全 文 ：参考文献:
[ 1] 　江苏新医学院.中药大辞典(上册)[M] .上海:上海人民出版
社 , 1986:1100-1102.
[ 2] 　井山林 ,袁铸人 , 彭国平.杏贝止咳颗粒中苦杏仁苷的 HPLC
测定 [ J] .中国医药工业杂志 , 2003, 35(2):105.
[ 3] 　甑　攀.麻杏止咳片中苦杏仁苷的 HPLC分析 [ J].中成药 ,
2003, 25(2):115.
紫丹银屑胶囊质量标准研究
王晓飞 , 　金向群＊ , 　孙明谦 , 　代春红 , 　随志刚 , 　肖　锋
(吉林大学药学院 ,吉林 长春 130021)
收稿日期:2006-10-12
作者简介:王晓飞(1982～ ),男 , 硕士研究生 ,主要从事中药剂型研究。
＊通讯作者:金向群 ,电话:0431-85619662, E-mail:jinxq@jlu.edu.cn。
关键词:紫丹银屑胶囊;TLC;HPLC;大黄酚
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2007)12-1872-03
　　紫丹银屑胶囊为部颁标准收载药物 , 收载号 WS-10286
(ZD-0286)-2002, 由紫硇砂 、决明子 、附子(制)、干姜 、桂枝 、
白术 、白芍 、黄芪 、丹参 、降香等中药组成 , 养血祛风 , 润燥止
痒 , 用于治疗血虚风燥所致的银屑病。紫丹银屑胶囊中决明
子为方中君药 , 主要有效成分为大黄酚 、大黄素 ,两者具有相
关性。在紫丹银屑胶囊的国家试行标准中大黄酚的含量采
用薄层扫描法测定 , 准确性与重现性都较差 , 我们采用高效
液相法测定大黄酚的含量 , 经方法学考察表明:该含量测定
方法操作简单 , 重现性好 ,精确度高。 同时在试行标准基础
上增加了白芍 、白术的薄层鉴别 , 对原标准中黄芪的薄层鉴
别方法进行了改进。
1　实验材料
1.1　仪器　岛津 LC-10AT高效液相色谱仪;岛津 SPD-10A
紫外检测器;2010双通道色谱工作站;KQ-250D数控超声波
清洗器。
1.2　试药　大黄酚 、大黄素 、黄芪甲苷 、芍药苷对照品均购
自中国药品生物制品检定所;D101大孔树脂购自天津农药股
份公司树脂公司;高效液相用甲醇为色谱纯 , 其余试剂均为
分析纯 , 水为重蒸馏水。
2　鉴别实验
2.1　决明子的鉴别　取本品 15粒内容物 , 研细 ,取 5 g, 精
密称定 , 加甲醇 40 mL, 超声处理 1h,放冷滤过 , 用 10 mL甲
醇洗涤滤渣 , 并入滤液中 ,蒸干 ,残渣加水 20 mL使溶解 , 再
加硫酸 1 mL, 加氯仿 20 mL, 加热回流 30 min, 冷却 , 分取氯
仿液 、酸液 ,用氯仿提取 3次 , 每次 10mL,合并氯仿液 , 以无
水硫酸钠脱水 , 蒸干 ,残渣加少量甲醇微热使溶解 ,转移至 5
mL量瓶中 , 加甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 用微孔滤膜(0.45
μm)滤过 ,取续滤液 ,作为供试品溶液;取缺决明子的药粉同
法制成阴性样品溶液。取大黄素 , 大黄酚对照品 , 分别加甲
醇制成每 1mL中含 1 mg的溶液 , 作为对照品溶液。吸取上
述的供试品溶液与上述对照品溶液各 5 μL, 分别点于同一
硅胶 G薄层板上 , 以石油醚(30 ～ 60 ℃)-甲酸乙酯-甲酸(15
∶5∶1)的上层溶液为展开剂 , 展开 , 取出晾干 , 置紫外光灯
(365nm)下检视。供试品色谱中 , 在与对照品色谱相应的
位置上 ,显相同的橙色荧光斑点。
2.2　黄芪的鉴别　取本品 20粒内容物 , 研细 , 加甲醇 30
mL, 超声提取 1h,滤过 , 滤液加于已处理好的 D101大孔树脂
柱(30 g,内径 15mm)用水 200mL冲洗。再用 20 乙醇 200
mL洗脱 , 收集洗脱液 , 蒸干 , 残渣加甲醇 1 mL使溶解 , 作为
供试品溶液;取缺黄芪的药粉同法制成阴性样品溶液。另取
黄芪甲苷对照品 ,加甲醇制成每 1 mL含 1 mg的溶液 , 作为
对照品溶液。吸取上述两种溶液各 10 μL,分别点于同一高
效硅胶 C薄层板上 ,以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液
为展开剂 , 展开 , 取出晾干 , 喷以 10 硫酸乙醇溶液 , 在 105
℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中 , 在与对照品色谱相
应的位置上 ,显相同颜色的斑点。
2.3　白芍的鉴别　取本品 10粒内容物 , 研细 , 加水 50 mL,
振摇 5min,使之溶解 , 滤过 , 滤液加于已处理好的 D
101
大孔
树脂柱(30 g, 内径 15mm), 用水 200 mL冲洗。再用 20 乙
醇 200 mL洗脱 ,收集洗脱液 , 蒸干 ,残渣溶于 10mL水 , 正丁
醇萃取 3次 ,每次 5 mL, 合并正丁醇液 , 蒸干 , 残渣加甲醇 1
mL使溶解 , 作为供试品溶液;取缺白芍的药粉同法制成阴性
样品溶液。另取芍药苷对照品 , 加乙醇制成每 1 mL含 1 mg
溶液 ,作为对照品溶液。 吸取上述两种溶液各 10 μL, 分别
点于同一硅胶 G薄层板上 ,以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(40
∶5∶10∶0.2)为展开剂 ,展开 , 取出 , 晾干 , 喷以 5 香草醛
硫酸溶液 ,加热至斑点显色清晰。供试品色谱中 , 在与对照
品色谱相应的位置上 ,显相同的蓝紫色斑点。
1872
2007年 12月
第 29卷　第 12期
中 成 药
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December2007
Vol.29　No.12
2.4　白术的鉴别　取本品 4粒内容物 ,研细 , 取 1 g,加正己
烷 4 mL, 超声处理 20 min, 滤过 , 滤液作为供试品溶液。另
取白术对照品药材 1 g, 同法制成对照品药材溶液;取缺白术
的药粉同法制成阴性样品溶液。吸取上述新制备的两种溶
液各 10μL, 分别点于同一硅胶 G薄层板上 , 以石油醚(60-
90℃)-醋酸乙酯(50∶ 1)为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾干 , 喷以
5 香草醛硫酸溶液 ,加热至斑点显色清晰。供试品色谱中 ,
在与对照药材色谱相应的位置上 ,显相同的红色斑点。
3　含量测定
3.1　色谱条件　色谱柱:DiamonsilC18(250mm×4.6 mm, 5
μm);流动相∶甲醇 -0.1 磷酸(85∶ 15);流速:0.8 mL/
min;柱温:室温;检测波长:270 nm。
3.2　供试品溶液的制备　按 [ 2.1]项下供试品溶液制备方
法制备。
3.3　阴性样品溶液的制备　取缺决明子的样品 , 按 [ 2.1]
项下供试品溶液制备方法制备。
3.4　对照品溶液的制备　精密称取大黄酚对照品适量 , 加
甲醇制成每 1 mL含 0.12 mg的溶液 ,即得。
3.5　大黄酚线性范围的考察　精密称取大黄酚对照品适
量 , 加甲醇制成每 1mL含 0.095 0mg的溶液 ,精密吸取此溶
液各 2, 4, 6, 8, 10 μL分别注入液相色谱仪 , 测定 ,见图 1 ～ 3。
以大黄酚进样量(μg)为横坐标(X), 峰面积为纵坐标(Y),
绘制标准曲线图。 回归方程为 Y=1 391 206.84X+
96 286.46, r=0.999 2,结果表明大黄酚进样量在 0.190 0 ～
0.950 0 μg之间 , 进样量与峰面积值呈良好的线性关系。
图 1　大黄酚对照品色谱图
1.大黄酚
图 2　供试品色谱图
1.大黄酚
图 3　阴性样品色谱图
3.6　精密度试验　取同一供试品溶液 ,重复进样 6次 , 每次
进样 10 μL, 峰面积分别为 3 896 192.1、 3 860 733.7、
3 878 463.8、3 871 628.8、 3 871 698.9、 3 868 709.1, RSD=
0.31 ,精密度良好。
3.7　稳定性实验　分别取放置 2, 4, 6, 12, 16, 24h的供试品
溶液 10 μL, 峰面积分别为 3 264 158.0, 3 256 911.3,
3 237 831.3, 3 207 761.1, 3 237 831.3, 3 223 023.0, RSD=
0.64 ,表明供试品溶液至少在 24 h内稳定。
3.8　重复性实验　取同一批号的紫丹银屑胶囊 6份 ,精密
称定 , 按 [ 2.1]项下供试品溶液制备方法制备 , 制成 6个供
试液 , 每次进样 10 μL, 测得样品含量(mg/g)为 0.082 0、
0.079 2、0.081 2、 0.076 6、 0.079 6、 0.077 4, RSD=2.64 ,
重现性良好。
3.9　加样回收率实验　精密称取大黄酚对照品适量 ,加入
到已知大黄酚含量的紫丹银屑胶囊中 ,按 [ 2.1]项下供试品
溶液制备方法操作 , 制备供试品溶液 , 测定紫丹银屑胶囊中
大黄酚的含量 , 计算回收率 ,测定结果见表 1。
表 1　 回收率测定结果
取样量
/g
样品中大黄
酚含量 /mg
对照品加
入量 /mg
测得总量
/mg
回收率
/
平均回收
率 /
RSD
/
4.928 0 0.391 3 0.114 0.503 0 98
4.950 1 0.393 0 0.114 0.505 9 99
3.537 0 0.280 8 0.228 0.502 0 97
99.33 1.87
3.453 7 0.274 2 0.228 0.504 5 101
0.502 3 0.039 9 0.456 0.505 0 102
0.687 2 0.054 6 0.456 0.506 0 99
3.10　样品测定　按 [ 2.1]项下供试品溶液制备方法操作 ,
制备供试品溶液 ,测定 10批紫丹银屑胶囊(吉林吉春制药有
限公司提供)中大黄酚的含量 , 测定结果见表 2。
表 2　 紫丹银屑胶囊中大黄酚的含量测定结果
批号 大黄酚的含量 /mg/粒
1 0.040 5
2 0.039 3
3 0.040 2
4 0.039 5
5 0.039 4
6 0.040 0
7 0.039 6
8 0.039 8
9 0.040 3
10 0.040 1
平均值 0.039 9
RSD/ 1.03
　　紫丹银屑胶囊中大黄酚含量基本稳定 , 故在平均含量的
基础上 ,总含量上浮及下浮 20 制定本制剂含量限度 , 限定
本品大黄酚的含量不得低于 0.006 4 ,即每粒胶囊中大黄
酚的含量不得低于 0.03 mg。
4　讨论
在紫丹银屑胶囊的试行标准中 , 对决明子 、黄芪进行了
薄层鉴别 ,用薄层扫描法对大黄酚进行含量测定。试行标准
中黄芪的鉴别方法与黄芪药材的药典鉴别方法相同 , 我们在
实际工作中发现用原方法在本制剂中由于其他成分的干扰
致使黄芪无法鉴别 ,增加对白芍的薄层鉴别时遇到了同样的
问题 ,对此我们尝试了几种方法 ,最后发现对样品提取后 , 提
1附
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第 29卷　第 12期
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取物上大孔树脂柱 , 用不同浓度乙醇洗脱可消除干扰 ,说明
处方复杂的制剂中药材的薄层鉴别 ,用大孔树脂柱分离是一
种简单 、可行的方法 ,值得推广。薄层扫描法重现性差 , 准确
率低 , 制定的大黄酚标准偏低(0.01 mg/粒), 用高效液相色
谱法测定后制定标准为大黄酚的含量不低于 0.03 mg/粒。
参考文献:
[ 1] 　中国药典 2000年版一部 [ S] .2000:257.
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社 , 1990:100-208.
HPLC鉴别含有陈皮枳壳复方中的枳壳药材
代云桃 , 　郭小青 , 　秦雪梅＊ , 　张丽增
(山西大学化学化工学院药学系 ,山西 太原 030006)
收稿日期:2006-10-13
作者简介:代云桃(1981～ ),女 ,硕士研究生 ,电话:13835193924, E-mail:2001295004@sxu.edu.cn。
＊通讯作者:秦雪梅(1964～ ),女 ,教授 ,从事生药质量标准及中医药代谢组学研究 ,电话:0351-7011202, E-mail:qinxm@sxu.edu.cn。
关键词:HPLC;柚皮苷;橙皮苷;枳壳;陈皮
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2007)12-附 2-03
　　中药陈皮 、枳壳为临床常用药对 , 陈皮性温 、枳壳微寒 ,
二者结合使用一定程度上能克服温燥伤阴之弊 , 且行气 、祛
痰之功效增强。常用于温阳 、食积导致的脾胃气滞 、脘腹胀
满 、恶心呕吐等方剂中 ,如:木香通气丸 、调肝和胃丸 、泻痢消
片 [ 2]等。陈皮和枳壳来源于同科不同种的不同药用部位 ,均
含有丰富的黄酮类化合物 ,陈皮主要含有橙皮苷 、新橙皮苷 ,
枳壳主要含柚皮苷 、新橙皮苷及少量的橙皮苷 , 且上述黄酮
类化合物结构非常相似 [ 3] (见图 1)。现有文献报道方法及
2005版中国药典 , 对同时含有陈皮 、枳壳复方大多采用 TLC
法以橙皮苷为对照品鉴别陈皮 , 由于枳壳中也含有橙皮苷 ,
而且经反复试验发现同时含有的柚皮苷在 TLC图谱上的 Rf
值与橙皮苷极相近 , 从而干扰陈皮的鉴别。因此对于同时含
有陈皮 、枳壳的复方 , 是否可以采用分离度更高的 HPLC方
法 , 以柚皮苷为对照品来鉴别枳壳药材 , 本实验以复方百部
止咳胶囊为代表 , 对此问题进行了探讨。
柚皮苷:R1 =H　R2 =OH　R3 =Glu 2-1— rha
橙皮苷:R1 =OH　R2 =OMe　R3 =Glu 6-1— rha
图 1　柚皮苷 、陈皮苷化学结构式
1　仪器与试药
　　Waters高效液相色谱仪 , Breeze工作站;2487紫外检测
器;HypersilODS2:C18柱(5 μm, 250 mm×4.6 mm);Diamonsil
C18柱(5 μm, 200 mm×4.6 mm);柚皮苷 、橙皮苷对照品 , 陈
皮 、枳壳对照药材(中国药品生物制品检定所提供), 复方百
部止咳胶囊(市售);11批陈皮药材(市售);硅胶 G(青岛海
洋化工厂生产);甲醇为色谱纯 , 水为重蒸水 , 其它试剂均为
分析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙
腈 -0.3 的磷酸溶液 [ ]梯度洗脱 见表 , 为检测波
长。
表 　 流动相梯度表
时间 /min 流动相A/ 流动相 B/
0 ～ 10 20 80
10 ～ 55 20→ 50 80→50
55 ～ 65 50 50
2.2　样品的制备
2.2.1　对照品溶液的配制　取柚皮苷 、橙皮苷对照品 , 分别
加甲醇制成每 1 mL含 60 μg, 60 μg的溶液 , 作为对照品溶
液。
2.2.2　对照药材溶液的制备　分别取陈皮 、枳壳对照药材
粉末各 1g,分别加甲醇 25 mL, 超声处理 30min,滤过 ,取滤
液作为对照药材溶液 [ 5] 。
2.2.3　供试品溶液的制备　取复方百部止咳胶囊 10粒 ,去
壳 ,研细 , 称取 3g,加甲醇 50 mL, 超声处理 30 min,滤过 ,取
滤液作为供试品溶液。
2.2.4　阴性样品溶液的制备　取不含有陈皮的阴性样品粉
末 3g,加甲醇 50 mL, 超声处理 , 30 min, 滤过 ,取滤液作为不
含陈皮的阴性对照溶液。 取不含有枳壳的阴性样品粉末 3
g,同法制成不含枳壳的阴性对照溶液。
2.3　实验方法
2附
2007年 12月
第 29卷　第 12期
中 成 药
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December2007
Vol.29　No.12