全 文 ：Journal of Food Science and Biotechnology Vol.32 No.5 2013
JIN Zhao -lei，et al： Experimental Studies on Anti -Inflammatory and
Antitussive Activity of Extract from Reineckia
carnea and Associated Pharmacodynamics
Research Article
Experimental Studies on Anti-Inflammatory and Antitussive Activity of
Extract from Reineckia carnea and Associated Pharmacodynamics
JIN Zhao-lei1，2， ZHAO Chao1，2， CHEN Hua-guo1，2， ZHOU Xin*1，2， YANG Shi-lin1，2
（1. The Research Center for Quality Control of Nature Medicine Guizhou Normal University，Guiyang 550001，China；
2. Key Laboratory for Information System of Mountainous Areas and Protection of Ecological Environment，Guiyang
550001，China）
Abstract： The objective of this study is to study relieving a cough and anti-inflammation effects of
different extract part from Reineckia carnea. For this，the different extract part of Reineckia carnea
were orally administrated to coughing mice induced by ammonia liquor in mice and xylene-induced
mouse ear swelling model in mice，respectively，to investigate their medication effect on coughing
and anti-inflammation. It was found that both ethanol extract and water extract had obvious effect
on anti-inflammation （P<0.05），ethanol extract lengthened the latent period of cough at high and
low dose （P<0.05），and high dose decrease cough frequency （P<0.05）. The water extract fraction
lengthened the latent period of cough as well as the ethanol extract at high dose. The petroleum
ether extract had not obvious effect on anti -inflammation and coughing. Based on the aboved
results，it can concluded that the anti-inflammatory，cough active chemical composition were mainly
摘要： 研究了吉祥草药材不同提取部位抗炎、止咳活性。 分别采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、小
鼠氨水引咳法，观察吉祥草药材不同提取部位抗炎、止咳作用。 结果表明，吉祥草药材食用酒精
提取物 3 个剂量给药组都有非常显著的抗炎作用（P<0.05），高、低剂量组明显延长咳嗽时间（P<
0.05）， 高剂量组明显减少咳嗽次数 （P<0.05）； 水提物 3 个剂量组同样具有明显抗炎作用 （P<
0.05），水提高剂量组能明显增多咳嗽次数（P<0.05），减少咳嗽时间（P<0.05）；石油醚提取物各剂
量组均没有显著抗炎及止咳作用。 可见，吉祥草药材食用酒精提取物及水提物具有较好的抗炎、
止咳活性。
关键词： 吉祥草；不同溶剂提取物；抗炎活性；止咳活性
中图分类号：R 285.5；Q 95-331 文献标志码：A 文章编号：1673—1689（2013）05—0556—04
吉祥草药材抗炎、止咳作用及谱效关系
金兆磊 1，2， 赵 超 1，2， 陈华国 1，2， 周 欣 *1，2， 杨世林 1，2
（1. 贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心，贵州 贵阳 550001；2. 贵州省山地环境信息系统与生态环境保护
重点实验室，贵州 贵阳 550001）
收稿日期： 2013-01-10
基金项目： 贵州省社发攻关项目（黔科合 SY 字[2011]3014 号）；贵州省科技创新人才团队建设项目（黔科合人才团队（2011）4008）；贵州
省教育厅特色重点实验室项目（黔科合 KY[2012]005 号）；2012 大学生科技创业计划项目（筑科合同（2012）5 号）。
* 通信作者： 周 欣（1962—），女，安徽霍邱人，教授，博士研究生导师，主要从事中药质量控制及新药开发。 E-mail：alice9800@sina.com
研究论文
貐貜貧
食品与生物技术学报 2013 年第 32 卷第 5 期
金兆磊，等： 吉祥草药材抗炎、止咳作用及谱效关系研究论文研究论文
药用吉祥草为百合科吉祥草属植物吉祥草
（Reineckia carnea（Andr.）Kunth）的干燥全草，史载
于隋唐时期陈藏器《本草拾遗》，在《本草纲目》《中
药大辞典》等中均有记载。 吉祥草又名观音草、小叶
万年青、瑞草等，具有清肺止咳、解毒利咽、凉血止
血、 止痛散瘀等功效。 其主要分布在我国华东、中
南、西南各省，它是我国苗族地区常用的传统草药
之一[1]。
国内外关于吉祥草药材药理的研究报道不多，
关于吉祥草药材的抗炎活性、止咳活性研究更是少
见。 张元[2]等人研究发现，吉祥草总皂苷灌胃给药能
够抑制氨水引起的小鼠咳嗽，总皂苷皮下注射给药
具有较好的抗炎作用；Nan Han[3]等人利用水溶剂回
流提取吉祥草药材，得到母液部分，另外将母液通
过柱层析（D-101 大孔树脂）梯度洗脱，得到不同部
位。 分别为：水、体积分数 30%乙醇、体积分数 60%
乙醇及体积分数 90%乙醇洗脱部分。 通过药理实
验，发现体积分数 60%、体积分数 90%乙醇洗脱部
位具有明显的止咳、化痰效果。 因此，为进一步发现
吉祥草药材抗炎、止咳活性部位，本实验中利用不
同极性溶剂提取药材，通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀
和小鼠氨水引咳经典实验方法筛选，初步确定吉祥
草材抗炎、止咳有效活性部位。
1.1 动物
昆明种小鼠，雌雄各半，体质量 18~22 g，由长
沙东创实验动物科技服务部提供（SPF 级），许可证
号：SCXK（湘）2009-0012。
1.2 药物
吉祥草药材，采于贵州贵阳小河区，原植物经
贵州师范大学天然药物质量控制中心陈华国副研
究员鉴定为百合科吉祥草（Reineckia carnea（Andr）
Kunth.）。
1.3 药物制备
取上述 3 份吉祥草干药材粗粉各 50 g，精密称
定，分别加入 10 倍量蒸馏水、食用酒精及石油醚，
加热回流提取 2 次，每次 2 h，合并 2 次滤液，减压
浓缩至干，精密称定，计算各溶剂提取物得膏率：石
油醚提取得率 1.5%， 食用酒精提取得率 23.2%，水
提取得率 43.3%。
阿司匹林，规格：25 mg × 100 片，神威药业有
限公司产品，批号：1103052；磷酸可待因口服液Ⅲ，
规格：每 5 mL含磷酸可待因 4 mg、盐酸麻黄碱 5 mg、
马来酸氯苯那敏 2.5 mg、远志流浸膏 20.5 μL、海葱
流浸膏 9.0 μL、克斯兰纳流浸膏 4.5 μL，香港万辉
药业有限公司产品，批号：110401。
1.4 仪器与试剂
Agilent 1260 型高效液相色谱仪，1260 Infintiy
蒸发光散射检测器 （G4218A），AL 204 万分之一电
子分析天平，购自梅特勒-托利多仪器（上海）有限
公司；402 AI 型超声雾化器， 江苏鱼跃医疗设备股
份有限公司产品；DFY-200 型高速万能粉碎机，温
岭市林大机械有限公司产品；氨水、二甲苯，均为分
析纯试剂，重庆川东化工（集团）有限公司化学试剂
厂产品。
2.1 抗炎活性部位的研究
二甲苯致小鼠耳廓肿胀[4]。 取小鼠 110只，雌雄
各半，随机分成 11 组：生理盐水对照组（空白组），
石油醚提取物高、中、低剂量组，食用酒精提取物
高、中、低剂量组，水提取物高、中、低剂量组（生药
量 7.50、3.25、1.63 g/kg），阿司匹林阳性对照组。 阳
性药按 300 mg/kg 药量给药， 其余给药组按相应剂
量给药，每日 1 次，给药体积按 20 mL/kg，连续给药
7 d。 末次给药 45 min后，于小鼠右耳均匀涂二甲苯
40 μL致炎， 左耳不涂为正常耳。 15 min 后脱颈处
死，将左、右两耳片切下，以 8 mm 打孔器取下左、右
耳片，立即用天平称质量（mg），计算左右耳肿胀度
及抑制率，比较各组之间的抗炎活性差异。
耳肿胀度=右耳质量－左耳质量
抑制率=
对照组耳廓肿胀度-给药组耳廓肿胀度
对照组耳廓肿胀度
×100%
材料与方法1
concentrated in the consumption of alcohol extract parts and water extract high doses parts.
Keyword： Reineckia carnea，different solvent extract，anti-inflammation activity，antitussive activity
方 法2
貐貜貨
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JIN Zhao -lei，et al： Experimental Studies on Anti -Inflammatory and
Antitussive Activity of Extract from Reineckia
carnea and Associated Pharmacodynamics
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2.2 止咳活性部位研究
氨水引咳法[4]。 取小鼠 80只，雌雄各半，随机分
成 8 组：生理盐水对照组（空白组），石油醚提取物
高、低剂量组，食用酒精提取物高、低剂量组，水提
取物高、低剂量组（生药量 7.50、1.63 g/kg），磷酸可
待因口服液阳性对照组。阳性药按 15 mL/kg药量给
药，其余给药组按相应剂量给药，每日 1 次，给药体
积按 20 mL/kg，连续给药 6 d。 末次给药 1 h 后，按
氨水气雾引咳法，用超声雾化器雾化氨水（质量分
数 25%氢氧化铵）， 使雾化氨水均匀地喷入倒扣的
500 mL容积密闭玻璃钟罩内，然后迅速将小鼠放入
充满氨水雾气的钟罩内，喷雾 5 s，以小鼠收缩腹部
并张口作为咳嗽指标，记录咳嗽潜伏期和开始咳嗽
后 2 min内咳嗽次数。
2.3 统计学处理
结果以x軃±s 表示，实验数据采用 SPSS18.0 统计
软件进行统计学处理，采用单因素方差分析，显著
性检验标准为 P<0.05。
2.4 吉祥草不同极性提取物 HPLC-ELSD指纹图谱
液相色谱条件 ：Diamonsil （R） C18 色谱柱
（4.6 mm × 250 mm，5 μm）；ELSD 检测器：漂移管温
度 85 ℃，氮气压力 350 kPa，增益值为 6。 流动相为
乙腈（B）-水（A）溶液梯度洗脱，具体质量分数如下：
0~5 min，10% B；5~8 min，10%~25% B；8~15 min，
25% B；15~25 min，25%~27% B；25~27 min，27%~
30% B；27~35 min，30%~37% B；35~55 min，37%~
42%；55~60 min，42%~65% B；60~70 min，65%~95%
B；体积流量 0.8 mL/min，柱温 25 ℃，进样量 30 μL。
取吉祥草药材不同极性提取物（换算成等量生
药材），在上述色谱条件下，分别注入液相色谱仪，
记录 80 min 色谱图，见图 1，通过与对照品色谱图
的比较，图中 16 号峰为凯提 5-O-β-D-吡喃葡萄糖
皂苷，17号峰为 1，6-二羟基-8-甲基-口山酮。
3.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的影响
实验结果表明， 食用酒精提取物 3 个剂量组、
水提物 3 个剂量组及阳性给药组对小鼠耳廓肿胀
均有明显的抑制作用，其中食用酒精提取物高剂量
组抑制率高达到 70%， 以上各组与空白对照组比
较，差异显著（P<0.05），说明具有较好的抗炎作用；
石油醚提取物各组均没有明显作用，结果见表 1。
图 1 不同溶剂提取物 HPLC-ELSD
Fig. 1 HPLC-ELSD of different solvent extract
表 1 不同给药组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
Table 1 Effect of different drug groups on xylene -
induced mouse ear swelling x軃±s，n=10
注：与空白对照组比较 *P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
3.2 对氨水气雾致小鼠咳嗽的影响
实验结果表明，食用酒精提取物高、低剂量组
均能延长小鼠咳嗽潜伏期（P<0.05），高剂量组还能
明显减少咳嗽次数（P<0.05），说明食用酒精提取物
具有较好的止咳作用；水提物高剂量组能够延长咳
嗽潜伏期（P<0.05），减少咳嗽次数（P<0.05），同样具
有止咳作用； 石油醚提取物没有明显的止咳活性。
结果见表 2。
结果与分析3
组别 剂量/(mg/kg) 耳廓肿胀度/mg 抑制率/%
空白对照组 - 5.28±1.66
阳性给药组 300.00 2.22±0.43*** 58
石油醚高剂量组 115.20 3.54±0.66 33
石油醚中剂量组 57.60 3.56±0.72 33
石油醚低剂量组 28.80 3.60±1.08 32
食用酒精高剂量组 1737.20 1.57±0.56*** 70
食用酒精中剂量组 868.60 2.19±0.50*** 59
食用酒精低剂量组 434.30 2.31±0.62*** 56
水提高剂量组 3247.80 2.11±0.42** 60
水提中剂量组 1623.90 2.84±0.52* 46
水提低剂量组 811.95 3.21±0.56* 39
貐貜販
食品与生物技术学报 2013 年第 32 卷第 5 期
金兆磊，等： 吉祥草药材抗炎、止咳作用及谱效关系研究论文
表 2 不同给药组对氨水所致小鼠咳嗽的影响
Table 2 Effect of different drug groups on cough of mice
induced by ammonia x軃±s，n=10
注：与空白对照组比较 *P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
文献报道， 吉祥草药材中主要含有甾体类、皂
苷类化合物[5]。 药材经不同极性溶剂提取后，其化学
成分按极性大小集中，由图 1 可知，水提物化学成
分集中在Ⅰ部分， 醇提取物化学成分主要分为Ⅰ、
Ⅱ、Ⅲ部分。 结合药理数据，醇提取物具有较好的抗
炎、止咳活性。 由此可知，具有活性作用的化学成分
很有可能集中在Ⅱ、Ⅲ部分。 水提物高剂量组同样
具有较好的抗炎、止咳活性，这很有可能是不同类
型化学成分具有相同的活性。
通过不同极性提取溶剂筛选吉祥草药材的抗
炎、止咳生物活性部位。 结果显示，醇提物、水提物
都具有较好活性， 石油醚提取物没有明显效果，说
明吉祥草药材中起活性作用的化学成分主要为极
性相对较大的化合物。 为进一步分析药材中化学成
分，在相同的色谱条件下，对其进行 HPLC-ELSD 分
析，初步将药理数据与 HPLC-ELSD 结合，为下一步
吉祥草药材药效物质基础研究及其“谱效”关系研
究提供理论参考依据，这将有利于吉祥草药材及其
相关药品更深入的研究与开发。
结 语4
组别
剂量/
(mgkg)
咳嗽潜伏期/s 咳嗽次数
空白对照组 - 25.65±5.65 9.14±2.34
阳性给药组 - 59.77±7.80*** 3.43±0.57***
石油醚高剂量组 115.20 30.15±6.22 7.71±1.70
石油醚低剂量组 28.80 19.02±3.06 8.00±1.63
食用酒精高剂量组 1737.20 62.56±12.22* 4.20±0.39**
食用酒精低剂量组 434.30 54.23±7.93* 5.83±1.72
水提高剂量组 3247.80 55.74±7.76*** 5.56±1.33*
水提低剂量组 811.95 37.72±7.56 9.00±1.29
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