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四季米仔兰叶挥发性成分的GC-MS分析



全 文 :米醇苷为对照品,对防风总色原酮含量进行测定,结
果足以表征防风总色原酮的含量。
用高效液相色谱法对随机抽取的部分样品进行
了色原酮含量测定,得到的结果与用本文方法测定
结果相比较,基本一致,说明本文所采用的苯酚-硫
酸法测定总色原酮含量可行,并且数据准确可靠,通
过对此方法的方法学验证也进一步证实了本方法线
性关系良好,且有较好的可信度和可行性。
从采收期的角度看,野生防风的色原酮含量 8
月高于 10 月,而栽培防风除长春和左家样品外,其
他样品中总色原酮含量均为 8 月较高,表明防风色
原酮的含量与采收期、产地等因素有关,这可能与各
产地的气候、土壤、降水和日照量等环境因素有关。
本文建立了一种新的色原酮含量测定方法,该
方法可操作性强、经济省时、稳定性好、所得数据可
靠,为防风总色原酮的含量测定提供了新的思路。
参 考 文 献
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四季米仔兰叶挥发性成分的 GC-MS分析
向卓文,罗源生* ,李梦云
(广东广弘药材有限公司,广东 广州 510080)
摘要 目的:分析四季米仔兰叶挥发性成分。方法:采用 GC-MS 法;GC 条件:石英毛细管色谱柱 HP5(5 mL,
30 m × 0. 25 mm ×0. 25 μL) ;程序升温:柱温 50 ℃,维持 1 min,以 15 ℃ /min升温至 120 ℃,维持 1 min,以 2 ℃ /min
升温至 240 ℃,维持 1 min,柱后温度为 270 ℃,维持 3 min;无分流;载气 He(流速 1. 0 mL /min) ;进样量:0. 2 μL;MS
条件:EI源(70 eV) ,接口温度 260 ℃,离子源温度 230 ℃,四级杆温度 150 ℃,检测电压 200 V,质谱扫描范围为m/z
1. 6 ~ 500,检索采用 NIST标准谱库。结果:共检测出 128 个成分峰,鉴定了其中 102 个,用面积归一化法确定了各
组分的相对百分含量。结论:四季米仔兰叶主要挥发性成分为愈创烯(44. 00%)、2,4-丙烯基-1-乙烯基环己烷孟酯
(11. 72%)、γ-榄香烯(7. 49%)、2,5,5-三甲基-1,3,6-庚三烯(6. 23%)、大根香叶烯 D(3. 67%) ,该研究为合理利用
其资源提供了依据。
关键词 四季米仔兰;挥发性成分;GC-MS分析;愈创烯
中图分类号:R284. 1 /R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)12-1969-06
收稿日期:2012-09-04
作者简介:向卓文(1958-) ,男,主管中药师,主要从事中药学研究;Tel:13902274172,E-mail:286730391@ qq. com。
* 通讯作者:罗源生,Tel:13902274192,E-mail:gdsycgs@ vip. 163. com。
四季米仔兰 Aglaia duperreana Pierre 是楝科米
兰属植物,产于亚洲南部,中国华南地区、越南、印
度、泰国、马来西亚均有分布。四季米仔兰叶,民间
用于治疗擦伤、眩晕和咳嗽。有研究表明,它对 TPA
诱导的 EB 病毒早期抗原激活有抑制作用〔1〕。此
外,四季米仔兰还是一种植物杀虫剂,对菜粉蝶、黄
曲条跳甲、美洲斑潜蝇等常见的蔬菜害虫具有较高
的杀虫活性〔2,3〕,一直是民间广泛应用的“土农药”。
笔者采用 GC-MS 法测定了四季米仔兰叶挥发性成
分,为合理利用其资源提供了依据。
1 实验部分
1. 1 材料 四季米仔兰叶采集于广东罗浮山,经
·9691·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 12 期 2012 年 12 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2012.12.029
广东广弘药材有限公司罗源生鉴定为楝科植物米仔
兰属四季米仔兰 Aglaia duperreana Pierre的叶。
1. 2 挥发油提取 称取四季米仔兰叶 200 g,按中
国药典 2010 版附录中挥发油提取法提取挥发油,得
油率为 0. 11%。
1. 3 仪器及分析条件 HP6890N 气相色谱仪:
Aglient 公司;5973 质谱检测器 MSD:Aglient 公司;
1683 系统自动进样器:Aglient 公司。GC 条件:石英
毛细管色谱柱 HP5(5 mL,30 m × 0. 25 mm × 0. 25
μL) ;程序升温:柱温 50 ℃,维持 1 min,以 15 ℃ /
min升温至 120 ℃,维持 1 min,以 2 ℃ /min 升温至
240 ℃,维持 1 min,柱后温度为 270 ℃,维持 3 min;
无分流;载气 He(流速 1. 0 mL /min) ;进样量:0. 2
μL;MS条件:EI源(70 eV) ,接口温度 260 ℃,离子
源温度 230 ℃,四级杆温度 150 ℃,检测电压 200
V,质谱扫描范围为 m/z1. 6 ~ 500,检索采用 NIST标
准谱库。
2 结果与讨论
图 1 为四季米仔兰叶挥发油总离子流图。采用
NIST质谱库进行检索,同时采用人工解析并查对有
关资料。四季米仔兰叶挥发油 GC-MS 分析,检测出
128 个成分峰,鉴定了其中 102 个,用面积归一化法
确定了各组分的相对百分含量,结果见表 1。在已
鉴定出的组分主要为酯、醇、烯、酮、酚、醛和烷烃等
化合物,其中烯类(56 种) ,相对含量占总量的
55. 34%;醇类(18 种)17. 48%;烷烃类(8 种)
7. 77%;酯类(7 种)6. 80%;酮类(3 种)2. 90%;其
他类(10 种)9. 71%。
图 1 四季米仔兰叶挥发油总离子流图
表 1 四季米仔兰叶挥发油化学成分
峰号 保留时间 /min 化学成分 含量 /%
1 2. 18 Alloaromadendrene 异香橙烯 0. 77
2 3. 04 Hexanal 正己醛 0. 03
3 3. 72 3-Hexen-1-ol,(Z)- (Z)-3-己烯-1 醇 0. 30
4 3. 87 1-Hexanol 1-己醇 0. 32
5 5. 84 3-Aminocrotononitrile 3-氨基丁烯腈 0. 12
6 5. 92 Acetic acid,hexyl ester 乙酸己酯 0. 02
7 6. 07 2-Methyl-2-bornene 2-甲基-2-莰烯 0. 01
8 6. 21 Bicyclo[4. 1. 0]heptane,3,7,7-trimethyl-,(1α,3α,6α)-(1α,3α,6α)-3,7,7-三甲基-二环[4. 1. 0]庚烷 0. 01
9 7. 16 Bicyclo[4. 1. 0]hept-2-ene,3,7,7-trimethyl- 3,7,7-三甲基-二环[4. 1. 0]庚-2-烯 0. 02
10 7. 30 1,6-Octadien-3-ol,3,7-dimethyl- 3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇 0. 10
11 7. 38 Nonanal 壬醛 0. 02
12 8. 96 Butanoic acid,3-hexenyl ester,(Z)- (Z)-丁酸-2-己烯酯 0. 01
13 12. 40 Humulen-(v1) 律草烯 0. 01
14 12. 66 Elemol 榄香醇 0. 63
15 12. 97 α-Cubebene α-荜澄茄油烯 0. 10
16 13. 45 (+)-Cycloisosativene (+)-环异构蒜头烯 0. 04
17 13. 57 Ylangene 衣兰烯 0. 05
18 13. 69 α-Cubebene α-荜澄茄油烯 1. 72
19 13. 83 未鉴定 0. 02
20 13. 94
Cyclobuta[1,2:3,4]dicyclopentene,decahydro-3a-methyl-6-methylene-1-(1-methyleth-
yl)-,[1S-(1α,3aα,3bβ,6aβ,6bα) ]- [1S-(1α,3aα,3bβ,6aβ,6bα) ]-3a-甲基-6-亚甲
基-1-异丙基-十氢-环丁[1,2:3,4]二环戊烯
0. 19
21 14. 10 β-Elemene β-榄香烯 1. 93
22 14. 17 Eudesma-4(14) ,11-diene 桉叶二烯 0. 08
23 14. 25 Guaiene 愈创烯 0. 03
·0791· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 12 期 2012 年 12 月
续表 1
峰号 保留时间 /min 化学成分 含量 /%
24 14. 40 β-Patchoulene β-绿叶烯 0. 02
25 14. 52 Junipene 桧烯 0. 08
26 14. 60 α-Gurjunene α-古芸烯 0. 10
27 14. 70 Di-epi-α-cedrene 双-外-α-雪松烯 0. 07
28 14. 87 Caryophyllene 石竹烯 0. 68
29 14. 99 Elixene 甘香烯 0. 17
30 15. 11 (+)-Epi-bicyclosesquiphellandrene (+)-外-双环倍半水芹烯 0. 17
31 15. 25 γ-Elemene γ-榄香烯 7. 49
32 15. 41 (+)-Aromadendrene (+)-香橙烯 0. 18
33 15. 48 未鉴定 0. 22
34 15. 65 β-Panasinsene β-人参烯 0. 52
35 15. 79 1,4,7,-Cycloundecatriene,1,5,9,9-tetramethyl-,Z,Z,Z-Z,Z,Z-1,5,9,9-四甲基-1,4,7,-环十一碳三烯 0. 38
36 15. 88 β-Selinene β-芹子烯 0. 18
37 15. 99 Alloaromadendrene 异香橙烯 0. 38
38 16. 14 β-Gurjunene β-古芸烯 0. 14
39 16. 39 τ-Muurolene τ-依兰烯 0. 50
40 16. 56 Germacrene D 大根香叶烯 D 3. 67
41 16. 68 β-Selinene β-芹子烯 0. 39
42 17. 00 1,3,6-Heptatriene,2,5,5-trimethyl- 2,5,5-三甲基-1,3,6-庚三烯 6. 23
43 17. 20 τ-Gurjunene τ-古芸烯 1. 12
44 17. 42 τ-Muurolene τ-依兰烯 0. 55
45 17. 52 Selina-3,7(11)-diene 蛇床二烯 0. 19
46 17. 66 δ-Cadinene δ-荜澄茄烯 1. 36
47 17. 93 8-Isopropenyl-1,5-dimethyl-cyclodeca-1,5-diene8-丙烯基-1,5-二甲基-芳癸并-1,5-二烯 0. 62
48 18. 01 β-Panasinsene β-人参烯 0. 98
49 18. 19 Selina-3,7(11)-diene 蛇床二烯 0. 89
50 18. 82 Guaiene 愈创烯 44. 00
51 18. 94 β-Maaliene β-马榄烯 0. 12
52 19. 17 (-)-Spathulenol (-)-匙叶桉油烯醇 0. 54
53 19. 26 1H-3a,7-Methanoazulene,octahydro-1,9,9-trimethyl-4-methylene-,(1α,3aα,7α,8aβ)-(1α,3aα,7α,8aβ) ]-1,9,9-三甲基-八氢-4-亚甲基-1H-3a,7-亚甲基芡 0. 02
54 19. 33 Globulol 蓝桉醇 0. 30
55 19. 42 τ-Muurolene τ-依兰烯 0. 06
56 19. 48 1,7,7-Trimethyl-2-vinylbicyclo[2. 2. 1]hept-2-ene1,7,7-三甲基-2-乙烯基双环[2. 2. 1]-2-庚烯 0. 08
57 19. 54 Ledol 喇叭醇 0. 20
58 19. 68 Eremophilene 雅槛蓝烯 0. 05
59 19. 85 Epiglobulol 外蓝桉醇 0. 17
60 20. 02 Diepicedrene-1-oxide 双外-1-氧化雪松烯 0. 17
61 20. 14 (+)-Ledene (+)-喇叭烯 0. 12
62 20. 29 (+)-Valencene (+)-巴伦西亚桔烯 0. 15
63 20. 36 未鉴定 0. 12
64 20. 42 (+)-Aromadendrene (+)-香橙烯 0. 04
65 20. 49 未鉴定 0. 34
·1791·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 12 期 2012 年 12 月
续表 1
峰号 保留时间 /min 化学成分 含量 /%
66 20. 61 Alloaromadendrene 香橙烯 0. 07
67 20. 76 未鉴定 0. 25
68 20. 84 . tau. -Cadinol τ-杜松醇 0. 71
69 20. 95 Copaene 烯 0. 31
70 21. 07 未鉴定 0. 11
71 21. 19 α-Cadinol α-杜松醇 0. 84
72 21. 32 Patchoulene 绿叶烯 0. 07
73 21. 49 α-Selinene α-芹子烯 0. 18
74 21. 63 Isoaromadendrene epoxide 环氧化异香橙烯 0. 16
75 21. 69 未鉴定 0. 05
76 21. 81 11,14-Octadecadiynoic acid,methyl ester 11,14-十八碳二炔酸甲酯 0. 14
77 21. 96 未鉴定 0. 13
78 22. 07 未鉴定 0. 10
79 22. 30 1H-Cyclopropa[a]naphthalene,1a,2,3,3a,4,5,6,7b-1,1,3a,7-tetramethyl-1,1,3a,7-四甲基-1a,2,3,3a,4,5,6,7b-八氢-1H-环丙[a]萘 0. 31
80 22. 46 未鉴定 0. 07
81 22. 65 未鉴定 0. 43
82 22. 75 2,5-di-tert-Butyl-1,4-benzoquinone 2,5-二叔丁基-1,4-苯醌 0. 08
83 22. 85 7R,8R-8-Hydroxy-4-isopropylidene-7-methylbicyclo[5. 3. 1]undec-1-ene7R,8R-8-羟基-4-异亚丙烯基-7-甲基双环[5. 3. 1]十一碳-1-烯 0. 36
84 23. 11 未鉴定 0. 16
85 23. 39 未鉴定 0. 12
86 23. 49 未鉴定 0. 13
87 23. 72 未鉴定 0. 05
88 23. 81 未鉴定 0. 06
89 23. 97 未鉴定 0. 05
90 24. 09 7R,8R-8-Hydroxy-4-isopropylidene-7-methylbicyclo[5. 3. 1]undec-1-ene7R,8R-8-羟基-4-异亚丙烯基-7-甲基双环[5. 3. 1]十一碳-1-烯 0. 19
91 24. 15 7R,8R-8-Hydroxy-4-isopropylidene-7-methylbicyclo[5. 3. 1]undec-1-ene7R,8R-8-羟基-4-异亚丙烯基-7-甲基双环[5. 3. 1]十一碳-1-烯 0. 41
92 24. 56 未鉴定 0. 08
93 24. 79 未鉴定 0. 10
94 24. 91 未鉴定 0. 04
95 25. 22 2,2,7,7-Tetramethyltricyclo[6. 2. 1. 0(1,6) ]undec-4-en-3-one2,2,7,7-四甲基三环[6. 2. 1. 0(1,6) ]十一碳-4-烯-3-酮 0. 05
96 25. 74 未鉴定 0. 05
97 25. 91 Cyclohexane,1,1,2-trimethyl-3,5-bis(1-methylethenyl)-,(2α,3β,5β)-(2α,3β,5β)-1,1,2-三甲基-3,5-双(1-甲基乙烯基)-环己烷 0. 05
98 26. 04 2-Pentadecanone,6,10,14-trimethyl- 6,10,14-三甲基-2-十五酮 0. 09
99 26. 63 1,2-Benzenedicarboxylic acid,bis(2-methylpropyl)ester 邻苯二甲酸二异丁酯 0. 12
100 27. 04 4-[3-Ethoxypropylamino]benzo-1,2,3-triazine4-[3-乙氧基丙基氨]苯并-1,2,3-三连氮 0. 03
101 27. 17 Cyclolongifolene oxide,dehydro- 去氢环长叶松萜烯氧化物 0. 05
102 27. 30 未鉴定 0. 04
103 27. 76 Cycloheptane,4-methylene-1-methyl-2-(2-methyl-1-propen-1-yl)-1-vinyl-4-亚甲基-1-甲基-2-(2-甲基-1-丙烯-1-基)-1-乙烯基-环庚烷 0. 24
104 27. 87 Oxirane,heptadecyl- 十七基-环氧乙烷 0. 12
105 28. 23 (-)-Caryophyllene-(Ⅱ) (-)-石竹烯-(Ⅱ) 0. 07
·2791· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 12 期 2012 年 12 月
续表 1
峰号 保留时间 /min 化学成分 含量 /%
106 29. 04 2,4-Dissopropenyl-menthyl-1-Vinylcyclohexane 2,4-丙烯基-1-乙烯基环己烷孟酯 11. 72
107 29. 14 Cholestane,3,5-dichloro-6-nitro-,(3β,5α,6β)- (3β,5α,6β)-3,5-二氯-6-硝基-胆甾醇 0. 03
108 29. 22 Thunbergol 黑松醇 0. 04
109 30. 50 1,6,10-Dodecatrien-3-ol,3,7,11-trimethyl-,[S-(Z) ]-[S-(Z) ]-3,7,11-三甲基-1,6,10-十二碳三烯-3-醇 0. 05
110 31. 04 Thunbergol 黑松醇 0. 07
111 31. 24 Bicyclo[5. 2. 0]nonane,4-methylene-2,8,8-trimethyl-2-vinyl-4-亚甲基-2,8,8-三甲基-2-乙烯基-双环[5. 2. 0]壬烷 0. 02
112 31. 72 Methyl 7,9-tridecadienyl ether 甲基-7,9-十三烷二烯基乙醚 0. 01
113 31. 99 13,15-Octacosadiyne 13,15-二十八碳二炔 0. 07
114 32. 11 Octadecane,1-chloro- 1-氯-十八烷 0. 02
115 32. 22 5α-Hydroxy-4α,8,10,11-tetramethyltricyclo[6. 3. 0. 0(2,4) ]undec-10-ene5α-羟基-4α,8,10,11--四甲基三环[6. 3. 0. 0(2,4) ]十一碳-10-烯 0. 06
116 32. 40 Phytol 植醇 0. 44
117 32. 62 Z,Z-4,16-Octadecadien-1-ol acetate Z,Z-4,16-十八碳二烯-1-醇 醋酸酯 0. 02
118 32. 81
1-Naphthalenepropanol,-ethenyldecahydro-5-(hydroxymethyl)-α,5,8a-trimethyl-2-methyl-
ene-,[1S-[1α(R* ) ,4aβ,5α,8aα]]- [1S-[1α(R* ) ,4aβ.,5β,8aα]]-α-乙烯基十
氢-5-羟甲基-α,5,8a-三甲基-2-亚甲基-1-萘戊醇
0. 04
119 33. 08 1-Isopropenyl-3-propenylcyclopentane 1-异丙烯基-3-丙烯基环戊烷 0. 07
120 33. 17 β-Elemene β-榄香烯 0. 04
121 33. 31 C(14a)-Homo-27-nor-14β-gammaceran-3α-olC(14a)-同型-27-去甲-14β-gammaceran-3α-醇 0. 03
122 33. 46 4-Ethenylhexahydro-4,7a-dimethyl-2(3H)-benzofuranone,[3ar
* -(3a α,4α,7aβ) ]-
[3ar* -(3a α,4α,7aβ) ]-4-乙烯基己氢-4,7a-二甲基-2(3H)-苯呋喃酮 0. 06
123 33. 69 未鉴定 0. 03
124 34. 14 Hexadeca-2,6,10,14-tetraen-1-ol,3,7,11,16-tetramethyl-,(E,E,E)-(E,E,E)-3,7,11,16-四甲基-十四碳-2,6,10,14-四烯-1-醇 0. 09
125 36. 36 未鉴定 0. 02
126 36. 52 9,12,15-Octadecatrienoic acid,ethyl ester,(Z,Z,Z)-(Z,Z,Z)-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯 0. 12
127 38. 10 未鉴定 0. 01
128 40. 49 Octadecane 十八烷 0. 01
实验结果表明,四季米仔兰叶挥发油中含有石
竹烯、δ-毕澄茄油烯、烯、β-榄香烯、δ-榄香烯、α-榄香
烯、γ-榄香烯、杜松醇、α-法尼烯、愈创烯、大根香叶
烯 D、芹子烯、β-荜澄茄烯和依兰烯等。石竹烯具有
抑菌杀菌的作用,能与真菌细胞膜产生不可逆的结
合,在膜上形成微孔,从而改变真菌细胞膜的渗透
性,使细胞内的钾离子和其他低分子量物质,如葡萄
糖、氨基酸等渗漏,从而破坏真菌正常代谢并抑制其
生长〔4〕。除此以外,石竹烯还能平喘、镇咳、消炎,
可做局部麻醉剂〔5,6〕。愈创烯对绿脓杆菌等对创伤
性损伤危害严重的细菌抗菌活性比较强,在植物已
受伤的部位,如皮、叶的分布较为集中,国外有研究
认为它有恢复受伤的作用〔7〕。α-杜松醇有对抗虐原
虫的作用〔8〕;对白蚁有天然的免疫,富含 α-杜松醇
的植物可以使其自身免受白蚁的侵害〔9〕;还可以完
全抑制真菌的生长,在所有的荜澄茄烯骨架化合物
中,其抑真菌能力是最强的〔10〕。庞雄飞院士等人的
研究也表明,石竹烯、依兰烯、大根香叶烯、烯都是植
物对昆虫、细菌、真菌和邻近植物的抗御物质,称之
为“萜类云”〔11〕。此外,古芸烯、芹子烯、荜澄茄油烯
等都具有一定的抗菌功能,四季米仔兰特有的水芹
烯也是一种具有生物活性的天然杀虫剂〔12,13〕。本
研究为合理利用四季米仔兰的资源提供了依据。
参 考 文 献
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收稿日期:2012-02-29
基金项目:国家“十一五”科技支撑计划重点项目(2008BAI53B09)
·药理·
地肤子“杀虫止痒”外用功能规范研究
王建农,刘青云,姚春海,陈少君,宋丽艳,关 频,邵立军,佘远遥,迟慧彦
(中国中医科学院西苑医院,北京 100091)
摘要 目的:规范地肤子“杀虫止痒”外用功能。方法:采用组织胺致豚鼠瘙痒模型、小鼠瘙痒模型、豚鼠卵清
蛋白(OVA)湿疹模型、体外对相关致病菌的抑制作用等药理实验,观察致痒阈、模型症状、组织病理等相关指标,以
及体外抑制常见皮肤真菌生长情况,验证地肤子外用功能。结果:与阴性对照组比较,地肤子水提液高、中、低剂量
均能显著提高磷酸组织胺致豚鼠搔痒模型的瘙痒阈(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ;与模型组比较,给药 1 w 和 2 w 期间,
显著减轻 OVA豚鼠湿疹模型的红斑(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ;与空白对照组比较,地肤子水提液显著减少右旋糖酐
致小鼠瘙痒模型 30 min内的瘙痒次数,减少 30 min内的总瘙痒时间(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ;地肤子水提液对常见
的皮肤真菌具有显著抑制生长的作用,对须癣毛癣菌最小抑菌浓度(MIC)为 3. 12%,红色毛癣菌、犬小孢子菌、紫
色毛癣菌和许兰氏毛癣菌的 MIC值均为 0. 78%。结论:地肤子具有“杀虫止痒”外用功能。
关键词 中医外治;地肤子;杀虫止痒
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)12-1974-04
Normative Research on Bacteriostasis and Relieving Itching External
Therapeutic Function of Kochiae Fructus
WANG Jian-nong,LIU Qing-yun,YAO Chun-hai,CHEN Shao-jun,
SONG Li-yan,GUAN Pin,SHAO Li-jun,SHE Yuan-yao,CHI Hui-yan
(Xiyuan Hospital,China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100091,China)
Abstract Objective:To normalize bacteriostasis and relieving itching external therapeutic function of Kochiae Fructus. Methods:
Itching guinea pig model caused by histamine,itching mice model,eczema guinea pig model caused by OVA,and inhibitory effect on
pathogens in vitro were used to observe the itching threshold,symptoms and other related physiological index,as well as the inhibitory
effect on the normal skin fungi by water extraction of Kochiae Fructus to evaluate the external therapeutic function of Kochiae
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