全 文 :作者简介:张 元 , 男 , 1973年出生。 硕士学历 , 助教。主要从事中
药复方药理作用机制的研究。
吉祥草总皂苷溶血 、止咳 、化痰 、抗炎作用的研究
张 元1 ,3 杜 江2 许建阳3 姚桂玲3 王 莉3 张丽萍3 (1 北京联合大学生物化学工程学院 ,北京
100023;2贵阳中医学院 ,贵阳 550002;3武警总医院 ,北京 100039)
摘 要 目的 观察吉祥草提取物总皂苷抗溶血及止咳 、化痰 、抗炎的作用。方法 采用兔血红细胞溶血实验法;采用
小鼠氨水引咳法及气管酚红排泌法观察吉祥草总皂苷(TSRC)的镇咳及祛痰作用;采用小鼠耳壳二甲苯致肿法 、小鼠腹腔毛细
血管通透法观察TSRC 的抗炎作用。结果 采用兔血红细胞溶血实验法证明 TSRC 不溶血。给小鼠(灌胃给药)TSRC100 , 200
mg/ kg小鼠咳嗽潜伏期明显延长 , 咳嗽次数减少(P <0.01);气管酚红排泌量明显增多(P <0.01);但对小鼠耳壳二甲苯致肿
的抑制率及小鼠腹腔毛细血管通透性无明显效果(P >0.05)。给小鼠(皮下注射给药)TSRC100 , 200 mg/ kg , 对小鼠耳壳二苯
致肿的抑制率及小鼠腹腔毛细血管通透性与生理盐水比有明显效果(P <0.05 , P <0.01)。结论 吉祥草总皂苷(TSRC)不
溶血。吉祥草总皂苷(TSRC)灌胃给药能抑制氨水引起的小鼠咳嗽;能促进小鼠气管酚红排泌;灌胃给药抗炎作用不明显 。吉
祥草总皂苷(TSRC)皮下注射给药抗炎作用明显。
关键词 吉祥草总皂苷 溶血 止咳 化痰 抗炎
Pharmacological study of total Saponins from Reineckia carnea on hemolysis , relieving a cough, abolishing phlegm and anti-
inflammation
ZHANG Yuan , DU Jiang , XU Jianyang , YAO Guiling , WANG Li , ZHANG Liping.Biochemical Engineering College of Beijing
Union University , Beijing 100023 , China
Abstract Objective To observe anti - hemolysis , relieving a cough , reducing sputum and anti - inflammation effects of total
Saponins from Reineckia(TSRC).Method To observe the effect of anti- hemolysis by hemolysis experiment on rabbit.method of ammonia
media cough and phenol red on mice were used to value the effects of relieving cough and reducing sputum of TSRC;method of swelling of ear
on mice induced by xylene and auriculate tumefaction and increasing capillary permeability on mice were used to value the effects of anti- in-
flammation.Result TSRC has no hemolysis side-effects by the hemolysis experiment on rabbit , it can decrease times of cough(TSRC100 ,
200 mg/kg , ig)(P <0.01)and has the effect of reducing sputum(P <0.01).TSRC has not obvious effect on anti-inflammation by pour-
ing into stomach(P >0.05), but through the method of injection , compared with using physiological saline solution , TSRC has obvious effect
on anti-inflammation(P <0.05 , 0.01).Conclusions TSRC has no hemolysis side-effects;TSRC has the obvious effects on relieving
cough and reducing sputum on mice;TSRC has obvious effect on anti-inflammation by the method of injection.
Key words TSRC Hemolysis Relieving cough Reducing sputum Anti- inflammation
吉祥草又名观音草 ,为百合科植物吉祥草 Rei-
neckia carnea(Andr)kunth[ Sanseviera Andr] 的全草 。
它是我国西南苗族地区常用的传统草药之一 ,味甘 ,
性凉 ,具有清肺止咳 ,凉血止血 ,解毒利咽等功效 。
苗族民间常用于治疗咳嗽 ,支气管炎 ,肺炎等病症 。
其植株主要含皂苷类成分 ,甾体化合物 ,皂苷元等成
分[ 1] 。为了进一步研究吉祥草的药理作用 ,我们对
吉祥草总皂苷的溶血 、止咳 、祛痰 、抗炎作用进行了
研究 ,现将相关的实验报道如下。
1 试验材料和方法
1.1 药品与试剂 吉祥草总皂苷(TSRC):吉祥草
购于贵阳中草药市场 ,经贵阳中医学院鉴定为百合
科植物吉祥草 ,在贵阳中医学院中药制剂教研室提
取分离 ,经化学检识为皂苷类成份即吉祥草总皂苷
(TSRC), 易溶于水。氨水:北京化工厂 , 批号
20000904。氯化铵:北京益利精细化学品有限公司 ,
批号 20001102。二 甲 苯:北 京 化 工 厂 , 批 号
20010301。酚红:北京化学试剂公司 ,批号 020718。
伊文思兰:北京化学试剂公司 ,批号 20021108。新泰
络其:珠海联邦制药股份有限公司中山分公司 ,批号
030519。地塞米松:天津金辉氨基酸有限公司出品 ,
批号0211141。
1.2 动物 昆明种小鼠 , 体重(22±2)g ,雄性 ,购
于中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心 ,
许可证:SCXK-(军)2002-001。日本大耳兔 ,体重
3 kg ,雄性 ,购于中国兽药监察所 ,许可证:京动许-
004号 。
1.3 仪器 超生雾化器:双佳980型 ,上海医械专机厂
(有限公司);分光光度计:SHIMADZU ,UV-2401PC型。
282 武警医学 (Medical Journal of the Chinese People s Armed Police Forces)Vol.17 No.04 2006-04出版
表 1 吉祥草总皂苷 7 个剂量组的溶血作用对比
试液 1 2 3 4 5 6 7 8 9
供试品 0.5 mg/ml 1 mg/ml 2 mg/ml 3 mg/ ml 4 mg/ ml 5 mg/ml 10 mg/ml - -
溶液 0.3 ml 0.3 ml 0.3 ml 0.3 ml 0.3 ml 0.3 ml 0.3 ml
生理盐水 2.2 ml 2.2 ml 2.2 ml 2.2 ml 2.2 ml 2.2 ml 2.2 ml 2.5ml 蒸馏水 2.5
2%的红细胞
混悬液 2.5 ml 2.5 ml 2.5 ml 2.5 ml 2.5 ml 2.5 ml 2.5 ml 2.5 ml 2.5 ml
结果 - - - - - - ± - +
注:①第 1~ 6管 、NS管不溶血 ,第 7管微溶血 ,第 9管溶血;②“ -”表示不溶血 , “ +”表示溶血
1.4 方法
1.4.1 溶血实验[ 2] 取日本大耳兔 1只 ,耳静脉取
血 20 ml 置于三角烧瓶中 ,除去纤维蛋白后转入刻
度离心管中 ,加入生理盐水10ml ,混匀后离心(2 500
r/min)5 min ,除去上清夜 ,再加入适量生理盐水离
心。如此重复 4次至上清液无色澄明 。用生理盐水
配成2%的红细胞混悬液 。取试管 9支 ,分别加入
生理盐水 、蒸馏水及生理盐水配制的吉祥草总皂苷
(TSRC)不同浓度药液(0.5mg/ml 、1mg/ml 、2 mg/ml 、
3 mg/ml、4 mg/ml 、5 mg/ml 、10 mg/ml),置 37℃水浴
中保温 ,每 30 min观察 1次结果 ,观察 1 h 。
1.4.2 止咳作用[ 2] 取小鼠 40只 , 体重(22±2)
g ,雄性 ,随机分4组 。设空白对照组(生理盐水 0.4
ml/只 ,灌胃给药),2组药物组(TSRC100 ,200 mg/kg ,
灌胃给药);阳性药物组(新泰络其 0.2ml/10 g ,灌胃
给药);各组每天给药2次 ,连续3 d。末次给药后40
min ,分别将小鼠置于倒置的 5 L 密闭容器中 , 给予
超生雾化氨水熏蒸 15 s后(50 ml/次 , 一熏一换氨
水 ,每次熏 2只小鼠),记录小鼠1min内的咳嗽次数
和潜伏期 。
1.4.3 祛痰作用[ 2] 取小鼠 40只 , 体重(22±2)
g ,雄性 ,随机分 4组 ,设空白对照组(生理盐水 0.4
ml/只 ,灌胃给药),2组药物组(TSRC100 ,200 mg/kg ,
灌胃给药),氯化铵(阳性药 0.2 g/kg ,灌胃给药),2/
d ,连续 3 d。末次给药后 1 h , ip5%酚红 0.1 ml/10
g ,0.5 h 后处死动物 ,剥离气管周围组织 ,剪下自甲
状软骨下至气管分支处的一段气管 ,放入盛有 2 ml
生理盐水的试管中 ,再加入 1 mol/LNaOH 0.1 ml ,用
分光光度计于波长 546 nm 处测吸光度(A)值。A 越
大 ,表示酚红排泌量越多 ,提示药物的祛痰作用越
大。
1.4.4 抗炎作用[ 3] (1)对小鼠耳壳二甲苯致肿的
影响:取小鼠 70只 ,体重 22±2 g ,雄性 ,随机分 7
组。设 2组空白对照组(生理盐水 0.4 ml/只 ,灌胃 、
皮下注射给药);设 4组药物组(TSRC100 , 200 mg/
kg ,灌胃 、皮下注射给药);地塞米松(阳性药 0.5 mg/
kg ,皮下注射给药);各组每天给药 1 次 ,连续 3 d。
末次给药后40 min ,每鼠右耳均匀涂二甲苯 50μl ,致
炎后1h脱椎处死 ,沿耳廓剪下二耳 ,用8 mm打孔器
分别在左 、右耳同一部位打下圆耳片 ,称重 ,计算左 、
右耳片重量之差作为肿胀度 。(2)对小鼠毛细血管
通透性的影响:取小鼠 70只 ,体重 22±2 g ,雄性 ,随
机分7组 。设 2组空白对照组 ,分别以生理盐水(灌
胃 、皮下注射给药);设 4 组药物组(TSRC100 , 200
mg/kg ,灌胃 、皮下注射给药);地塞米松(阳性药 0.5
mg/kg ,皮下注射给药);各组每天给药 1 次 ,连续 3
d。末次给药后 40 min ,每鼠尾静脉注射 2 g/dl伊文
思蓝生理盐水溶液0.1 ml/10 g ,立即腹腔注射0.6%
醋酸0.2 ml/只 , 20 min 后 , 脱椎处死小鼠 , 剪开腹
腔 ,用 5 ml生理盐水冲洗腹腔数次 ,收集洗涤液 ,离
心(1 000 r/min)5 min ,用分光光度计于波长 590 nm
处测定吸收值。
2 结果
2.1 溶血实验结果 吉祥草总皂苷(TSRC)7个剂
量组的溶血作用的实验结果(表 1)。结果表明剂量
小于 5 mg/ml吉祥草总皂苷表现为不溶血 ,剂量大
于 10 mg/ml开始表现出一定的溶血性 。
2.2 止咳作用结果 吉祥草总皂苷(TSRC)2个剂
量组和新泰络其(阳性药)与空白氨水对照组相比较
的结果(表2)。结果表明吉祥草总皂苷(TSRC)100
mg/kg 、200 mg/kg两个剂量组灌胃给药均能延长咳
嗽潜伏期 ,使咳嗽次数减少 。
表 2 2 个剂量组和新泰络其与空白氯水组止咳作用对比
组别 n 剂量 潜伏期 咳嗽次数
空白组(灌胃) 10 0.2 ml/ 10 g 6.65±2.22② 41.4±13.89②
TSRC组(灌胃) 10 100 mg/ kg 17.35±7.71①② 16.7±1.96①②
TSRC组(灌胃) 10 200 mg/ kg 19.30±11.3①② 15.6±6.47①②
新泰络其(灌胃) 10 0.2 ml/ 10 g 29.1±12.51① 8.7±4.69①
注:TSRC组与NS组比较 , ① P <0.01;与阳性组比较 , ②P <0.01
2.3 祛痰作用结果 吉祥草总皂苷(TSRC)2个剂量
组和氯化铵(阳性药)与空白氨水对照组相比较的结
果(表 3)。结果表明吉祥草总皂苷(TSRC)100 mg/kg 、
200 mg/kg 两个剂量组具有明显的祛痰作用 ,与空白
组比较存在显著性差异 ,但程度低于氯化铵组 。
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表 3 2 个剂量组和氯化胺与空白氨水组祛痰作用对比
组别 n 剂量 吸光值(ug/ml)
空白组(灌胃) 10 0.2 ml/ 10 g 0.20±.060③
TSRC 组(灌胃) 10 100 mg/ kg 0.37±0.13①②
TSRC 组(灌胃) 10 200 mg/ kg 0.40±0.10①②氯化铵组(灌胃) 10 0.2 g/kg 0.57±0.18①
注:TSRC组与空白组比较 , ① P <0.01;与氯化铵组比较 , ②P <
0.01 , ③ P <0.001
2.4 抗炎作用结果 吉祥草总皂苷(TSRC)4个剂
量组和地塞米松(阳性药)与空白对照组相比较的结
果(表 4)。结果表明吉祥草总皂苷(TSRC)注射给药
能明显抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀 ,具有一定的抗
炎作用 ,灌胃给药效果不明显 。
表 4 4 个剂量组和地塞米松及时对照组对比抗炎作用
组别 n 剂量 肿胀度
空白组(灌胃) 10 0.2 ml/ 10 g 6.13±0.80⑤
空白组(皮下注射) 10 0.2 ml/ 10 g 5.83±1.14⑤
TSRC组(灌胃) 10 100 mg/ kg 4.86±1.29①⑤
TSRC组(灌胃) 10 200 mg/ kg 5.38±1.31⑤
TSRC组(皮下注射) 10 100 mg/ kg 4.15±1.26②④
TSRC组(皮下注射) 10 200 mg/ kg 4.37±1.95②③
地塞米松(皮下注射) 10 0.5 mg/kg 3.36±1.54②④
注:与空白组(灌胃)比较①P <0.05 , ②P <0.01;与空白组(皮下
注射)比较③ P <0.05, ④P <0.01;与地塞米松(皮下注射)比较
⑤ P <0.01
吉祥草总皂苷(TSRC)4个剂量组和地塞米松
(阳性药)与空白对照组相比较的结果 ,见表 5。结
果表明吉祥草总皂苷(TSRC)注射给药可以减少醋
酸引起的炎性渗出 ,使毛细血管通透性增高 ,灌胃给
药效果不明显 。
表 5 4个剂量组和地塞米松组与对照组血管通透性对比
组别 n 剂量 吸光值
空白组(灌胃) 10 0.2 ml/10 g 0.266±0.080⑤
空白组(皮下注射) 10 0.2 ml/10 g 0.260±0.091⑤
TSRC组(灌胃) 10 100 mg/kg 0.235±0.085⑤
TSRC组(灌胃) 10 200 mg/kg 0.217±0.083③⑤
TSRC组(皮下注射) 10 100 mg/kg 0.202±0.064①⑤
TSRC组(皮下注射) 10 200 mg/kg 0.186±0.069②③⑤
地塞米松(皮下注射) 10 0.5 mg/kg 0.091±0.061②④
注:与空白组(灌胃)比较 , ①P <0.05, ② P <0.01;与空白组(皮下
注射)比较 , ③ P <0.05 , ④P <0.01;与地塞米松(皮下注射)比较 ,
⑤ P <0.001
3 讨论
吉祥草又名观音草 ,为百合科植物吉祥草 Rei-
neckia carnea(Andr)kunth[ Sanseviera Andr] 的全草。
它是我国西南苗族地区常用的传统草药之一 ,味甘 ,
性凉 ,具有清肺止咳 ,凉血止血 ,解毒利咽等功效。
苗族民间常用于治疗咳嗽 ,支气管炎 ,肺炎等病症。
其植株主要含皂苷类成分 ,甾体化合物 ,皂苷元等成
分[ 1] 。吉祥草提取物总皂苷抗溶血及止咳 、化痰 、抗
炎的作用 。通过溶血实验结果表明剂量小于 5 mg/
ml吉祥草总皂苷表现为不溶血 ,剂量大于 10 mg/ml
开始表现出一定的溶血性 ,止咳实验结果表明吉祥
草总皂苷(TSRC)100 mg/kg 、200 mg/kg 两个剂量组
均能延长咳嗽潜伏期 ,使咳嗽次数减少 。祛痰实验
结果表明吉祥草总皂苷(TSRC)100mg/kg 、200mg/kg
两个剂量组灌胃给药具有明显的祛痰作用 ,与空白
组比较存在显著性差异 ,但程度低于氯化铵组。抗
炎结果表明吉祥草总皂苷(TSRC)注射给药能明显
抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀 ,具有一定的抗炎作用 ,
灌胃给药效果不明显。
本实验采用兔血红细胞溶血实验法证明吉祥草
总皂苷(皮下注射)给药小剂量不溶血 。吉祥草总皂
苷(灌胃)给药能抑制氨水引起的小鼠咳嗽 ,能促进
小鼠气管酚红排泌 ,但抗炎作用不明显 。吉祥草总
皂苷(皮下注射)给药100 ~ 200 mg/kg 具有一定的抗
炎作用 。上述实验结果表明吉祥草总皂苷具有一定
的止咳 、化痰的作用 ,改变给药途径后具有一定抗炎
的作用 。有关吉祥草抗炎作用的作用机制需进一步
研究。
参考文献
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医学院学报 , 2003.205
[ 2] 陈 奇.主编.中药药理实验方法.北京:人民卫生出版
社 , 1994 , 31 , 130-145
[ 3] 徐树云.主编.药理实验方法学.北京:人民卫生出版
社 , 1982.524-528
(2005 -12 -01 收稿 ,责任编辑 郭 青)
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