全 文 ：第 19 期
第 52 卷第 19期
2013 年 10 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 52 No.19
Oct．，2013
收稿日期：2012－07－03
基金项目：湖北理工学院院级重点科研项目（12XJZ16A）
作者简介：康 薇（1983－），女，湖北荆门人，讲师，博士在读，主要研究方向为应用生物技术，（电话）15072077233（电子信箱）
kweismile0312＠126．com。
参薯（Dioscorea alata Linn．）又名大薯，是薯蓣
科薯蓣属多年生藤质草本植物，其块茎富含淀粉和
粗蛋白，可作粮食和蔬菜食用，并可制取淀粉和供
药用［1，2］。医圣李时珍故里湖北省蕲春县具有悠久的
山药种植历史，是鄂东名产“蕲山药”的原产地［3］。在
蕲春县北部檀林镇檀林村和青石镇太平村、界岭村
等地的低山丘陵区， 自然散生着大量的野生参薯，
其叶片宽大、茎蔓粗壮、块茎肥大、抗逆性强，具有
一般栽培山药所无法比拟的农艺性状，潜在的育种
价值较大［4，5］。 本研究采用植物组织培养技术，考察
了 NAA 和 6－BA 对野生参薯愈伤组织诱导和不定
芽分化、生根的影响，实现野生参薯的植株再生，为
下一步人工驯化野生参薯和利用野生参薯种质资
源进行杂交育种提供理论依据。
1 材料与方法
1．1 材料
野生参薯采自蕲春县檀林村，组织培养用生化
试剂均购自上海稼丰园艺有限公司。
1．2 外植体的制备
12 月上旬，挖取野生参薯块茎置于室内通风处
晾放 1 周后，放入干燥、阴凉地方贮藏至第二年春
季，将块茎取出盆栽，等蔓茎长成后，用剪刀选取长
约 1～2 cm 的带节茎段， 先用自来水冲洗 30 min，接
NAA和 6－BA对野生参薯愈伤组织诱导和不定芽
分化、生根的影响
康 薇，郑 进
（湖北理工学院，湖北 黄石 425003）
摘要：考察了 NAA 和 6－BA 对野生参薯（Dioscorea alata Linn．）愈伤组织诱导和不定芽分化、生根的影
响。 结果表明，愈伤组织诱导的最适培养基为 MS ＋ 1．0 mg ／ L 6－BA ＋ 0．2 mg ／ L NAA ＋ 30 g ／ L 蔗糖＋ 6．0 g ／ L
琼脂；愈伤组织分化不定芽的最适培养基为 MS ＋ 0．5 mg ／ L 6－BA ＋ 0．1 mg ／ L NAA ＋ 30 g ／ L 蔗糖＋ 6．0 g ／ L
琼脂；不定芽生根的最适培养基为 MS ＋ 0．01 mg ／ L 6 －BA ＋ 0．3 mg ／ L NAA ＋ 30 g ／ L 蔗糖＋6．0 g ／ L 琼脂。生
根试管苗在室温下炼苗 7～10 d 后，开瓶炼苗 2～3 d， 移栽成活率在 95％以上。
关键词：野生参薯（Dioscorea alata Linn．）；愈伤组织；不定芽；生根；蕲春县
中图分类号：Q943．1 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2013）19－4809-03
Effect of NAA and 6－BA on Wild Dioscorea alata Callus Induction and Adventitious
Bud Differentiation and Rooting
KANG Wei，ZHENG Jin
（Hubei Polytechnic University，Huangshi 425003，Hubei，China）
Abstract： The effects of 6－BA and NAA on callus induction，adventitious bud differentiation and rooting of wild Dioscorea
alata Linn． were exzamined． The results showed that the best medium for callus induction was MS＋1．0 mg ／ L 6－BA＋0．2 mg ／ L
NAA＋30 g ／ L sucrose＋ 6．0 g ／ L agar． The best medium for buds differentation was MS＋0．5 mg ／ L 6－BA＋0．1 mg ／ L NAA＋30 g ／ L
sucrose ＋ 6．0 g ／ L agar． The best rooting medium was MS＋0．01 mg ／ L 6－BA＋0．3 mg ／ L NAA＋30 g ／ L sucrose＋6．0 g ／ L agar． The
survival rate of transplanting was over 95％ after exercising seedling in ambient temperature for 7～10 days and off closure for
2～3 days．
Key words： wild Dioscorea alata Linn．； callus； buds； rooting； Qichun county
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2013.19.060
湖 北 农 业 科 学 2013 年
表 1 不同浓度的 6-BA 和 NAA 对野生参薯愈伤
组织的诱导效果
处理
1
2
3
4
5
6
7
8
9
6-BA
mg/L
2.0
2.0
2.0
1.5
1.5
1.5
1.0
1.0
1.0
NAA
mg/L
0.3
0.2
0.1
0.3
0.2
0.1
0.3
0.2
0.1
愈伤组织
诱导率//%
0
26.7
20.0
16.7
73.3
26.7
53.3
86.7
83.3
接种外植体
个
30
30
30
30
30
30
30
30
30
诱导愈伤
外植体//个
0
8
6
5
22
8
16
26
25
表 2 不同浓度的 NAA 和 6-BA 对野生参薯愈伤组织分化不定芽的影响
处理
1
2
3
4
5
6
7
8
9
NAA//mg/L
0.2
0.2
0.2
0.1
0.1
0.1
0.05
0.05
0.05
6-BA//mg/L
1.0
0.5
0.1
1.0
0.5
0.1
1.0
0.5
0.1
接种外植体//个
30
30
30
30
30
30
30
30
30
分化外植体//个
25
28
27
22
30
21
24
24
17
不定芽分化率//%
83.33
93.33
90.00
73.33
100
70.00
80.00
80.00
56.67
不定芽//个
93
115
114
123
136
88
103
92
76
单个外植体分化有效芽//个
3.10
3.83
3.80
4.10
4.53
2.93
3.43
3.07
2.53
着用 75％的无水乙醇处理 15 s， 然后用 2％的次氯
酸钠溶液处理 10 min， 再用无菌水洗涤 4～5 次后，
最后置于无菌滤纸上吸干水分备用。
1．3 NAA 和 6－BA 对野生参薯愈伤组织诱导的影
响
以 MS＋30 g ／ L 蔗糖＋6.0 g ／ L 琼脂为基本培养基
（pH 6．0），用 NAA（0．1、0．2、0．3 mg ／ L）和 6－BA（1．0、
1．5、2．0 mg ／ L）进行配比试验，筛选野生参薯愈伤组
织诱导的最适培养基。温度 25 ℃、光照时间 14 h ／ d、
光照度 3 000 lx（下同），每个处理接种 10个外植体，
重复 3 次，接种 20 d 后统计愈伤组织诱导率。 愈伤
组织诱导率＝（分化出愈伤外植体个数 ／接种外植体
个数）×100％
1．4 NAA 和 6－BA 对野生参薯愈伤组织分化不定
芽的影响
以 MS＋30 g ／ L 蔗糖＋6.0 g ／ L 琼脂为基本培养基
（pH 6.0），以 NAA （0．05、0．10、0．20 mg ／ L）和 6 －BA
（0．1、0．5、1．0 mg ／ L）进行组合配比试验，筛选愈伤组
织分化不定芽的最适培养基。
1．5 NAA和 6－BA对野生参薯不定芽生根的影响
以 MS＋30 g ／ L 蔗糖＋6.0 g ／ L 琼脂为基本培养
基，以 NAA（0．10、0．15、0．20、0．30、0．40 mg ／ L）和 0．01
mg ／ L 6－BA 进行组合配比试验，筛选野生参薯的最
适生根培养基。
2 结果与分析
2．1 不同浓度的 NAA 和 6－BA 对野生参薯愈伤组
织诱导的影响
不同浓度的 NAA 和 6－BA 对野生参薯愈伤组
织诱导的影响见表 1。由表 1可知，野生参薯带节茎
段接种 4 d 后，部分处理（处理 5、处理 7、处理 8、处
理 9）外植体在剪切伤口处出现膨大现象；接种 7 d
后，处理 1、处理 9 外植体在剪切口处也有不同程度
的膨大。 接种 20 d 后，除了处理 1 没有愈伤组织出
现，其他处理都有愈伤组织出现，但愈伤组织诱导
率差异较大。 处理 8 诱导率最高，达 86．7％；其次是
处理 9，愈伤诱导率为 83．3％；处理 5 也有较高的诱
导率；其他处理的诱导率均较低。 因此，培养基 MS＋
1．0 mg ／ L 6－BA＋0．2 mg ／ L NAA＋30 g ／ L 蔗糖＋6．0 g ／ L
琼脂为野生参薯愈伤组织诱导的最适培养基。
2．2 不同浓度的 NAA 和 6－BA 对愈伤组织分化不
定芽的影响
不同浓度的 NAA 和 6－BA 对愈伤组织分化不
定芽的影响见表 2。 由表 2 可以看出， 9 个处理都
有较高的不定芽分化率，其中处理 5 的不定芽分化
率最高，达 100.00％；其次是处理 2，不定芽分化率
为 93．33％；处理 3 也有较高的分化率，达 90．00％。
从外植体分化不定芽数及不定芽长势来看，单个外
植体分化不定芽数较高的是处理 5、处理 4、处理 2
和处理 3， 其不定芽数分别为 4．53、4．10、3．83 和
3．80，并且分化出的不定芽健壮、饱满，长势很好（图
1），将这些不定芽转入生根培养基，全部都能成苗。
因此，0．5 mg ／ L 6－BA 与 0．1 mg ／ L NAA 最适于野生
参薯愈伤组织分化不定芽。
2．3 不同浓度的 NAA 与 6－BA 对不定芽生根的影
响
将不定芽接种在不同浓度的 NAA 和 6－BA 的
生根培养基上，3～5 d 在不定芽下端可见明显的白
色突起，10 d 左右即可见伸长的须根，20 d 后大部
分处理的不定根已经很发达 （图 2）。 不同浓度的
4810
第 19 期
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理论依据。
参考文献：
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20（2）：91－94．
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2004．
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1996，10（21）：2696－2706．
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现代农业科技，2006（6）：41－43．
［6］ 徐 锋，杨 勇，谢馥交，等．稻瘟菌激活蛋白对植物生长及其生
理活性的影响［J］．华北农学报，2006，21（5）：1－5．
［7］ 赵利辉，邱德文，刘 峥，等．植物激活蛋白对水稻抗性相关基因
转录水平的影响［J］．中国农业科学，2005，38（7）：1358－1363．
［8］ 陈 梅，邱德文，刘 峥，等．植物激活蛋白对烟草花叶病毒 RNA
复制及外壳蛋白合成的抑制作用［J］．中国生物防治，2006，22（1）：
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［9］ 韩晓光，邱德文，吴 静，等．植物激活蛋白对玉米抗病相关酶活
性的影响［J］．安徽农业科学，2006，34（8）：1523－1524．
［10］ 张云华，张立军，邱德文，等．灰葡萄孢菌激活蛋白对番茄灰霉
病的诱导抗性及防御相关酶活性的影响［J］．河北农业大学学
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［11］ GUO L D， HYDE K D， LIEW E C Y． Identification of en-
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and rDNA sequences［J］． New Phytologist，2000，147（3）：617－
630． （责任编辑 屠 晶）
（上接第 4808页）
表 3 不同浓度的 6-BA 和 NAA 对野生参薯
不定芽生根的影响
处理
1
2
3
4
5
NAA
mg/L
0.40
0.30
0.20
0.15
0.10
接种不定
芽//个
30
30
30
30
30
备注
根系较发达，生长一般
根系发达，生长健壮
根系较发达，生长较好
根系较发达，生长较好
根系较少，生长一般
生根不定
芽//个
21
30
28
22
17
生根率
%
70.00
100
93.33
73.33
56.67
注：6-BA 用量为 0.01 mg/L。
图 1 野生参薯愈伤组织分化的不定芽
图 2 野生参薯生根组培苗
NAA 与 6－BA 对不定芽生根的影响见表 3。 由表 3
可知，处理 2 生根率最高，达 100.00％；处理 3 也有
较高的生根率，达到 93．33％，其他处理的生根率相
对较低，仅为 56．67％～73．33％。 因此，0．01 mg ／ L 6－
BA 与 0．3 mg ／ L NAA 最适于野生参薯不定芽生根。
2．4 生根苗移栽
将野生参薯生根组培苗先在室内炼苗 2～3 d，
然后开瓶炼苗 3～5 d，最后移栽至营养土中（园土∶蛭
石＝5∶5），幼苗成活率可达 95％以上（图 3）。
3 小结
本试验研究了采自鄂东大别山蕲春县野生参
薯的组织培养技术，优化了愈伤组织诱导、愈伤组
织分化不定芽、不定芽生根培养及生根苗移栽等环
节，成功实现了野生参薯的离体再生，为下一步人
工驯化野生参薯和开发利用参薯野生种质资源奠
定了基础。
参考文献：
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［5］ 梁小娟，杜伟锋，张 云，等．参薯研究进展［J］．中华中医药学刊，
2011，29（5）：1085－1087．
图 3 营养土中栽植的野生参薯组培苗
（责任编辑 屠 晶）
康 薇等：NAA 和 6－BA 对野生参薯愈伤组织诱导和不定芽分化、生根的影响 4811