全 文 ：作物品种资源2 1 9 9年竿2 期
分韭 、 山韭和韭的醋酶同工酶研究
杜武峰 熊金桥 刘 富中
( 中国农科院 蔬菜花卉研究所 )
摘妻 本文对分韭 、 山 韭和韭的两个栽培品种的叶片和根 尖醋酶同工醋晦谱进行 了分析
研 究。 叶片醋酶 同工酶分离出4 1条酶带 ;根尖醋晦 同工酶分 离出20 条酶带 。 几种韭间爵谱类
型差异显著 , 而品种间酶谱类型差异较 小 。 同时 , 衬分韭的分类 问题进行 了探计 。
关键词 : 分韭 山 韭 韭 醋酶 同工酶
分韭 ( A l l￡。脚 s p . ) 是 r g s 7年在沏北省
神农架地区考察发现的 一种栽培韭 , 因其分
靡旺盛 , 故以分靡繁殖 , 如不分株栽培 , 则
植株退化变小 , 故当地称分韭 。 作菜用 , . 味
稍淡 , 其鳞茎和叶片的外部形态与普通栽培
韭 ( A l l犷u阴 t u b e r o s u , , : R o t t l e r e x S P r e n -
ge l) 明显不同 。 而与 《中国 植 物 志》 所记
载的山 韭 ( A l l` u , ,: s e n e s e e n s L . ) 的 外 部
形态较为相似 , 但地下茎不相同 , 分韭没有
横生的根状茎 , 鳞茎外被浅粉红色叶鞘 , 分
桑极为旺盛 , 叶片呈浅绿色 , 个别叶片稍有
扭曲 , 栽培时很少抽蔓 , 伞形花序 , 花为粉
红色或白色 , 子房常 3室 、 4室 , 稀 2 室 。 据
此 , 笔者认为分韭应为葱属一新种 「’ 工 f1z 。
本试验选用三种韭的叶片及根尖作材料
进行醋酶同工酶分析 , 探讨其种间分类问题
及品种间的相互关系 , 同时 , 作为一种生化
分类方法 , 可为形态分类提供佐证 【” 1 川 。
材料与方法
(一 ) 材料 供试材料为三种韭 , 即分
韭 、 山韭和韭 , 其中韭有两个地方品种 : 竹
溪韭菜和津南青韭 , 材料均采 自中国农业科
学院蔬菜花 卉 所 实验地 。
(二 ) 方法
1
. 样品制备 取洗净的幼叶 (或根尖 )
样品。。 g2 , 加入 1 . 5 m l l0 % 甘油 置 冰 块上
研磨成 匀 浆 , 然 后 在 2 ” 4 ℃ 的条 件 下
15 0 0 0 : / m i
。离心 1 5分钟 , 取上清液备用 。
2
. 同工酶电泳分离 采用聚丙烯酸胺凝
胶电泳分离 , 每次上样量 80 川 , 将 电泳槽置
于 4 “ C的冰箱中 ,在 2 5 m A 条件下预泳 0 . 5 h ,
后增至 3 o m A分离 3 h , 澳酚蓝作指示剂指示
前沿 , 浓缩胶和分离胶浓度皆为 12 % 。
3
。 同工酶染色 染色液配方 : 0。 g2 醋酸
a 一蔡酿 、 0 . 2 9醋酸压禁酚溶于 2 m l丙酮中 ,
再加 0 . 29 快速坚牢蓝 R R盐 , 用 p H 7 。 O的 磷
酸缓冲液稀释至 2 O 0m l 。 染色至 同工酶酶带
清晰可见为止 。
4
. 相对迁移率
。 r 酶带移动距离 、 , , 。 八
八 i = 石舀而蔽百丽不蔽压石币厄石薪 入 I U U了关 子犷分五灭石魂乡亚已 户劝
结果与分析
( 一 ) 叶片醋酶 同工酶
叶片及根尖赌醉同工晓圈
供试样品的叶片醋酶同工酶共分离出 14
条酶带 , 从负极到正极依次为 : A : 、 A : … …
A :
4
(图左 ) 。 整个酶谱带可分三个带区 。
津南韭青澳菜竹韭韭山分韭
慢带区 , 人 : ~ A Z , 其 R f值在 7 . 5 、 8 。 9 ; 中
带区 , A 。 ~ A 。 , 其 R f值 在 2 6 . 9 ~ 37 。 3多 快
带区 , A 。~ A , 、 , 其 R f值在 4 6 . 5~ 6 3 . 3 。 在
慢带区酶活性弱 , 中带区酶活性较强 , 快带
区酶活性最强 , 相对迁移率大。 从图和表中
可 以看出 : A : 带为 4种材料所共有 , 为基本
谱带。 、 分韭和山韭的酶谱 带 差 异 显著 , 各
具 6条酶带 , 仅 A Z 、 A 4带为两者共有。 其它
酶带的迁移率差异很大 , 且在各带区分布不
同 , 慢带区分韭有一条 , 山韭有两条 , 其中
A : 为两者区别的特征 谱带 ; 中带区分韭有 3
条酶带 , 、山韭具一条 酶带 , A 。 、 人。为分韭
与 山韭相区别的特征酶带 , 快带区分韭具 2
条酶带 , ` 山`韭具有 3条酶带 , 各自的相 对 迁
移率均不相同 , 这 5 条酶带均为两者相区别
的特征谱琳 可见 , 分韭和山韭的叶片醋酶
同土酶差异根大 , 因而两者亲缘关系很远 ,
把分韭作为一个新种 , 有一定的依据 。
分韭同韭的酶谱带差异也很大 , 亦不能
把分韭归并为韭的一个类型 。 而韭的两个栽
培品种比较 ,竹溪韭菜具 7条酶带 , 津南青韭
具 8条酶带 , 其中 A : 、 A 3 、 A S 、 A 7 、 A 。 、
A
. 6条酶带为两者所共有。 可见两者的酶谱
差异较小 , 亲缘关系很近 。
(二 ) 根尖醋珍同工酶
供试样品的根尖酷酶同工酶共分离出 20
条酶带 , 慢带区 4条B : 、 B ` , R f值在 1 1 . 9 、
异显著 , 而品种间酶谱差异很小 。 因此同工
酶分析可 以用于种间分类鉴别 , 作为一种生
化分类方法 , 为形态分类提供可靠的依据 。
;
_
(二 ) 关于分韭分类 问题的探讨
分韭在形态上不同于其它韭 , 可定为一
个新种 , 但有的学者认为分韭即山韭 , 也有
的认为分韭是韭的一个类型 。 实验 结果 表
明 : 分韭和山韭 、 分韭和韭的酶谱带差异显
著 , 相同的酶带很少 , 相对迁 移 率 相 差很
大 , 其亲缘关系很远 , 因此把分韭定为一个
新种 , 本实验为其提供了有力的佐证 。
表 几种韭叶片及根尖口醉同工醉蔺常比较
叶片少班
带及 R f值
分 山 竹澳韭 韭 韭菜 津 南青韭
根尖中酶带及 R f值
A 1 7
.
5 一
A Z 9
.
9 一 一 一 一
A 3 26
.
9 一 一
A 4 2 3
.
3 一 一
A弓 31 . 3 一 一
A 8 34
.
3 一
弃7 3 5 . 8 一 _
A S 3 7
.
3 一 一 一
人 9 4 6 . 3 一 一
A 1 0 4 9
.
3 一 一
A 1 1 5 6
.
7 一
A 1 2 5 9
。
7 一 一
A 1 3 6 1
.
2 一
A 1 4 6 3
_
3 一 一
B 1
B 2
1 1
.
9
1 4
_
9
B 3 1 7
B 4 2 0
B S 2 8
B 6 3 2 …358401钊6盯9幻弱“.1,201341。06789了冶旧卜.r厂创划B日a
。
9之间 ,
。
4~ 6 4
。
中带区 16 条 B 。 、 B : 。 , R f 值 在
吟“之凤 中带区各带间相距很近 ,个括性较强的酶区 。 分韭具 2条酶带 ,
9
9 一
4 — —
8
8
8
3 一
8
8
3
8
3
7
7
2 一
7 ~
2 —
2 一
no八ù9曰Q自
形成一
山韭具 6条酶带 , 仅 B。为两者共有 。 可 见 两
者亲缘关系较远 。 而韭菜中的竹溪韭菜和津
南青韭各具 10 条酶带 , 其中 B Z 、 几 、 氏 、
B玉: 、 B 、 。 、 B : ; 、 B , 。 7条酶带相同 , 可见品种
间酶谱差异很小 , 即亲缘关系较近 (见表 ) 。
讨 论
(一 ) 同工醉分析在分类上的应用
从实验结果可以看出 : 植物种间酶谱差
今考文做
〔 O 中国科学院中国植物志编委会 . 中国植 物 志 .
第 14 卷 , 北 京 : 科学出版社 , 19 8 0 .
〔2 〕 杜武峰 , 刘富 中 . 分韭 、 山韭与韭的核型 分 析
初报 . 中国园艺学会第六届年会 论文 , 19 89 .
户〕 澡小泉 , 东惠茹 , 胡是林 . 南瓜属三个种过氧化
物醉和角醉筒工酶分析 . 园艺学报 , 1。。。 , x。 ( 4 ) : 2。。
` 3 0 3 。
〔` ) T o r r e s A M , e t a l . L e a f i s o z y m e s a s
g e n o t i e m a r k e r s i n C i t r u s
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