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马来甜龙竹试管苗生根诱导培养研究



全 文 :林业科学 现代农业科技 2016年第 24期
马来甜龙竹试管苗生根诱导培养研究
李云海 陈丽华 刘云谣
(云南师范大学生命科学学院,云南昆明 650500)
摘要 以马来甜龙竹的试管苗为试验材料,采用 1/2MS+6-BA1.0 mg/L+NAA(0.5、1.5、2.5、3.5 mg/L)+0.7%琼脂+30 g/L 蔗糖,pH 值为
5.8 的培养基,对马来甜龙竹试管苗生根的影响进行研究。结果表明:在培养基为 1/2MS+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5 mg/L+0.7%琼脂+30 g/L 蔗
糖时,马来甜龙竹试管苗在接种 45 d后的生根、叶长、叶色和株高等综合情况都比较好,并且生根率高达 85%,利于试管苗的驯化移栽。
关键词 马来甜龙竹;组织培养;试管苗;生根诱导;生根率
中图分类号 S795 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2016)24-0146-01
马来甜龙竹 [(Dendrocalamus aspera (J.A.et J.H.Schult.)
Backer ex Heyhe)]属竹亚科 (Gramiaeae bambnsoideae)牡竹
属丛生大型竹类,竹干横切面周长 10~30 cm,竹壁厚 2.2~2.5
cm,株高 20~30 m,是世界上巨型竹种之一。马来甜龙竹造
型美观,是园林绿化的优良竹种 [1];其笋有甜味,也具有较高
的食用和经济价值。
马来甜龙竹试管苗诱导生根方面,已有学者做了相应的
试验研究工作。刘荣辉等 [1]研究得到 NAA 5 mg/L+多效唑 0.1
mg/L利于马来甜龙竹生根;1/2MS+NAA1.0 mg/L+20 g/L蔗糖+
0.5%琼脂(pH 值 5.8)和 1/2MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+
PP333 0.1 mg/L则是龚力波等[2]和苏 海等[3]通过研究得到的适合
马来甜龙竹生根诱导的培养基。此外,TDZ也可显著诱导竹子
生根 [4],国外也有报道称 IAA 和香豆素配合使用可以使生根
率达 90%以上[5]。本试验以云南师范大学薯类作物研究所提供
的马来甜龙竹试管苗为试验材料,以 1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+
NAA(0.5、1.5、2.5、3.5 mg/L)+0.7%琼脂+30%蔗糖、pH值为 5.8
的培养基进行研究,以期从中筛选出可用于本试验诱导马来
甜龙竹试管苗生根的较适宜的培养基激素浓度。
1 材料与方法
1.1 试验设计
以马来甜龙竹试管苗为试验材料,以 1/2MS 培养基添
加 6-BA 1.0 mg/L 为基础(蔗糖和琼脂的用量分别为 30 g/L
和 0.7%,pH 值调至 5.8),设置萘乙酸(NAA)浓度为 4 个水
平,即 0.5、1.5、2.5、3.5 mg/L,各试验处理分别用 L-1、L-2、L-
3和 L-4表示。
1.2 试验方法
把供试的长势较均匀的马来甜龙竹试管苗剪去基部的
愈伤组织等,切分成 2~3 苗的小丛并转接到不同 NAA 浓度
的培养基上。每处理接种 5瓶,每瓶接种 5小丛,封膜后放置
于培养室中培养。培养室温度为 21~23℃,光照强度 2 000 lx,
光照时间 12 h/d。
1.3 调查统计
每隔 15 d 观察记录马来甜龙竹试管苗接种后的生根及
生长情况,至第 45 天时对其生根和生长情况进行测量并作
生物统计分析[6]。
2 结果与分析
2.1 不同处理生根情况
由表 1可知,到第 45天时,从平均生根数来看,处理 L-
2 最多,为 4.25 丛;处理 L-1 次之,为 3.20 丛;其后依次为
L-3、L-4,分别为 2.75丛、2.33 丛。方差分析中各处理之间差
异显著,各重复之间差异不显著。进一步的多重比较结果
为,L-2 与 L-3 和 L-4 之间差异极显著;L-2 与 L-1 之间差
异显著;L-1 与 L-3、L-4 之间及 L-3 与 L-4 之间差异不显
著(表 2)。从生根率来看,随着 NAA 的浓度增加,马来甜龙
竹试管苗的生根率不断上升,当到达 L-2 的浓度时,生根率
达到最大;但当 NAA 的浓度升至 L-3 和 L-4 时,二者的差
异已经不明显并且生根率反而降低,故处理 L-2的培养基比
较适合马来甜龙竹的生根诱导培养。
2.2 不同处理株高生长情况
由表 2 可知,到第 45 天,各处理的植株均有一定程度
的生长,其中处理 L-2植株最高,为 7.45 cm;其次为处理 L-1,
株高为 7.16 cm;处理 L-4 居第三,株高为 6.37 cm;处理 L-3
最矮,为 6.18 cm。进一步方差分析和多重比较可得出,L-2
与 L-1、L-3、L-4 之间差异极显著;L-1 与 L-3、L-4 之间差
异显著;L-3 与 L-4 之间差异不显著。因此,处理 L-2 的促
生长效果较之其他 3个处理稍好。
2.3 不同处理叶片长度
由表 3 可知,到第 45 天,处理 L-2 的叶片平均长度最
高,为 3.23 cm。方差分析表明,各处理之间差异显著,各重
复之间差异不显著。进一步多重比较结果表明,L-2 与 L-1、
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基金项目 云南师范大学“生物能源持续开发利用教育部工程研究中
心”及“云南省生物质能与环境生物技术重点实验室”开放
基金项目“竹子组织培养快速繁殖研究”。
作者简介 李云海(1964-),男,云南永仁人,副研究员,从事植物组织
培养等农业生物技术的研究工作。
收稿日期 2016-10-27
表 2 不同处理下马来甜龙竹生根试管苗植株高度
处理 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 合计 平均
L-1 7.0 7.4 7.5 7.1 6.8 35.8 7.16 aBC
L-2 7.6 7.4 7.3 7.5 29.8 7.45 aA
L-3 5.5 6.2 6.7 6.3 24.7 6.18 bC
L-4 6.5 5.8 6.8 19.1 6.37 bC
(cm)
表 1 不同处理下马来甜龙竹试管苗的生根情况
处理
第 45 天生根数/丛 生根率
%Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 合计 平均
L-1 4 4 2 3 3 16 3.20 bAB 64.00 bAB
L-2 5 4 4 4 17 4.25 aA 85.00 aA
L-3 3 3 3 2 11 2.75 bB 55.00 bB
L-4 3 2 2 7 2.33 bB 46.67 bB
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林业科学 现代农业科技 2016年第 24期
(上接第 146页)
L-3 之间差异极显著,L-2 与 L-4 之间差异显著,L-1 与 L-
3、L-4 之间,L-3 与 L-4 之间差异不显著。可以看出,处理
L-2马来甜龙竹试管苗叶片的生长情况较好。
3 结论与讨论
综合上述各处理中试管苗的平均生根数、平均株高和
平均叶长数据结果的统计分析,可以得出本试验中较适宜
诱导马来甜龙竹试管苗生根的培养基配方为 1/2MS+6-
BA1.0 mg/L +NAA1.5 mg/L +0.7%琼脂 +30 g/L 蔗糖 ,pH 值
5.8。在此培养基的诱导培养下,马来甜龙竹试管苗在生根情
况及植株整体的生长情况、植株的高度和叶片长度等方面均
有较大的优势。除生根率可高达 85%以外,同时也更利于之
后试管苗的驯化移栽。
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表 3 不同处理下马来甜龙竹生根试管苗叶片长度
处理 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 合计 平均
L-1 2.8 3.0 2.6 2.5 2.6 13.5 2.70 bB
L-2 3.2 3.5 3.0 3.2 12.9 3.23 aA
L-3 2.5 2.6 3.0 2.3 10.4 2.60 bB
L-4 2.5 3.0 2.7 8.2 2.73 bAB
(cm)
所在省或市,交由市场管理。四是加强林业宏观管理,特别
是要重点加强林业法制建设 ,营造公平的林业发展环境 ;
加强林业公共事业管理,增强林业公益服务能力 ;加强森
林资源和林业灾害监测,科学制定林业宏观调控政策 ,并
为森林保险和林业灾害追偿提供依据;加强生态公益林管
理,提高生态公益林健康水平 ,以提升生态公益林生态服
务能力水平;加强林农或者林业投资者权益保护 ,按照土
地市场价格水平,并考虑征占用期限与地租因素,合理确
定林地征占用补偿标准;建立林业公益诉讼机制 ,让林农
和林业投资者可以获得法律救助,来依法维护自己的合法
权益。五是建立林业项目建设工程管理制度,将林业红顶中
介全面、彻底推向市场,林业项目工程建设严格按照工程
管理措施,将规划设计、建设施工、质量监理、竣工验收清
晰地分开来,交由市场,实行公平、公开竞争,以提高林业
项目建设成效 [17-36]。
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