全 文 ：中国卫生产业
E XP E R I M E NTA L S T UDY 实验研究
C HI NA HE A L T H I NDUS T R Y
独角莲系天南星科多年生草本植物，在我国传统中医治疗中
广泛用于治疗多种恶性肿瘤，有较好的临床疗效，同时动物模型
实验也显示独角莲明显抑制肿瘤生长 [1]。 有人研究了独角莲的抗
肿瘤活性成分，结果表明其水提取物、二氯甲烷提取物和乙醚提
取物均具有较强的体外抗肿瘤作用 [2-3]。独角莲口服对消化系统刺
激性很强，脂溶性成分不利于静脉给药 [4]。 因此，我们研制了独角
莲油微乳，以解决独角莲口服刺激性大和静脉给药的困难。
1 实验材料
1.1 仪器和药品
BSXT-06 型索氏提取器（上海）；ELS800 激光粒度/Zeta 电位
分析仪（日本）；JSM-T200 扫描型电子显微镜（JEOL，日本）。 生独
角莲 （辽宁凤城）； 聚乙二醇－二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 （PEG－
DSPE）（Polylipid Co. Ltd， 美国）。
1.2 动物
昆明小鼠，18~20g，雌性，（沈阳医学院实验动物中心，许可证：
SYXK(辽)2003-0026）；S180 肉瘤瘤原及艾氏腹水癌（由天津医药
科学研究院）。
2 试验方法
2.1 独角莲油微乳的制备
取干燥独角莲块茎 500g , 用粉碎机制成粉末。采用索氏提取
器，以二氯甲烷为溶剂，提取至 2 h, 转移提取液入旋转蒸发仪，
回收二氯甲烷，即得到淡黄色独角莲油，置通风橱中，挥发残留二
氯甲烷至无味为止，大约 5 mL。 取独角莲油 0.5 mL，PEG-DSPE
（PEG 分子量为 2000，表面活性剂）1 g，胆固醇 50 mg，把表面活
性剂和胆固醇溶于 100 mL 无水乙醇中，然后与独角莲油混合，在
50℃的水浴中混合成透明溶液，转移到旋转蒸发仪中，除去乙醇，
制成薄膜，然后加入 50 mL5%注射用葡萄糖，于冰水中高速分散
5 min，反复 3次，200nm无菌微孔滤膜过滤即得独角莲油微乳。
2.2 急性毒性试验
寇氏法计算独角莲油微乳的半数致死量（LD50）和 95%可信限。
2.3 动物肿瘤模型的建立
在无菌条件下，取第 10~14天生长良好的 S180 瘤原和艾氏腹
水癌瘤原，剥去包膜及中心坏死组织，用生理盐水洗净，分别制备
体积比为 1：10 的匀浆。 在动物前肢右腋下进行碘酒/乙醇消毒，
然后接种 S180 肉瘤，每只动物 0.2 mL 瘤细胞匀浆悬液，建立实
体型动物肿瘤模型。 将艾氏腹水癌瘤原用注射用生理盐水稀释
10 倍，摇匀，每只小鼠腹腔注射 0.2 mL，建立腹水型肿瘤模型。 于
接种后次日，按体重差别最小原则，将动物按体重差最小原则分
为 5 组每组 20 只，且雌、雄动物数相等。
2.4 给药与药效评价
给药方案：阳性对照阿霉素剂量为 1mg/kg,每日尾静脉给药 1
次，共 9 次。 实验组共设高、中、低三个剂量，分别为：0.08、0.04 和
0.02（mL 独角莲油微乳 /kg 动物）。 肿瘤接种后第 21 天，处死动
物，解剖剥离 S180 瘤块 ,称瘤重，计算肿瘤生长抑制率（TIR），计
算公式为 TIR =（对照组平均瘤重-实验组平均瘤重）/对照组平均
瘤重。 腹水型动物肿瘤模型，采用生命延长率来评价药效。
2.5 统计学方法
以上数据采用 SPSS 13.0 进行数据处理，以（x±s），表示，行 t检
验。 检验的显著性水准为 P＝0.05（显著水平）；P＝0.01（极显著水平）。
3 结果
3.1 独角莲油微乳的急性毒性
LD50=0.4mL 独角莲油 /kg 动物 ，95%可信限为 ： [0.36，0.52]
（独角莲油/kg 动物)。
3.2 独角莲油微乳的抗肿瘤作用
见表 1。
结果表明，独角莲油微乳，经静脉给药，可以显著降低 S180
肉瘤的生长速度，并延长艾氏腹水癌动物的生存时间。
4 讨论
微乳（nanoemulsion）是由水、油、表面活性剂等组成，粒径为
1~150nm、各向同性的透明或半透明的均相分散体系 [5]。 微乳具有
许多其它制剂无可比拟的优点：属热力学稳定系统，经热压灭菌
或离心也不能使之分层；工艺简单，制备过程不需特殊设备；黏度
低，可减少注射时的疼痛；具有缓释和靶向作用，能够促进所携带
的药物蓄积到血管通透性较高的肿瘤组织，减少所携带药物向正
常组织分布，降低其不良反应。独角莲油不溶于水难以静脉注射，
加之毒性大，口服刺激性严重 [6]。 因此，微乳是独角莲油比较理想
的载体。
[作者简介] 李昭(1979-），女，硕士，讲师，沈阳市皇姑区黄河北大街 146
号，沈阳医学院药理教研室 E－mail ：lizhao77720@126.com。
独角莲油微乳的抗肿瘤作用
李 昭 1 周月宏 2 王俊平 1
1.沈阳医学院药理学教研室，辽宁沈阳 110034；2.沈阳医学院附属奉天医院，辽宁沈阳 110024
[摘要] 目的 研制独角莲油微乳，并评价其对小鼠肉瘤 S180 及小鼠艾氏腹水癌的抑制作用。 方法 采用索氏提取器，以二氯
甲烷为溶媒，提取独角莲油；以 PEG-DSPE 为表面活性剂，制备独角莲挥发油微乳；用扫描电镜观察其形态；建立小鼠肉瘤
S180 和小鼠艾氏腹水癌模型，评价其对小鼠肿瘤的抑制作用。 结果 独角莲油微乳，粒径大约 100nm。 采用静脉注射给药途
径，独角莲油微乳具有显著地抑制小鼠 S180 肉瘤的生长速度，延长荷有艾氏腹水癌的小鼠的生命的作用。结论 独角莲油微
乳，大小均匀，具有显著地抗肿瘤作用。
[关键词] 独角莲油; 微乳; 抗肿瘤作用
[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）04（a）-0012-02
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DOI:10.16659/j.cnki.1672-5654.2014.10.016
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（上接第 11 页）
本院将 32 例韦格纳肉芽肿患者作为研究对象， 对其外周血
免疫细胞上 IL-17 受体的表达进行检测。通过研究发现，IL-17 参
与了自身免疫疾病-韦格纳肉芽肿（WG），但其作用与机制尚不是
十分清楚，结合相关的临床研究资料，本院认为 IL-17 受体的作
用机制可能与其诱导自身抗体的产生有一定的关系。 而在 David
等人的研究中， 肾小球肾炎模型鼠-BXD2 里，IL-17 受体可以直
接对生发中心的 B 细胞起到作用，促使其发育，进而迁移，直到分
化为抗体并产生细胞。
而在本次研究中也发现， 韦格纳肉芽肿患者与正常人相比，
前者外周血免疫 B 淋巴细胞和浆细胞上 IL-17 受体的表达要显
著高于后者，因此也提示 IL-17 受体对韦格纳肉芽肿患者外周血
免疫 B 淋巴细胞发育的初始阶段、 分化成抗体产生细胞的终端
阶段起到了明显的作用。 另外， 韦格纳肉芽肿患者体内增多的
Th17 比例与其 IL-17 受体的浓度相同，由此可见，Th12 通过与 B
淋巴细胞上 IL-17 受体的相互作用，从而启动下游信号如抗体产
生等参与了 WG 的发病。
另外，针对采用两种不同药物治疗的活动期患者进行比较发
现，12 例采用甲氨喋呤治疗的患者与 9 例采用环磷酰胺治疗的
患者，其外周血免疫细胞上 IL-17 受体的表达无明显差异，不具
统计学意义。 由此可见，在两种免疫抑制剂的疗效差异中，IL 一
17 受体的表达并非起着决定性的因素。 但是，通过检测也发现，
活动期患者外周免疫 B 淋巴细胞和浆细胞上 IL-17 受体的表达
也较低于非活动期患者，此种原因目前还不是很明确。 临床上较
认同的一种说法是：为了有效控制活动期患者的病情，采取具有
较强效果的免疫抑制剂联合，而非活动期患者一般只采用较为缓
和的免疫抑制剂维持。由此也使得免设抑制剂的药理作用，对患者
外周免疫 B 淋巴细胞与浆细胞上 IL-17 受体的表达造成了一定
程度的抑制，但是，此种说法只是一种猜测，还有待进一步去证实。
综上所述，同正常人相比，韦格纳肉芽肿（WG）患者外周血免
疫 B 淋巴细胞和浆细胞上 IL-17 受体的表达有明显的提高。
[参考文献]
[1] 姜波.韦格纳肉芽肿病患者树突状细胞蛋白酶活化受体－2 的表达[J].中
华风湿病学杂志,2011,2(2):83-84.
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研究[J].中国临床医学影像杂志,2010,6(6):393-394.
[3] 王海燕，刘茜，文仲光，等.韦格纳肉芽肿病 26 例临床分析 [J].疑难病
杂志,2013,7(32):100-101.
（收稿日期：2014-01-05）
表 1 独角莲油微乳（DON）静脉给药对小鼠 S180 抑瘤率及小鼠艾氏腹水癌肉瘤生命延长率的作用
生理盐水
阿霉素
DON（低）
DON（中）
DON（高）
组别
-
1mg
0.02mL
0.04mL
0.08mL
剂量(药量/kg)
20
20
20
20
20
动物数(只)
21.2/23.8
21.2/21.3
21.4/22.1
21.2/21.8
21.6/20.6
动物体重（g,始/束）
1.56±0.42
0.55±0.11
1.06±0.29
0.88±0.21
0.76±0.19
瘤重（g）
64.7
32.1
43.6
51.3
抑瘤率（%）
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
P
91.8
38.8
69.3
82.9
<0.01
<0.01
<0.01
<0.01
生命延长率（%） P
本实验制备的独角莲油微乳，粒径大约 100nm。 采用静脉注射
给药途径，对 S180肉瘤和艾氏腹水癌小鼠模型进行抗肿瘤作用的
研究，以肿瘤生长抑制率（TIR）和生命延长率作为考察指标，独角
莲油微乳高、中、低剂量组均抑制肿瘤 S180 的生长，其中高剂量
独角莲油微乳组抑瘤率高达 51.3%，并且各组 P<0.01，三剂量组
对艾氏腹水癌的生长延长率最高达 82.9%，各组 P<0.01，可见独
角莲油微乳具有显著地抑制小鼠 S180 肉瘤的生长速度，延长艾氏
腹水癌的小鼠的生命的作用。
本实验显示独角莲油微乳，大小均匀，实现了注射液给药，避
免了独角莲对胃肠道的强烈刺激，独角莲油微乳可以作为抗肿瘤
药物的理想载体 [7-8]。 独角莲油微乳具有显著地抗实体肿瘤作用，
也能够延长腹水型荷瘤动物的生命时间。 因此，独角莲油微乳有
可能成为一种新型的抗肿瘤药物。 然而，对于独角莲油的抗癌活
性成分、独角莲油的抗癌作用机制及制造工艺、其是否与其它抗
肿瘤药物具有协同抗肿瘤作用等方面，尚待进一步研究。
[参考文献]
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（收稿日期：2013-10-28）
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