
药安全有效保障乏力，为此，我们研究了其中木犀草素
６７０１ 陕西中医２０１２年第３３卷第８期
的富集方法和检测方法。
１　仪器和试药　１．１　仪器　高效液相色谱仪
（ＬＣ－２０１０ＡＨＴ 型，日本岛津），ＣＬＡＳＳ－ＶＰ色谱数据工
作站；电子分析天平（型号：ＢＰ２１１Ｄ，ｄ＝０．０１ｍｇ，德国
赛多利斯天平有限公司）；超声波清洗器（型号：ＫＱ－
１００，昆山市超声仪器有限公司）；ＵＶ－８型三用紫外仪
（无锡科达分析仪器厂）。
１．２　试药　乙腈为色谱纯，购自陕西科仪科技有
限公司；水为纯净水；三氯化铝、甲醇、甲酸、三氯甲烷、
丙酮、氨水和冰乙酸均为分析纯。木犀草素对照品（供
含量测定用，批号１１１７２０－２００９０５，购自中国生物制品
检定所）；聚酰胺－６薄层板（浙江四青或国药集团）；样
品北败酱１＃采自陕西太白县（２００９．０７．１６），２＃采自
陕西太白县（２００６．０７．１０），３＃ 购自甘肃天水（２００４．
０４．１７），４＃购自西安市万寿路药材市场，５＃购自陕西
宝鸡市（２００５．０８．３０），６＃购自甘肃（２００４．０４．１６），７＃
来自西安盛兴饮片厂（２００８．０９．１２），８＃来自华阴胜福
中药饮片厂（２００５．１０．１２），９＃陕西省食品药品检验所
（２０１１．０７．１９）。
２　方法与结果　２．１　目标成分富集和薄层鉴别
方法　 取本品粉末１０．０ｇ，置具塞锥形瓶中，加石油醚
（６０～９０℃）浸泡１ｈ，回流两次，依次加石油醚１００和
８０ｍＬ，每次回流１ｈ，放冷，过滤，滤液弃去，滤渣挥干，
加甲醇浸泡１ｈ，回流２次，依次加甲醇１００和８０ｍＬ，
每次１ｈ，放冷，滤过，滤液蒸干，残留物用１５～２０ｍＬ
温水溶解，上聚酰胺柱（柱高１５～１７ｃｍ，内径１．４ｃｍ），
６０ｍＬ水洗（可加压），洗脱液弃去，体积分数为３０％乙
醇６０ｍＬ洗，洗脱液弃去，体积分数为５０％乙醇８０ｍＬ
洗，洗脱液弃去，体积分数为７０％乙醇８０ｍＬ洗，洗脱
液蒸干，用甲醇１．６ｍＬ使溶解，作为供试品溶液。另
取木犀草素对照品适量，加甲醇制成１ｍＬ含木犀草素
１．５ｍｇ的对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》
２０１０版一部附录Ⅳ Ｂ）试验，吸取上述两种溶液各０．
５μＬ，点于同一聚酰胺－６薄层板（浙江四青或国药集
团）上，以甲醇－丙酮－－冰乙酸（１２︰５︰０．８）为展开剂
展开，取出，晾干，喷５０ｇ·Ｌ－１ 三氯化铝乙醇液，氨气
薰蒸，日光下或置紫外灯（３６５ｎｍ）下检视。供试品色
谱与对照色谱在相应的位置上有相同的黄色或黄绿色
斑点。或吸取上述两种溶液各１．５μＬ，点于同一以０．
２５％的ＣＭＣ－Ｎａ为黏合剂的硅胶 Ｇ板上，以氯仿－甲
醇－甲酸（１８︰３︰０．８）为展开剂展开，取出，晾干，喷
５０ｇ·Ｌ－１ 三氯化铝乙醇液，氨气薰蒸，置日光下或紫外
灯（３６５ｎｍ）下检视。供试品色谱与对照色谱在相应的
位置上有相同的暗黄色或黄绿色斑点。
２．２　含量测定方法 　２．２．１　色谱条件：Ｌｉｃｈｒｏ－
ｓｐｅｒ　Ｃ１８ 色谱柱（２５０×４．６ｍｍ，５μｍ），柱温：３５℃，流
动相：乙腈－０．４％磷酸（２４：７６），流速：１ｍＬ·ｍｉｎ－１，检
测波长：３４８ｎｍ，进样量：１０μＬ。
２．２．２　对照品溶液的制备：精密称取木犀草素对
照品３．９３ｍｇ，加甲醇定容于２５ｍＬ量瓶中，制成每
１ｍＬ含０．１５７２ｍｇ的储备溶液。
２．２．３　供试品溶液的制备：取北败酱药材细粉约
２．０ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇
２５ｍＬ，称质量，超声处理４０ｍｉｎ，取出，放凉，称质量，
用甲醇溶液补足质量，过滤。精密吸取续滤液１０ｍＬ，
置圆底烧瓶中，精密加盐酸１ｍＬ，称质量，加热回流
２ｈ，放冷，称质量，用甲醇溶液补足重量，过滤，以０．
４５μｍ的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
２．２．４　分离效果：在上述色谱条件下，分别吸取
稀释１０倍的对照品储备液和样品溶液各１０μＬ，注入
高效液相色谱仪，记录色谱图，可见木犀草素分离效果
良好（见图）。
　高效液相色谱图　　Ａ　对照品；Ｂ　供试品；１　木犀草素
　　２．２．５　方法学考察：２．２．５．１　线性关系考察：精
密吸取稀释１０倍量后的木犀草素对照品储备溶液（０．
０１５７２ｍｇ·ｍＬ－１）２、４、６、８、１０、１２μＬ，注入液相色谱仪，
记录峰面积，以峰面积（Ａ）为纵坐标对进样量（μｇ）为
７７０１陕西中医２０１２年第３３卷第８期
横坐标进行线性回归，得回归方程：Ｙ＝２００００００　Ｘ＋
３９５０６，ｒ＝０．９９９５。结果表明：在０．０３１４～０．１８８６μｇ
范围内，对照品峰面积值与进样量呈良好的线性关系。
２．２．５．２　 样品处理之超声时间考察：分别称取
北败酱药材（２００９．０７．１６）约２．０ｇ，３份，超声处理分别
为：３０、４０和５０ｍｉｎ，其余按２．２．３方法和２．２．４方法
进行。结果表明：超声４０ｍｉｎ，药材中木犀草素的提取
量最大且随时间推移提取量不再增加，说明药材中的
木犀草素已提取完全，故确定之。
２．２．５．３　样品处理之盐酸用量考察：分别称取北
败酱药材（２００９．０７．１６）约２．０ｇ　３份，精密加盐酸分别
为１、２和４ｍＬ，其余按２．２．３方法和２．２．４方法进行。
结果表明：加入盐酸量１ｍＬ时，药材中木犀草素的提
取量最大且随酸度增加不再增加，故确定之。
２．２．５．４　精密度实验：精密吸取对照品溶液和供
试品（２００９．０７．１６）溶液各１０μＬ，重复进样６次，记录
峰面积，计算ＲＳＤ分别为１．８３％，０．５０％。对照品和
样品的精密度良好。
２．２．５．５　稳定性实验：精密称取北败酱药材
（２００９．０７．１６）约２．０ｇ，按２．２．３方法进行，即得供试
品溶液。分别在０、２、４、８、１２和２４ｈ，吸１０μＬ注入液
相色谱仪，记录峰面积，计算ＲＳＤ为０．３５％。表明供
试品溶液在２４ｈ内稳定性良好。
２．２．５．６　回收率实验：称取已知含量的北败酱
药材（含量０．０１６２９％）约１．０ｇ，６份，精密称取，均精
密加入木犀草素对照品溶液（Ｃ标＝０．１５７２ｍｇ·ｍＬ－１）
１ｍＬ，下按２．２．３方法和２．２．４方法进行。数据见表
１，结果表明：回收率在９５％ ～１０５％之间，平均回收率
为１０１．３２％，说明该方法测定系统响应性好。
　　　　　表１　　　　回收率实验结果 （Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔ）
实验
编号
样品量／ｇ
木犀草素
含量／ｍｇ
加入木犀草素对
照品的量／ｍｇ
测得量／ｍｇ 回收率／％
平均回收
率／％
１　 １．１１４９　 ０．１８１６　 ０．１５７２　 ０．３４５２　 １０４．０７
２　 １．２０１１　 ０．１９５７　 ０．１５７２　 ０．３４８８　 ９７．３９
３　 １．０８５５　 ０．１７６８　 ０．１５７２　 ０．３３８５　 １０２．８７
４　 １．０９２１　 ０．１７７９　 ０．１５７２　 ０．３４１２　 １０３．９１
５　 １．１５９８　 ０．１８８９　 ０．１５７２　 ０．３４３４　 ９８．２７
６　 １．１４６８　 ０．１８６８　 ０．１５７２　 ０．３４６１　 １０１．３３　 １０１．３１
　　２．２．５．７样品测定：分别精密称定不同来源的北
败酱药材２．０ｇ，共８份，下按２．２．３方法和２．２．４方法
进行，结果见表２。
表２　　不同来源的北败醬的含量测定结果
样品来源 样品量／ｇ 峰面积／Ａ
木犀草素的
含量／％
１陕西太白县 ２．００２７　 ４６１２６８　 ０．０２４７
２甘肃天水 １．９９９５　 ４５６８３２　 ０．０２４５
３西安万寿路 ２．０１５３　 ３４６２４１　 ０．０１８５
４陕西宝鸡市 ２．０１３７　 ５１５２６９　 ０．０２７５
５甘肃（０４０４１６－Ｙ） １．９８８７　 ５６８１０１　 ０．０３０７
６西安盛兴饮片厂 ２．０２４１　 ４２２５８４　 ０．０２４４
７华阴胜福中药饮片厂 ２．０１３５　 １６２９０４　 ０．００８７
８陕西省食品药品检验所 ２．０６１３　 １９７１８９　 ０．０１０３
　　３　讨　论　苣荬菜在东北用于虚弱咳嗽［１］，在河
南用于乙型肝炎［２］，大家在归经方面缺乏共识，有人认
为归肝、脾、大肠经［３－４］；在清湿热、消肿排脓和化瘀解
毒功效［５－６］上大家认识趋于一致，有人对化瘀排脓存
疑，认为用于产后瘀血腹痛效果不佳［７］。
从薄层分析实验看，苣荬菜中含有游离木犀草素，
也有木犀草素苷类，因此，酸解法测定木犀草素含量，
应为苷元和苷总含量，与文献报道［８－９］一致。
从样品含量测定结果结合药材性状，建议药材中
的木犀草素含量应规定在０．０１８％以上，否则为劣药，
当然与测定方法的精度有关。
参考文献
［１］　中国医学科学院药物研究所．中药志（４）［Ｍ］．北京：
人民卫生出版社，１９６１：７８．
［２］　张洪民，渠桂荣，吴立军，等．裂叶苣荬菜的研究进展
［Ｊ］．中草药，１９９７，２８（１１）：６９１－６９３．
［３］　孔增科，李利军，付正良，等．败酱草、北败醬的鉴别
与临床合理应用［Ｊ］．河北中医，２００９，３１（２）：２７０－２７１．
［４］　缪寿平．败酱草及其混淆品的区别［Ｊ］．海峡药学，
２００２，１４（６）：６０－６２．
［５］　辛智科，杨智峰．浅谈北败醬的药材来源及应用［Ｊ］．
陕西中医，２００６，２７（１２）：１５７２－１５７３．
［６］　冯锁民，鲁会侠，杨金玉，等．苣荬菜化学成分研究
［Ｊ］．西北药学杂志，１９９８，１３（３）：１０８．
［７］　陈淑欣，王海英．败酱草混用浅析［Ｊ］．实用中医药杂
志，２００４，２０（５）：２７５．
［８］　肖培根．新编中药志（３）［Ｍ］．北京：化学工业出版社，
２００２：５５－６１．
［９］　杨　亮，张亚峰，王立新，等．ＨＰＬＣ发测定北败酱中
木犀草素的含量［Ｊ］．陕西中医，２００８，２９（３）：３５４－３５５．
（收稿２０１２－０２－２８；修回２０１２－０３）
８７０１ 陕西中医２０１２年第３３卷第８期