全 文 ：竹子因开花周期较长，且开花花期无法预测，种子获取
十分困难。因此，采用组织培养技术，对竹子进行快速扩繁，
是目前解决竹子种苗繁殖效率低问题的有效方法之一。在
组织培养过程中，菌类污染是培养过程中常见且必须高度
重视的问题，其污染来源一般可分为 3 类：第 1 类是材料带
菌，第 2 类是接种污染，第 3 类是培养过程污染 [1]。因而植物
组织培养技术的基础是获得无菌材料，即有效解决材料带
菌问题，理论上污染率应该控制在 8%以内，但实际操作过
程中，一般污染率会达到 20%左右，甚至更高。再者，竹类植
物与其他植物相比，竹子外植体的消毒灭菌则更困难，很难
达到理想的灭菌效果，这可能与它的外在形态结构有关 [2]。
外植体表面消毒灭菌的关键就是要选择合适的消毒剂和消
毒时间，同时还要兼顾消毒灭菌后外植体材料的存活率、生
长状况等[3]。
很多学者对于竹子外植体的灭菌普遍采用的方式是以
酒精（75%）与升汞（0.05%~0.20%）或次氯酸钠（0.5%~2.0%）
配合使用，然后再根据不同的外植体材料情况进行不同时
间的灭菌 [4]。本试验以云南师范大学竹类研究所提供的云南
龙竹（Dendrocalamus yunnanicus Hsuch et D.Z.Li）种子为外植
体材料，以 MS 培养基添加 1mg/L 6-BA 为起始培养基，进行
了酒精（75%）配合升汞不同消毒灭菌时间的比较，以期从中
筛选出较适宜龙竹种子外植体的消毒灭菌方法。
1 材料与方法
1.1 试验材料
选取成熟度和饱满程度较高的云南龙竹健康种子（此
种子已干燥储藏超过 1 年），仔细筛选去除发黑、发霉和结
构不完整的种子，剥去外壳且不能伤及胚芽部分，最后留下
色泽较好、颗粒饱满且结构完整的种粒备用。
1.2 试验方法
把选好的种粒用 75%酒精消毒 15 s 并用无菌水清洗
后，再用 0.01%升汞浸泡做不同时间的消毒灭菌处理。所设
置的 4 个不同处理时间分别为 2.0、2.5、3.0、3.5 h。处理结束
后，分别用无菌水振荡清洗 4~5 次，每次 5~7 min，分别记为
处理 1、2、3、4。用无菌滤纸吸干种粒上的水分，分别接种到
MS+1 mg/L 6-BA+5 g/L琼脂粉+30 g/L 蔗糖培养基中。每处理
接种 6 组，每组 5 个试管，每试管接种 1 粒种子，共计 30 粒
种子，置于 23～25 ℃、光照 2 000 lx、光照时间 12 h/d 条件下
培养[5-6]。
观察记载各处理的种子在接种 5、10、15、20 d 后的污染
情况和发芽情况，并对其 15 d 时的污染情况和 20 d 时的发
芽情况进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 升汞不同消毒灭菌时间处理种子的污染情况
由表 1 可知，接种 15 d 后，处理 1、2、3、4 的污染数分别
为 2.00、1.67、0.83、0.50 粒。经方差（新复极差法）分析，处理
1、2、3、4 之间的差异极显著，而组间（重复间）差异不显著。
进一步的多重比较分析结果（表 2）表明，处理 1 与处理 3、4
差异都极显著，而与处理 2 无显著差异；处理 2 与处理 4 差
异极显著，与处理 3 差异显著；处理 3 和处理 4 差异不显
著。结合各处理的污染率可得出，随着消毒时间的增加，其
云南龙竹种子外植体适宜灭菌时间筛选试验
李云海 陈丽华 刘 艳
（云南师范大学生命科学学院，云南昆明 650500）
摘要 以云南龙竹的成熟种子为试验材料，采用 75%酒精配合 0.01%升汞作消毒灭菌剂，并设置 0.01%升汞的不同消毒灭菌时间处理
的对比。结果表明：在用 75%酒精处理 15 s 后，再用 0.01%升汞消毒灭菌处理，其适宜的消毒灭菌处理时间为 3 h。在此消毒灭菌时间处理
情况下，龙竹种子外植体的污染率已较低，为 16.7%；而发芽率仍较高，可达到 72.0%。
关键词 云南龙竹；组织培养；种子；外植体；灭菌
中图分类号 S795 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）06-0159-01
基金项目 云南师范大学“生物能源持续开发利用教育部工程研究中
心”；云南省生物质能与环境生物技术重点实验室开放基金
项目“竹子组织培养快速繁殖研究”。
作者简介 李云海（1964-），男，云南永仁人，副研究员，从事植物组织
培养等农业生物技术的研究工作。
收稿日期 2016-02-29
处理
污染数∥粒 污染率
%Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 合计 平均
1 2 2 3 2 2 1 12 2.00 40.0
2 1 2 1 2 2 2 10 1.67 33.3
3 1 1 0 1 1 1 5 0.83 16.7
4 0 0 1 1 0 1 3 0.50 10.0
表 1 云南龙竹种子外植体消毒灭菌 15 d后污染情况
处理 污染平均数（Xi） 差异显著性
1 2.00 1.50** 1.17** 0.33
2 1.67 1.17** 0.84*
3 0.83 0.33
4 0.50
表 2 4种不同处理污染程度的差异显著性
注：** 表示差异极显著；* 表示差异显著。
污染程度越来越低，至处理 3、4 时，污染程度已较低且二者
已无显著差异。
2.2 升汞消毒时间对竹子种子外植体发芽情况的影响
由表 3 可知，接种 20 d 后，处理 1、2、3、4 的发芽率分别
为 94.4%、95.0%、72.0%、44.4%，即随着升汞消毒灭菌时间
的增加，各处理的发芽率呈现先增加后降低的趋势，最高达
（下转第 165 页）
林业科学现代农业科技 2016 年第 6 期
159
95.0%，最低为 44.4%。方差分析结果显示，处理 2 与处理 4
差异极显著；处理 1、3 与处理 4 差异显著；而处理 1、2、3 之
间差异不显著。
3 结论与讨论
本试验以云南龙竹的成熟种子为试验材料，采用 75%酒
精配合 0.01%升汞作消毒灭菌剂，并设置 0.01%升汞的不
同消毒灭菌时间处理的对比。试验结果表明：在用 75%酒
精处理 15 s 后，再用 0.01%升汞消毒灭菌处理，随着 0.01%
升汞消毒灭菌处理时间的增加，各处理的污染率显著降低，
而剩余（未污染）种子的发芽率则呈现先升高后又降低的趋
势。分析表明，用 0.01%升汞对云南龙竹种子进行消毒灭菌
处理，其适宜的处理时间为 3 h。在此消毒灭菌时间处理情
况下，龙竹种子外植体的污染率已较低，为 16.7%；而发芽
率仍较高，可达到 72.0%。而处理时间再增加 （如处理 3.5
h），则显著影响种子的发芽率（仅为 44.4%），污染率却降低
不显著。
本试验因为考虑到消毒灭菌剂升汞的较强毒性，因此没
有使用其较高浓度（如 0.05%~0.20%）来处理外植体材料，
以减少用无菌水反复冲洗及升汞本身的毒性对外植体材料
的伤害。试验结果也表明，只要达到足够长的灭菌处理时间，
较低浓度的升汞也能够显著控制植物外植体材料的污染 ，
且种子等材料的成活和发芽率也能得到保障。特别是那些
比较难得到的外植体材料，首先得保障其外植体材料不被
杀死，在此基础上才能进一步考虑如何提高杀菌效率。
4 参考文献
[1] 曹雄丽，文韵，陶现灵，等.32 种经济竹种的组培及苗木培育技术研
究[J].林业调查规划，2012，37（5）：128-134.
[2] 王光萍，丁雨龙，黄敏仁，等 .观赏竹的试管快繁研究 [J].林业科学，
2005，41（5）：51-56.
[3] 李春芳，程治英，杨俊波，等 .云南龙竹的快速繁殖和离体保存研究
[J].亚热带植物科学，2012，2（3）：60-62.
[4] 高志明 ，谢锦钟 .竹子组织培养技术研究进展 [J].世界竹藤通讯 ，
2013，11（2）：1-6.
[5] 耿树香，普晓兰，王曙光.巨龙竹种子、小穗外植体愈伤组织的诱导
培养[J].西部林业科学，2006（4）：78-83.
[6] 李云海，陈丽华，杨娟，等.孝顺竹外植体适宜消毒方法及丛芽诱导
培养基的筛选[J].云南农业科技，2008（2）：18-19.
处理
发芽数∥粒 发芽率
%Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 合计 平均
1 3 3 2 3 3 3 17 2.83 94.4
2 4 3 3 3 3 3 19 3.17 95.0
3 3 3 2 3 3 4 18 3.00 72.0
4 3 0 2 2 2 3 12 2.00 44.4
表 3 云南龙竹种子外植体灭菌后 20 d发芽情况（上接第 159页）
（上接第 160页）
击；在湖边水中生长的狼尾草状况依然良好 ，耐水湿性能
较强。
4 讨论
（1）降雨侵蚀往往自表层开始，因此提高表层土壤的抗
冲能力，利于土壤抵抗雨水侵蚀。狼尾草草地覆盖度较大，
根系发达，在土体中穿插、缠绕，促进了土壤团聚，从而提高
了土壤的抗分散和悬浮的能力，抵抗径流等抗侵蚀能力大
大提高[1-4]。
（2）狼尾草能够在湖边水量较充足的环境下生长良好，
说明其较耐水湿，适应能力很强。据此，可以考虑利用其进
行湿地园林造景、护坡。
（3）园林绿化在选择水生观赏植物时，应坚持选择观赏
价值高、经济用途广的植物为主，多层次、多种类为辅的原
则，一是适应当地气候条件及人们的审美要求；二是冬季保
护措施简单易行、成本低；三是适应当地的水质、土壤条件；
四是不会形成生态危害，泛滥成灾[1-4]。
水生观赏植物在水面的布置，要考虑水面大小、水位深
浅、种植比例以及与周围环境的协调性。种植比例以占总水
面的 30%~50%为宜。必要时可以在水下修筑适宜不同水生
观赏植物生长的定植池，防止各类植物相互混杂影响植物
的生长和景观效果 [1-4]。
5 参考文献
[1] 吕艺超.浅谈水生植物在我国园林景观中的应用[J].知识经济，2012
（4）：114.
[2] 水生植物[J].北方园艺，2013（13）：103.
[3] 马小琳.水生观赏植物及应用[J].园林科技，2007（2）：3-5.
[4] 孙威.水体景观生态设计中水生植物的净化作用与应用分析[J].南方
农业，2015（21）：132.
降雨量相对少且分布不均，道路系统较差，在项目建设中需
要加大建设力度予以改观。
2.2.2 农产品加工水平较低。目前，彭阳农产品加工业尚处
于起步阶段，加工企业素质不高，名牌企业或大型企业较少，
资源综合利用率低；企业新工艺、新材料、新技术等应用程
度和自主开发能力不高，产品单一；农产品标准不健全 [1-4]。
2.2.3 农产品科技含量不高。主要表现在以下几点：一是传
统农业依旧占主导地位，农产品结构单一，新品种少；二是
投入技术创新和产品研发的资金较少，农业专业科研团队
和研发中心的攻关力量尚未完全形成 [1-4]。
3 结论
在彭阳县发展 6 666.67 hm2油用牡丹经济林种植基地，
以达到防止水土流失，改善生态环境的目的 ，对形成高端
牡丹油生产基地，提升彭阳形象，增加农民收入具有重要的
意义，因此建设 6 666.67 hm2油用牡丹经济林是必要的、可
行的[5]。
4 参考文献
[1] 李育材.中国油用牡丹工程的战略思考[J].中国工程科学，2014（10）：
58-63.
[2] 中共中央 国务院关于加快发展现代农业进一步增强农村发展活力
的若干意见[J].中国合作经济，2013（2）：4-9
[3] 何国长.兰州新区现代生态农业产业化发展的战略对策研究[J].兰州
学刊，2013（10）：195-202.
[4] 罗玛.2013 年中央一号文件公布 重点是着力构建新型农业经营体系
[J].内江科技，2013（8）：1-4.
[5] 陈慧玲.油用牡丹研究进展[J].2013（5）：41-44.
∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥
∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥∥
高秀芳等：彭阳县发展油用牡丹经济林的可行性分析
165