全 文 ：广 西 农 学 院 学 报 x 。。o , 。 ( 2 ) : 7 5一 7 `
J o u r u a l o f G
u a n g x i A g
r i e u l t “ r a l C o l l e g e
大丽花的组织培养
田慕贞
( 农学系
周祖富
植物名称 : 大丽花 ( D a 人I` a v a : i a b`11: ) , 又名大丽菊 。
材料类别 : 叶柄 、 叶片 。
培养条件 :
( 1 ) 诱导愈伤组织培养基 M S + B A 1 . o m g / L + N A A 0 . s m g / L 。
( 2 ) 芽分化培养基 M S十 B A .1 s m g / L + N A A 0 . 2 m g / L 。
( 3 ) 生根培养基 1 / Z M S + N A A 0 . s m g / L 。
以上培养基 中附加 白糖 3鲍 / L , 琼脂 5 9 / L 。 培 养室温度 26 土 2 ℃ , 每 天辅 助 照 明
一2小时 , 光强度 1 0 0 0 、 1 50 0 l x 。
生长与分化情况 : 取大丽花叶柄 、 叶片用 自来水冲洗 , 洗衣粉漂洗 s m i m后 , 再 用 自
来水冲洗 , 然后将叶柄切 成约 1 c m长 , 叶片切成约 ` c m 乞少块 , 用 .0 `呱 升 汞 溶 液 中 消 毒
6 m in
, 用无菌水洗净 , 接种在培养基 ( 1 ) 上 。 经一周后叶柄 、 叶片均巳膨 大 , 一 个月
后 , 长 出愈伤组织 。 将愈伤组织转移到培养基 ( 2 ) 中 , 经 2 、 3 个月培养 , 从愈伤组织上
逐步分化出芽 , 培养约 20 天 , 芽长至 2 ~ 3 c m高的幼苗 , 将上述无根幼苗转 到生根培养基
( 3 ) 上 15 天后 , 从幼苗基部分化出 2 、 3 条不定根形成完整植株 。
叶柄和叶片一般先诱 导出愈伤组织以后再诱导 出芽 。 此方法时间较长 , 但取材更方便 。
愈义 : 大丽花又名大丽菊 , 属于菊科多年生草本植物 。 花朵大 , 色泽鲜艳 , 花期长, 品
种多 , 有一 定观赏价值 。 通常以分枝 、 嫁接 、 扦插法进行繁殖 。 由于此花难以过夏 , 并且易
退化 , 因此采用组织培养方法进行繁殖 , 防止品种退化有一定意义 。
龟背竹的液体静置组织培养
田慕贞 周祖富
( 农学系 )
植物名称 : 龟背竹 ( M o ,: s : e r a d e l`c i o : a L i e b m ) , 又名电线兰 。
材料类别 : 茎段 。
培养条件 : ( l ) 诱导腋芽生长 用 M S十 B A 3 、 5 m g / L + N人 A 0 . 2 0 9 / L 的 液 体
培养基 , 培养材料以聚氨醋海绵作支持物 。 ( 2 ) 诱导根分化用 1 / ZM S十 N A A o . s m g / L固
本文 1 99 0 一 0 3 一 2 01佼到 。
休培养基 。 p H 5 . 7士 0 . 丈, 培养温度 2 6士之℃ , 光照强度 1 0 0 0~ 1 s o o l x , 每天光照 22小时 。
生长与分化情况 : l 、 诱导腋芽生长 : 选取盆栽龟背竹茎 , 切成约 1 c m 长带节 茎段 ,
经常规表面灭菌后 , 接种于 ( 1 ) 培养基中作静置培养 , 约 2 周腋芽开始生长 , 芽粗壮 。 培
养 4 ~ 5 周 , 幼苗生长至 2 ~ 3 c m高 。 2 、 继代培养 : 将幼苗从基部切下 , 转入到 培 养 基
附加 B A 3 m g / L , N A A 0 . 2 m g / L 中 , 约 3 周苗基部膨大 , 然后诱 导 出 1 、 3 个 芽 , 经
12 ~ 15 周培养 , 形成 5 、 10 个丛生芽 。 经多沃继代培养 , 可获得较多幼苗 。 3 、 诱 导 根 分
化 : 将 3 ~ 4 c m高的无根苗从基部切下 , 转入到培养基 ( 2 ) 中 。 约 3 周后从幼苗 基 部 分
化出数条不定根 。 4 ~ 5 周后移植至室外蛙石中管理 , 易成活 。 20 周后可定植盆栽 。
进展及滋义 : 龟背竹的液体组织培养 国内尚未见报道 。 龟背竹属天南星科龟背竹属常绿
藤本植物 。 叶呈羽状深裂 , 各叶脉间有孔眼 , 叶形如龟背 , 是名贵耐荫观叶植物 。 传统采用
扦插繁殖 , 繁殖系数较低 。 利用组织培养方法 , 可获得较多植株 , 为龟背竹快繁提供了有效
途径 。
4 头试管牛犊在广西农学院降生
4 头采用完全体外化培养技术生产的试管牛犊 , 于 1 9 9 0年 4 月 6 日至 5 月 6’ 日相继在广
西农学院收试站降生 。 这是继 198 8年元月我院卢克焕教授研究成功的世界第一例完全体外化
试管小牛在爱尔兰共和国降生 以来 , 由卢教授领导下的广西农学院家畜繁殖研究室全体研究
人员取得的又一成果 。
该研究室 自 1 9 8 8年 3 月起承担国家及广西 “ 黄牛胚胎工程 ” 科研课题以来 , 在卢教授的
带领下 , 全体研究人员在牛试管胚胎的生产工艺和技术环节上展开了全面的深入研究 , 摸索
出一种适合于胚胎生长的体外培养液 , 改革了传统的精子体外获能方法 , 改进了受精液成分
和体外受精方法 , 采用牛卵泡的颗粒细胞或用牛输卵管上皮细胞制作单层细胞来 “ 协同 ” 培
养牛早期胚胎 。 经过一系列的改进 , 使在大批量生产的条件下 , 牛卵母细胞体外培养成熟 率
达 90 呱以 上 , 成熟培养后的卵母细胞体外受精分裂率持续稳定在 85 肠左右 , 用单层细胞 “ 协
同 ” 培养的牛早期胚胎发 育 至 桑 根 胚和囊胚率高达 50 肠 。 在胚胎冷冻方面也取得了突破性
进展 , 采用多步 降温冷冻 、 一步解冻法代替常规的冷冻和解 冻方法来冷冻完全体外化胚胎 ,
使解冻后胚胎存活率由原来的 30 肠~ 40 肠提高到 70 肠 ~ 80 肠 。 这些指标在国际上是处于领先
地位的 。
这 4 头试管牛犊 , 是该室研究人员 , 采用完全体外化培养技术生产的胚胎 , 分两批共移
植了 15 头经同期发情处理的受体母牛 , 其中 5 头妊娠 , 除一头中途流产外 , 余下 4 头均顺利
产下 ( 3 母 , 1 公 ) , 雌性西 门塔尔牛犊初生体重达 51 . 5公斤 。
完全体外化胚胎试管牛犊的降生 , 标志我院家畜繁殖技术已跃上新的台阶 。 目前 , 该研究
室人员正在致力于研究和完善一整套高效率 、 低成本 、 简便 、 实用的体外胚胎标准化 、 工厂
化生产流程 , 以便推广应用 。
谭世俭